Cặn dịch chiết etylaxetat của thân cây Naleo (KhE)

CHƢƠNG 2 PHẦN THỰC NGHIỆM

2.4.2. Cặn dịch chiết etylaxetat của thân cây Naleo (KhE)

Dịch chiết etylaxetat làm khan bằng Na2SO4, sau đĩ cất loại dung mơi

dưới áp suất giảm, thu được 38,9 g cặn chiết. Kiểm tra sắc ký lớp mỏng thấy các chất chủ yếu tập trung ở cặn chiết với hệ dung mơi sắc ký lớp mỏng là chloroform-metanol = 9 :1. Làm tương tự như mục 2.4.1 từ 38,9g cặn chiết

Số hĩa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

EtOAc cân lấy 30,0g đem tách trên cột silicagel. Rửa giải cột bằng hệ dung mơi chloroform-metanol tăng dần theo độ phân cực (0-100%), dịch rửa giải thốt ra từ cột được thu ở những khoảng cách nhỏ (510ml/phân đoạn). Kiểm tra cặn thu được bằng sắc ký lớp mỏng và hiện màu bằng thuốc thử vanilin - H2SO4 5% sau đĩ các phân đoạn giống nhau được dồn lại rồi đem cất loại dung mơi.

2.4.2.1. Dihydroguaiaretic axit (4,4’-dihydroxy-3,3’-dimethoxy lignan) (KhE.3) (KhE.3)

Rửa giải cột bằng hệ dung mơi clorform-metanol theo tỷ lệ 9:1 thu được khối chất rắn vơ định hính. Khối chất rắn này được tách lặp lại trên cột silicagel lần hai, dùng hệ dung mơi rửa giải cột là n-hexan: etyl axetat= 10:1 thu được một khối hỗn hợp chất, dựa vào kết quả kiểm tra sắc ký lớp mỏng hệ dung mơi phát hiện cĩ 2 vết cĩ giá trị RfC = 82 và RfC = 77. Khối chất rắn này tinh chế lại trên cột silica gel cỡ hạt 0,040 – 0,063mm, rửa giải cột bằng hệ dung mơi rửa giải n-hexan – etyl axetat ở hệ dung mơi theo tỷ lệ 15 :1. thu được chất bột vơ định hính KhE.3 cĩ khối lượng 9,13mg, RfC=77, nĩng chảy ở 175-176o

C.

Phổ FT-IR νmax (cm-1): 3500, 2972, 2879, 1609, 1518, 1437, 1235, 1152, 1033, 818.

Phổ khối LC-ESI/MS (m/z): 329 [M-H]+

ứng với cơng thức phân tử C20H26O4. 1H-NMR (500MHz, CDCl3, TMS, δ ppm): 6,82 (1H, d, J=8,0Hz, H-5); 6,65 (1H, dd, J=1,5 và 8,0Hz, H-6); 6,60 (1H, d, J=1,5Hz, H-2); 5,36 (1H, s, 4-OH); 3,83 (3H, s, 5-OCH3); 2,72 (1H, dd, J=5,0 và 8,5Hz, H-6’); 2,27 (1H, dd, J=9,0 và 14,5Hz, H-2’); 1,73 (1H, m, H-8); 0,83 (3H, d, J=7,0Hz, H-9). 13C-NMR (125MHz, CDCl3, TMS, δ ppm): 146,30 (s, C-3 và 3’); 143,54 (s, C-4 và 4’); 133,75 (s, C-1 và 1’); 121,68 (d, C-6 và 6’); 113,97 (d,

Số hĩa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

38,85 (t, C-7 và 7’); 16,17 (q, C-9 và 9’).