7. Bố cục của khóa luận gồ m3 phần
2.2.4. Phƣơng pháp tách chất từ cây nở ngày đất bằng dung mô
n- hexane và ethylacetate bằng phƣơng pháp chiết Soxhlet
a. Nguyên tắc
Phƣơng pháp chiết Soxhlet là phƣơng pháp lấy chất từ hỗn hợp bằng dung môi để tách các cấu tử có trong hỗn hợp thành những cấu tử riêng. Dung môi bay hơi ngƣng tụ hòa tan các cấu tử trong mẫu tạo các dịch chiết. Đặc biệt dụng cụ chiết Soxhlet có thêm một ống xi – phông gắn bên cạnh để dịch chiết chảy vào bình cầu khi nào mức chất lỏng trong ống chiết tăng lên tới khuỷu trên của ống xi – phông. Các chất đƣợc chiết cần có tỷ khối lớn hơn dung môi. Trong quá trình đó cấu tử cần đƣợc tách đƣợc làm giàu thêm trong dung môi.
b. Quy trình chiết tách
Cân chính xác lƣợng mẫu cần chiết Soxhlet gói vào giấy lọc, đƣa vào thiết bị chiết. Lắp bộ chiết Soxhlet gồm một bình cầu, một thiết bị chiết và một sinh hàn hồi lƣu. Dung môi đựng trong bình cầu, bốc hơi từng phần, dung môi đƣợc ngƣng tụ nhỏ vào chất đƣợc chiết đựng trong một cái túi giấy lọc và sau đó chảy ngƣợc lại vào bình cầu. Dịch chiết thu đƣợc đem cô đến thể tích
xác định và đem cân.
c. Khảo sát thời gian chiết tối ưu đối với cây nở ngày đất.
o Cách tiến hành:
- Chuẩn bị bộ chiết Soxhlet 250ml, rửa sạch, tráng bằng nƣớc cất, sấy khô.
- Cân chính xác khoảng 10g bột thân và rễ cây Nở ngày đất, ta có m1 gói bằng giấy lọc, rồi cho vào thiết bị chiết của bộ chiết soxlhlet. Đong chính xác 150ml dung môi chiết cho vào bình cầu. Tiến hành chiết ở nhiệt độ sôi của các dung môi trong các khoảng thời gian 4 giờ, 6 giờ, 8 giờ, 10 giờ, 12giờ.
- Tiến hành đo khối lƣợng riêng của dung môi chiết bằng cách hút chính xác 10ml dung môi chiết, cho vào cốc đã biết chính xác khối lƣợng (m2). Cân cốc và dung môi, ta có m3. Tính toán khối lƣợng riêng của dung môi thực hiện.
- Đối với mỗi mẫu sau khi chiết xong, tiến hành đo chính xác thể tích (V) dịch chiết thu đƣợc. Dùng pipet bầu hút chính xác 10ml dịch chiết cho vào cốc đã biết chính xác khối lƣợng (m4). Cân cốc và dịch chiết, ta có khối lƣợng m5. Tính toán suy ra đƣợc khối lƣợng riêng (d) của dịch chiết, từ đó tính đƣợc phần trăm khối lƣợng chiết ra (%m).
oCông thức tính phần trăm khối lượng chiết ra:
D = (g/ml)
d = (g/ml)
%m = (%)
Trong đó:
m1 là khối lƣợng bột thân (rễ)
m3 là khối lƣợng của 10ml dung môi và cốc;
m4 là khối lƣợng cốc dùng đo khối lƣợng riêng dịch chiết; m5 là khối lƣợng của 10ml dịch chiết và cốc.
V là thể tích dịch chiết thu đƣợc; d là khối lƣợng riêng của dịch chiết; D là khối lƣợng riêng của dung môi.
- Với phần trăm khối lƣợng chiết ra của mỗi dung môi theo thời gian chiết, ta suy ra đƣợc thời gian chiết tốt nhất.
- Với các dung môi ethylacetate, dichloromethane, methanol ta tiến hành tƣơng tự nhƣ dung môi n-hexane và cách tiến hành cho thân và rễ cây ta cũng tiến hành nhƣ nhau.
o Khối lượng cặn thu được được tính như sau:
m cặn = m2 – m1
Dịch chiết của thân cây Nở ngày đất thu đƣợc bằng dung môi n- hexane; ethylacetate; dichloromethane; methanol đƣợc thể hiện ở Hình 2.6, 2.7, 2.8 và 2.9.
Hình 2.8. Dịch chiết Dichloromethane Hình 2.9. Dịch chiết Methanol