CHƯƠNG 2 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4. SƠ ĐỒ ĐIỀU CHẾ CÁC CAO CHIẾT
Quá trình điều chế các loại cao chiết được mô tả theo hình 2.2
Hình 2.2.Sơ đồ điều chế các cao chiết
Điều chế cao tổng
Nguyên liệu là hoa đu đủ đực sau khi thu hái, rửa sạch, phơi, sấy khô, rồi đem xay nhỏ thì được 4500g bột.
- Lần 1: Cho 4500g bột nguyên liệu vào bình cầu, cho 12 lít dung dịch EtOH/H2O (80:20), ngâm khoảng 12 giờ. Cho vào máy siêu âm sử dụng tần số 40kHz khoảng 2 giờ. Sau đó lọc lấy dịch chiết đem cất loại dung môi đến gần kiệt thì được dịch đặc.
- Lần 2: Cho 12 lít dung dịch EtOH/H2O (80:20) vào bã nguyên liệu đã chiết lần 1, ngâm khoảng 12 giờ. Cho vào máy siêu âm sử dụng tần số 40kHz
Nguyên liệu Hoa Đu đủ đực sấy khô,
xay nhỏ (4500g) - Ngâm chiết trong EtOH/H2O (80/20)
3 lần
-Cất loại dung môi dưới áp suất thấp
Cao tổng 300 g - Chiết lần lượt với các dung môi: n-
hexan, chloroform, ethyl acetate, n- butanol
-Cất loại dung môi dưới áp suất thấp Cao n- hexan 70g Cao CHCl3 52g Cao Nước 80 g Cao EtOAc 19g Cao BuOH 60 g
khoảng 2 giờ. Sau đó lọc lấy dịch chiết đem cất loại dung môi đến gần kiệt, thu được dịch đặc.
-Lần 3: Cho 12 lít dung dịch vào bã nguyên liệu EtOH/H2O (80:20) đã chiết lần 2, ngâm khoảng 12 giờ. Cho vào máy siêu âm sử dụng tần số 40kHz khoảng 2 giờ. Sau đó lọc lấy dịch chiết đem cất loại dung môi thu được dịch đặc.
Điều chế cao n-hexan, chloroform, EtOAc và cao BuOH
Dồn dịch đặc sau 3 lần chiết và cất loại bớt dung môi, phân lớp lần lượt với n-hexan, CHCl3, EtOAc và BuOH.
Phân lớp với n-hexan, chiết 3 lần, với khoảng 15 lít n-hexan. Tổng dịch chiết khoảng 14000 ml, cất loại dung môi thu được 70g cao n-hexan.
Phân lớp với chlorofrom, chiết 3 lần, với khoảng 15 lít chlorofrom. Tổng dịch chiết khoảng 14000 ml, cất loại dung môi thu được 52g cao chlorofrom .
Phân lớp với EtOAc, chiết 3 lần, với khoảng 12 lít EtOAc. Tổng dịch chiết khoảng 12000 ml, cất loại dung môi thu được 19g cao EtOAc.
Phân lớp với BuOH, chiết 3 lần, với khoảng 18 lít BuOH. Tổng dịch chiết 18000 ml, cất loại dung môi thu được 60g cao BuOH.