6. Bố cục đề tài
3.3.5. TPHH của dầu nghệ được xác định bằng phương pháp sắc kí khí-
khí- khối phổ liên hợp (GC/MS):
Thành phần hoá học của dầu thân rễ nghệ vàng thu được bằng phương pháp chiết soxhlet được xác định bằng phương pháp sắc kí khí ghép khối phổ tại phòng khối phổ, Trung tâm kỹ thuật tiêu chuẩn đo lường chất lượng II- Số 2, Ngô Quyền, Đà Nẵng
a. Kết quả phân tích dịch chiếtn-hexane bằng phương pháp GS/MS:
Khi chiết thân rễ nghệ vàng bằng dung môi n-hexane thu được các cấu tử có thành phần chính thuộc nhóm monotecpenoit, sesquitecpeniot… Kết quả thể hiện các cấu tử ở Bảng 3.13
Bảng 3.13. Thành phần hóa học của dịch chiết từ củ nghệ bằng dung môi n-hexane
STT RT
(phút) Tên công thức hóa học Area (%)
1 5.888 Eucalpytol 0.16 2 8.084 Bicyclo[2.2.1]heptan-2-one,1,7,7- trimethyl-(1R) 0.10 3 8.338 Isoborneol 0.09 4 8.891 Benzenmethanol 0.31 5 9.000 3-cyclohexene-1-methanol 0.57 6 14.636 Caryophyllene 1.05 7 15.881 α-caryophyllene 3.02 8 17.139 Benzene, 1-(1,5-dimethyl-4-hexenyl)-4- methyl 5.92 9 18.249 Cyclohexene 2.87 10 20.878 Nerolidol 2 1.13 11 27.273 Ar-tumerone 22.65 12 27.455 Tumerone 4.29 13 29.469 Curlone 6.66 14 63.553 β-Sitosterol 0.64
62
Nhận xét: Kết quả thu được ở Bảng 3.13 là 14 cấu tử cho thấy thành
phần hóa học của dịch chiết từ rễ củ nghệ vàng Lào với dung môi n-hexane là một hỗn hợp gồm nhiều chất. Trong đó chủ yếu là các acid hữu cơ, các anken mạch thẳng, dẫn xuất của phenol, ete vòng.
Đáng chú ý trong số thành phần định danh được có các hợp chất có hoạt tính sinh học cao như: Eucalyptol, Isoborneol, Caryophyllene. Đặc biệt, Caryophyllene là hoạt chất có nhiều tác dụng dược lý cao.
-Caryophyllene:
+ Công thức phân tử: C15H24
+Tên IUPAC: 4,11,11-trimethyl-8-methylene-bicyclo[7.2.0]undec-4-ene + Công dụng: Nó có tác dụng giảm đau đáng kể, chống viêm, chống co thắt, kháng virus, khối u và kích thích miễn dịch. Các β-caryophyllene, bằng cách gắn vào CB2 (cannabinoid-type-2), giúp kiểm soát cơn đau, viêm, xơ vữa động mạch và bệnh loãng xương.
63
Hình 3.10. Phổ đồ biểu thị thành phần hóa học có trong dịch chiết n-hexane của rễ củ nghệ vàng Lào
64
b. Kết quả phân tích dịch chiết dichloromethane bằng phương phápGS/MS
Bao gồm các cấu tử ở Bảng 3.14
Hình 3.11. Sắc kí đồ GC/MS của dịch chiết rễ củ nghệ vàng- Lào thu được bằng dung môi dichloromethane
65
Bảng 3.14. Thành phần hóa học của dịch chiết từ củ nghệ bằng dung môi dichloromethane
STT RT
(phút) Tên công thức hóa học Area
(%) 1 5.892 Eucalyptol 0.4 2 7.107 Phenol 0.47 3 8.091 Bicyclo[2.2.1]heptan-2-one, 1,7,7-trimethyl-, (1R)- 0.1 4 8.342 Isoborneol 0.09 5 8.740 3-cyclohexene-1-ol, 4-methyl-3-(1- methylethylidene)- 0.18 6 8.897 Benzenmethanol 0.34 7 9.007 3-cyclohexene -1-methanol 0.51 8 9.645 Benzofuran 1.11 9 11.591 2-methoxy-4-vinylphenol 1.54 10 12.275 2,4-cycloheptandien-1-one 0.14 11 14.652 Caryophyllene 1.17 12 15.891 α-Caryophyllene 2.89 13 16.082 1,6,10-dodecatriene, 7,11-dimethyl-3-methylene- 0.6 14 17.225 Benzene, 1-(1,5-dimethyl-4-hexenyl)-4-methyl- 5.1 15 18.278 Cyclohexene 1.82 16 20.832 2-Butanol 0.81 17 27.332 Ar-tumerone 15.92 18 27.658 Tumerone 4.15 19 29.511 Curlone 4.65 20 32.184 1-(4-hydroxylbenzylidene)acetone 0.72 21 37.596 3-Buten-2-one, 4-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)- 1.07 22 63.568 γ-Sitosterol 0.32
66
Nhận xét: Kết quả thu được ở Bảng 3.14 là 22 cấu tử cho thấy thành
phần hóa học của dịch chiết từ rễ củ nghệ vàng Lào với dung môi dichloromethane là một hỗn hợp gồm nhiều chất. Trong đó chủ yếu là các acid hữu cơ, các anken mạch thẳng, dẫn xuất của phenol, ete vòng.
Đáng chú ý trong số thành phần định danh được có các hợp chất có hoạt tính sinh học cao như: Eucalyptol, Isoborneol, Caryophyllene, benzofuran. Đặc biệt, trong thành phần dịch chiết này chúng ta nhận thấy sự xuất hiện của benzofuran và Ar-tumerone là các hoạt chất có nhiều tác dụng dược lý cao.
Benzofuran
+ Là một dị vòng thơm, ở nhiệt độ phòng, nó là một chất lỏng dạng dầu có hương thơm
+ Tên gọi khác: 2,3-benzofuran cumaron, Benzofuran + Công thức phân tử: C8H6O
+ Công dụng: Thuốc chữa bệnh gút, tạo thuận lợi thải trừ acid uric
Ar-tumerone
+ Tên gọi khác: (6S)-2-methyl-6-(4-methylphenyl)hept-4-one + Công thức phân tử: C15H20O
67
được tiến hành gần đây trên vật thử cho thấy hợp chất này giúp não hồi phục từ các bệnh thoái hóa não bộ, như bệnh mất trí nhớ Alzheimer. Một nghiên cứu năm 2008 còn cho thấy curcumin giúp cải thiện trí nhớ ở bệnh nhân Alzheimer.
c. Kết quả phân tích dịch chiết ethylacetate bằng phương pháp GC/MS
Bao gồm các cấu tử ở bảng 3.15
Hình 3.12. Sắc kí đồ GC/MS của dịch chiết rễ củ nghệ vàng Lào bằng dung môi ethylacetate
68
Bảng 3.15. Thành phần hóa học của dịch chiết từ củ nghệ bằng dung môi ethylacetate
STT RT
(phút) Tên công thức hóa học Area
(%) 1 5.888 Eucalyptol 0.53 2 7.114 Phenol, 2-methoxy- 0.35 3 8.090 Bicyclo[2.2.1]heptan-2-one, 1,7,7- trimethyl-, (1R)- 0.10 4 8.341 Isoborneol 0.13 5 8.739 3-cyclohexene-1-ol, 1-methyl-4-(1- methylethylidene)- 0.12 6 8.638 Benzenmethanol 2.24 7 9.638 Benzofuran 1.06 8 11.576 2-methoxy-4-vinylphenol 1.89 9 14.631 Caryophyllene 0.83 10 16.004 1,6,10-dodecatriene 0.32 11 17.092 Benzene, 1-(1,5-dimethyl-4-hexenyl)-4- methyl- 6.06 12 17.635 1,3-cyclohexadiene, 5-(1,5-dumethyl-4- hexenyl)-2-methyl-3-methylene 5.82 13 21.759 Benzene, 1-methyl-3-(1-mrthylethyl)- 1.79 14 27.001 Ar-tumerone 17.19 15 27.208 Tumerone 7.30 16 29.272 Curlone 6.93
Nhận xét:Kết quả thu được ở bảng 3.15 là 16 cấu tử trong đó cấu tử có
69
d. Kết quả phân tích dịch chiết methanol bằng phương pháp GC/MS
Khi chiết soxhlet thân rễ nghệ vàng bằng dung môi methanol thành phần bao gồm các cấu tử thể hiện ở bảng 3.16
Hình 3.13. Sắc kí đồ GC/MS của dịch chiết rễ củ nghệ vàng Lào bằng dung môi methanol
70
Bảng 3.16. Thành phần hóa học của dịch chiết trong dung môi methanol
STT RT
(phút) Tên công thức hóa học Area
(%) 1 7.095 Eucalyptol 1.19 2 8.142 Phenol, 2-methoxy- 2.52 3 10.430 3- Cyclohexene-1-methanol 0.21 4 10.855 Benzaldehyde 1.97 5 19.237 Alpha- Caryphyllene 1.24 6 20.620 Benzen, 1-(1,5- dimethyl-4-hexenyl)-4- methyl-(Ar-Curcumene) 3.94 7 21.397 1,3-Cyclohexadiene, 5-(1,5-dimethyl-4- hexenyl)-2-methyl-[S-(R*, S*)] (Zingiberene) 4.19 8 22.096 Camphene 1.31 9 23.051 1,6,10-Dodecartene, 7,11-dimethyl-3- methylene-, (E)- 6.39 10 24.881 2-Butanone, 4-(4-hydroxphenyl)- 1.94 11 26.401 Benzene, 1-methyl- 2-(1-methylethyl)- 1.68
12 32.883 Ar- tumerone 24.82
13 33.094 Tumerone 3.26
14 35.509 Curlone 7.10
15 56.448 n- Hexadecanoic acid 0.34
Nhận xét: Kết quả thu được 15 cấu tử. Đặc biệt, trong thành phần dịch
chiết methanol ta nhận thấy sự xuất hiện của Camphene và Ar-Curcumene
71
Camphene
- CTPT: C10H6
- Không tan trong nước
Ar-Curcumene
- CTPT: C15H20
72
3.4. SO SÁNH THÀNH PHÀN HÓA HỌC CÓ TRONG TINH DẦU TRÍCH TỪ NGHỆ VÀNGLÀO VỚI NGHỆ VÀNG KONTUM
So với kết quả của tác giả Lê Thị Thúy Hằng (2012), Luận văn thạc sĩ khoa học, Đại học Đà Nẵng. Với cùng một phuơng pháp chưng cất lôi cuốn hơi nuớc. Thì thành phần cấu tử của hai loại nghệ được so sánh trong Bảng 3.17
Bảng 3.17. Thành phần hóa học có trong nghệ vàng Lào và nghệ vàng KonTum
STT
Tên hơp chất Thành phần
(% khối luợng) Nghệ Lào Nghệ KonTum 1 Ar-tumerone 17.40 22.34 2 Curlone 3.49 9.94 3 1,3-Cyclohexadiene, 5-(1,5- dimethyl-4-hexenyl)-2- methyl-, [S-(R*,S*)]- (Zingiberene) 22.50 7.16 4 Cyclohexene-3-(1,5-dimethyl- 4-hexenyl)- 6-methylene-[S- (R*, S*)] 11.03 5.50 5 α – Phellandrene 0.12 4.06 6 Benzene, 1-(1,5-dimethyl-4- hexenyl)-4-methyl 2.03 4.03 7 Tumerone 5.98 3.51 8 Eucalyptol 15.96 2.53
73 9 Cyclohexene-1-methyl-4-(5- methyl-1-methylene-4- hexenyl) - (S) 2.06 1.98 10 Benzene, 1- methyl-4-(1- methylethenyl) 0.08 1.95
Như vậy số lượng cấu tử có hàm lượng cao và có tác dụng dược lý, của hai loại nghệ này là gần như nhau
74
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
1. KẾT LUẬN
1.1.Qua quá trình nghiên cứu đã xác định được một số chỉ số hóa lý như
- Độ ẩm của nghệ tươi là 88,186%. - Độ ẩm của bột nghệ khô là 10,964%.
- Hàm lượng tro của bột nghệ khô là 8,630%.
- Hàm lượng các kim loại nặng Pb, Cd đều thấp hơn so với quy chuẩn của Việt Nam về quy định phụ gia phẩm màu trong thực phẩm, riêng Hg có hàm lượng cao hơn chuẩn cho phép.
1.2. Chiết tách tinh dầu củ nghệ bằng phương pháp lôi cuốn hơi nước
- Các yếu tố ảnh hưởng đến lượng tinh dầu:
+ Tỷ lệ rắn/lỏng tốt nhất để chưng cất tinh dầu nghệ là 100g/300ml + Thời gian chưng cất tốt nhất là 6 giờ
- Xác định thành phần hóa học tinh dầu rễ củ nghệ bằng phương pháp GC-MS là 28 cấu tử. Số cấu tử có hàm luợng và hoạt tính sinh học cao là:
Zingiberene (22.50%)
Ar-tumerone (17.40%)
Eucalyptol (15.66%)
Cyclohexene-3-(1,5-dimethyl-4-hexenyl)- 6-methylene-[S-(R*, S*)]
(11.03%)
1.3. Chiết tách dầu nghệ bằng phương pháp chiết soxhlet bằng 4 loại dung môi
75
+ Thời gian chiết tách tốt nhất là 8 giờ. + Có 14 cấu tử
+ Số cấu tử có hàm luợng và hoạt tính sinh học cao là:
Ar-tumerone (22.65%); Tumerone (4.29%)
- Dung môi Dichloromethane:
+ Thời gian chiết tách tốt nhất là 10 giờ. + Có 22 cấu tử
Số cấu tử có hàm luợng và hoạt tính sinh học cao là:
Ar-tumerone (15.92%); Benzofuran (1.11%); Caryophyllene(1.17%); α-Caryophyllene (2.89%)
- Dung môi ethylacetate:
+ Thời gian chiết tách tốt nhất là 10 giờ. + Có 16 cấu tử
+ Số cấu tử có hàm luợng và hoạt tính sinh học cao là:
Ar-tumerone (17.19%);
- Dung môi methanol có
+ Thời gian chiết tách tốt nhất là 8 giờ. + Có 15 cấu tử
+ Số cấu tử có hàm luợng và hoạt tính sinh học cao là:
76
1.4. Những cấu tử gần như được lặp lại trong tinh dầu và các dịch chiết hữu cơ, đó là
STT Tên hợp chất Thành phần (%khối luợng)
n-hexane Dichloro methane Ethyl acetate methanol Tinh dầu 1 Eucalpytol 0.16 0.40 0.53 1.19 -- 2 Bicyclo[2.2.1]heptan- 2-one, 1,7,7-trimethyl- , (1R)- 0.10 0.10 0.10 -- 0.18 3 Isoborneol 0.09 0.09 0.13 -- 0.13 4 Benzenmethanol 0.31 0.34 2.24 -- -- 5 3-cyclohexene-1- methanol 0.57 0.51 -- 0,21 -- 6 Caryophyllene 1.05 1.17 0.83 -- 1.06 7 Benzen, 1-(1,5- dimethyl-4-hexenyl)- 4-methyl (Ar-Curcumene) 5.92 5.10 6.06 3.94 2.03 8 Ar-tumerone 22.65 15.92 17.19 24.82 17.4 0 9 Tumerone 4.29 4.15 7.30 3.26 5.98 10 Curlone 6.66 4.65 6.93 7.10 3.49 11 3-cyclohexene-1-ol, 4-methyl-3-(1- methylethylidene) -- 0.18 0.12 -- 0.24
1.5. Đã khảo sát thăm dò hoạt tính sinh học của tinh dầu.
Chưa thấy biểu hiện hoạt tính kháng sinh và hoạt tính chống oxi hóa DPPH của tinh dầu nghệ.
77
2. KIẾN NGHỊ
-Cần tiếp tục nghiên cứu chiết tách và định danh thành phần hóa học có trong bột củ nghệ vàng -Lào bằng những dung môi khác nhau.
- Tiếp tục nghiên cứu để tách các cấu tử có hoạt tính sinh học cao trong rễ củ nghệ vàng -Lào để tìm hiểu hoạt tính sinh học và nghiên cứu các phản ứng chuyển hóa chúng.
- Nghiên cứu phân lập các hoạt chất có hàm lượng cao trong củ nghệ vàng- Lào.
- Mở rộng phạm vi nghiên cứu về thành phần hóa học trong củ nghệ vàng ở các địa bàn tỉnh khác nhau tại Nước Cộng Hòa Dân Chủ Nhân Dân Lào.
TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT
[1] Bộ Y tế (1972), Dược liệu Việt Nam, NXB Y học.
[2] Võ Văn Chi (1997), Từ điển cây thuốc Việt Nam, NXB Y học, tr.928. [3] Bùi Nguyễn Quỳnh Chiêu (2005), Nghiên cứu tách tinh dầu, curcumin từ
câynghệ vàng Curcuma longa L. và điều chế dẫn xuất rosocyanin từ curcumin, Luận văn thạc sĩ khoa học Công nghệ Hóa học, Thành phố
Hồ Chí Minh.
[4] Trịnh Đình Chính (1995), Nghiên cứu thành phần hóa học của tinh dầu một số cây thuộc họ Gừng (Zingiberaceae) ở Việt Nam, Luận án tiến
sĩ hóa học, Hà Nội.
[5] Đào Hùng Cường (2003), “Chiết tách curcumin từ củ nghệ bằng dung môi thực phẩm”, Đại học Đà Nẵng, Hóa học và ứng dụng, số 11, tr.36- 40.
[6] Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985), Phương pháp nghiên cứu hóa
học cây thuốc, NXB Y học chi nhánh Thành Phố Hồ Chí Minh.
[7] Phan Minh Giang, Văn Ngọc Hướng, Phan Tống Sơn (1998), “Đóng góp vào việc nghiên cứu hóa học và họat tính sinh học của phần chiết thân rễ nghệ trắng, (Curcuma aromatica Salisb) Việt Nam”, Hội nghị hóa học toàn quốc lần thứ III, tập 1, tr.106- 108.
[8] Phạm Hoàng Hộ (1972), “Cây cỏ miền Việt Nam”, quyển 2, Trung tâm học liệu Sài Gòn.
[9] Phạm Hoàng Hộ (1993), Cây cỏ Việt Nam, quyển 3, tập 1, NXB khoa học và kỹ thuật, Hà Nội, tr 562 – 567
[10] Văn Ngọc Hướng, Phan Minh Giang, Phan Tống Sơn (1997), “Hoạt chất sinh học từ một số loài Curcuma (Zingiberaceae) của Việt Nam. Đóng góp
vào việc nghiên cứu các hoạt chất có hoạt tímnh chống vi khuẩn từ thân rễ nghệ xanh”, Tạp chí hóa học, tập 35, số 2, tr.52- 56.
[11] Đỗ Tất Lợi (1985), Tinh dầu Việt Nam, NXB Y học Thành Phố Hồ Chí
Minh.
[12] Đỗ Tất Lợi (2006),Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXBY học. [13] NXB từ điển Bách khoa Hà Nội(1999), Từ điển bách khoa dược học [14] Hoàng Trọng Quang, Nguyễn Thị Kim Liên (2002), Dược điển Việt Nam,
NXB Y học - Hà Nội.
[15] Phan Tống Sơn, Văn Ngọc Hướng, Phan Minh Giang, Lương Sĩ Bỉnh (1987), “Về thành phần hóa học tinh dầu nghệ (Curcuma longa Linn) Việt Nam, Tạp chí hóa học”, tập 25, số 1, tr.18- 21.
[16] Phan Tống Sơn, Văn Ngọc Hướng, Lương Sĩ Bỉnh (1989), “Thành phần hóa học tinh dầu nghệ trắng (Curcuma aromatica Salisb, Zingiberaceae) Việt Nam”, Tạp chí hóa học, tập 27, số 3, tr.18-19. [17]Phan Tống Sơn, Phan Minh Giang (1997), “Sesquitterpenoid từ thân rễ
nghệ đen (Curcuma zedoaria Rosc) của Việt nam”, Tạp chí hóa học và công nghệ hóa chất, số 4, tr.9-11.
[18]Phan Tống Sơn, Văn Ngọc Hướng, Nguyễn Xuân Dũng, Lương Sĩ Bỉnh (1998), “Đóng góp vào việc nghiên cứu thành phần hóa học tinh dầu nghệ xanh (Curcuma aeruninosa Roxb, Zingiberaceae) Việt nam”, Tạp chí hóa học, tập 26, số 2, tr.18- 24.
[19] Lê Ngọc Thạch (2003), Tinh dầu, NXB Đại học quốc gia Tp Hồ Chí Minh. [20] Thái Doãn Tĩnh, Nguyễn Văn Tòng chủ biên (1983), Thực hành hóa học
hữu cơ, NXB Giáo dục – Đại học Sư phạm.
[21] Nguyễn Thị Bích Tuyết (2001), Nghiên cứu thành phần hóa học tinh dầu
một một số cây thuộc chi Curcuma và chi Kaempferia (họ Zingiberaceae) ở Việt Nam, Luận án tiến sĩ hóa học, Hà Nội.
[22] Nguyễn Thị Bích Tuyết, Trịnh Đình Chính, Đỗ Đình Rãng, Nguyễn Xuân Dũng (2001), “Thành phần hóa học của tinh dầu nghệ lá hẹp Dăk Lăk Việt Nam”, Tạp chí hóa học và công nghệ hóa chất, tập 70, số 5, tr.11-16
[23] Phạm Đình Tỵ và các cộng sự báo cáo khoa học về đề tài cấp bộ (1999), Viện hóa học các hợp chất tự nhiên, Trung tâm Khoa học và Công nghệ Quốc gia Hà Nội.
[24] Bùi Xuân Vững (2013), Giáo trình cơ sở phương pháp phân tích sắc kí, Trường đại học sư phạm Đà Nẵng.
TIẾNG ANH
[25] L.A. Usman. A.A. Hamid, O.C. George, O.M. Ameen, N.O. Muhammad. M.F. Zubair and A. Lawal (2009), “Chemical Composition of Rhizome Essential Oil of Curcuma longa L. Growing in North Central Nigeria”, World Journal of Chemistry, 4 (2), 178-181.
[26] Mukesh Kumar, Munish Ahuja, Surendra Kumar Sharma (2003), Hepatarotective Study of Curcumin- Soya lecithin Complex, pp.163- 165.
[27] Role of curcumin in systemic and oral health: “An overview”, J Nat Sci Biol Med 4 (1): 3–7.
[28] Tayyem RF, Heath DD, Al-Delaimy WK, Rock CL (2006), “Curcumin content of turmeric and curry powders”, Nutr Cancer 55 (2), 126– 131. Trang web. [29] http://www.suckhoe360.com/Song-khoe/Nhung-bai-thuoc-hay/Mot-so- bai-thuoc-quy-tu-nghe-vang.php [30] http://www.tinhbotnghe.vn/nhung-bai-thuoc-tot-tu-cu-nghe.html [31] http:// dictionary.bachkhoatoanthu.gov.vn/default.aspx.