Dựa vào danh sách đối tượng nghiên cứu đã được chuẩn bị, chúng tôi gửi thông báo và gửi giấy mời đối tượng nghiên cứu đến Trạm y tế của xã hoặc nhà văn hóa thôn để tham gia nghiên cứu. Chúng tôi cũng dặn các bà mẹ không cho trẻ ăn trước thời gian lấy máu là 7-8 giờ sáng.
+ Nhân trắc
* Chiều cao và cân nặng của trẻ được đo theo kỹ thuật chuẩn của TCYTTG (xem phụ lục 6).
* Tính tuổi:
Tuổi (tháng) = [(ngày điều tra-ngày sinh)/365] x 12
* Phân loại SDD: Trẻ SDD nhẹ cân khi Z-score của cân năng/tuổi < - 2SD [91].
+ Khám toàn diện sàng lọc trẻ và phỏng vấn bà mẹ về yếu tố liên quan
Các bác sỹ nhi hỏi bệnh, khám toàn diện để phát hiện triệu chứng lâm sàng bệnh thiếu vitamin D dinh dưỡng, phát hiện trẻ mắc bệnh NKHHC. Ngoài ra còn nghiên cứu kỹ giấy xuất viện, sổ y bạ để xác định bệnh NKHHC mà trẻ mắc trong vòng 4 tuần trở đến ngày điều tra.
53
Phỏng vấn bà mẹ (xem phụ lục) về yếu tố liên quan đến NKHHC và thiếu hụt vitamin D ở đối tượng nghiên cứu.
+ Lấy máu xét nghiệm nồng độ vitamin D và phosphatase kiềm
Tiến hành lấy 3 ml máu tĩnh mạch vào tuýp thủy tinh vô khuẩn, trung tính, máu được thu vào 7-8 giờ sáng, bảo quản và gửi về Khoa xét nghiệm của Bệnh viện Trẻ em Hải Phòng để xác định nồng độ vitamin D và phosphatase kiềm. Nồng độ vitamin D huyết thanh được xác định bằng kỹ thuật emzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) trên máy Architeqch- i100SSR-Abbort Link.
Khi nồng độ vitamin D huyết thanh <20 ng/ml được coi là thiếu vitamin D và khi nồng độ vitamin D huyết thanh 20 -<30 ng/ml được coi là hụt (giảm) vitamin D [77].
2.4.5.3. Thu thập thông tin sau can thiệp
Sau 12 tháng can thiệp chúng tôi sử dụng biểu mẫu, trang thiết bị, kỹ thuật của nghiên cứu ngang ở giai đoạn 1 để thu thập thông tin về đối tượng nghiên cứu, nhân trắc, bệnh NKHHC, lấy máu để xét nghiệm nồng độ vitamin D.
Tiến hành can thiệp
Đối tượng nghiên cứu của NCT đồng ý tham gia nghiên cứu được bổ sung liều chuẩn vitamin D 400-600 IU thực tế là 500 IU hàng ngày trong thời gian 1 năm. Đối tượng ở NC không được uống vitamin D, chỉ được hưởng các chương trình về y tế của địa phương nếu có.
54
Bảng 2.3. Thời điểm và nội dung can thiệp và theo dõi
TT Thời điểm Nội dung Theo dõi
1 Bắt đầu can thiệp tháng 1 (T0)
Cho uống 500IU vitamin D hàng ngày
- Trẻ được cân, đo
- Xác định nồng độ vitamin D - Xác định tỷ lệ NKHHC
2 Tháng thứ 6 (T6)
- Theo dõi tác dụng không mong muốn của vitamin D - Cân/đo trẻ
- Theo dõi tình trạng bệnh NKHHC
- Định lượng vitamin D
3 Tháng thứ 12 (T12)
- Theo dõi tác dụng không mong muốn của vitamin D - Cân/đo trẻ
- Theo dõi tình trạng bệnh NKHHC
- Định lượng vitamin D
Trong quá trình can thiệp, chúng tôi đánh giá chiều cao, cân nặng, tình trạng mắc NKHHC vào tháng thứ 6 và lần cuối vào tháng 12.
Ngoài thời điểm T6 chúng tôi có các bộ nghiên cứu đến tận gia đình theo dõi, cân đo, lấy máu làm xét nghiêm, phát hiện trình trạng NKHHC, chúng tôi thành lập đường điện thoại “Hotline” để các bà mẹ có thể trực tiếp liên lạc với nhóm nghiên cứu nếu đối tượng có vấn đề bất thường xảy ra liên quan với uống vitamin D, tình trạng NKHHC. Trường hợp bệnh nhân mắc NKHHC nặng được khuyên nhập bệnh viện Trẻ em để được chẩn đoán và điều trị hiệu quả. Chúng tôi khuyên các bà mẹ trong thời gian can thiệp không nên cho trẻ dùng bất cứ chế phẩm có chứa vitamin D nào khác ở cả NCT và NC.
55
2.4.6. Sai số và các biện pháp không chế sai số, quản lý chất lượng thông tin tin
2.4.6.1. Sai số
Các sai số bao gồm sai số hệ thống, ngẫu nhiên, quá trình chọn mẫu, thu thập thông tin, nhập liệu. Sai số do yếu tố nhiễu như tuổi, giới, trẻ được uống vitamin D trong quá trình can thiệp.
2.4.6.2. Các biện pháp khống chế sai số và chất lượng thông tin
- Thiết kế công cụ nghiên cứu
Thiết kế nghiên cứu mô tả với cỡ mẫu và cách chọn mẫu chặt chẽ thống nhất, kết hợp mô tả và can thiệp. Bộ công cụ nghiên cứu được thiết kế rõ ràng, thống nhất có cố vấn của các chuyên gia đầu ngành. Bộ công cụ được thử tại thực địa trước khi tiến hành điều tra.
- Tập huấn và tổ chức thu thập số liệu tại thực địa
Điều tra viên là cán bộ của bệnh viện Trẻ em, được tập huấn kỹ phương pháp thu thập thông tin. Điều hành nhóm nghiên cứu là cán bộ có kinh nghiệm và thày hướng dẫn.
Tiến hành kiểm tra 10% số phiếu thu thập được hỏi lại thông tin cơ bản. Cố định nghiên cứu viên chuyên đo nhân trắc trước và sau can thiệp. Sử dụng thước, cân chuẩn cùng loại cho trước và sau can thiệp.
Kỹ thuật viên xét nghiệm sẽ lấy máu, xử lý, bảo quản và vận chuyển vể khoa Xét nghiệm của bệnh viện Trẻ em Hải Phòng.
Bà mẹ cam kết không sử dụng chế phẩm vitamin D thêm ngoài sản phẩm của chương trình.
Qui trình nhập liệu gồm làm sạch số liệu, kiểm soát chặt chẽ khâu không chế nhiễu, hạn chế sai số và quản lý chất lượng thông tin.
56
2.4.7. Xử lý và phân tích số liệu
Các phiếu điều tra được giám sát khi thu thập và kiểm tra kỹ từng phiếu sau thu thập trong ngày. Số liệu được làm sạch và trước khi nhập bằng phần mềm SPSS 20.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).