Hợp chất A1: epi-Aspergillusol (chất mới)

CHƢƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

3.3. Kết quả xác định cấu trúc hóa học các hợp chất

3.3.1. Hợp chất A1: epi-Aspergillusol (chất mới)

Hợp chất A1 phân lập đƣợc có dạng chất bột màu trắng. Công thức phân tử là C14H14O4, đƣợc xác định dựa trên pic ion phân tử tại m/z 247.0963 [M+H]+

trên phổ HRESITOFMS, tƣơng ứng với 8 độ bất bão hòa.

Hình 3.4. Cấu trúc và tƣơng tác HMBC ( và COSY (—) của hợp chất A1 Trên phổ 1H NMR (đo trong CDCl3) của hợp chất A1 xuất hiện các tín hiệu của 5 proton thơm tại H 7.22 (d, J = 8.0 Hz, H-9 and H-13), 7.32 (t, J = 8.0 Hz, H-10 and H-12), và 7.26 (t, J = 8.0 Hz, H-11), đặc trƣng cho sự có mặt của một vòng phenyl. Phổ 1H-NMR cũng thể hiện tín hiệu của hai proton olefinic tại H 5.44 (d, J = 2.5 Hz, H-2) và 6.05 (dd, J = 1.0, 2.5 Hz, H-4), một proton oxymethine tại H 4.60 (dd, J = 4.0, 8.0 Hz, H-6), hai proton bắt cặp germinal tại H 3.26 (dd, J = 4.0, 14.0 Hz, Ha-7) và 2.93 (dd, J = 8.0, 14.0 Hz, Hb-7), và một nhóm methoxy tại H 3.84 (s, 3-OCH3). Từ những dữ liệu 1H NMR quan sát đƣợc, kết hợp với phân tích phổ 13C-NMR và HSQC (trong CDCl3) gợi ý sự hiện diện của phần cấu trúc 3-methoxy-1-oxo-1H-pyran-5-yl trong phân tử. Điều này đƣợc thể hiện thông qua sự xuất hiện của của một carbonyl carbon tại C 164.2 (C-1), bốn sp2 carbons tại C 88.2 (C-2), 171.3 (C-3), 99.0 (C-4), và 165.2 (C-5). Vị trí của nhóm metoxy tại C-3 đƣợc xác nhận bởi tƣơng tác HMBC từ proton của nó (H 3.84) với C-3. Ngoài ra, tƣơng tác COSY giữa H-6 và H2-7, cùng với tƣơng tác HMBC từ H2-7 với C-8, C-9 và C-13 cho thấy sự xuất hiện của một đơn vị 1-hydroxy-2-phenylethyl. Cuối cùng, cấu trúc phẳng của hợp chất A1 đƣợc xác định là 5-(6-hydroxy-7-phenylethyl)-3-methoxy-1H-pyran-1-one bởi tƣơng tác HMBC từ H-6 đến C-4 và C-5 . So sánh dữ liệu 1H- và 13C-NMR của hợp chất A1 với hợp chất aspergillusol đã biết cho thấy 2 hợp chất có cấu trúc phẳng giống nhau [93]. Tuy nhiên, giá trị góc quay cực của hợp chất A1 và aspergillusol lại ngƣợc chiều nhau [hợp chất

A1: = -61.0 (c = 0.5, CHCl3) so với aspergillusol: = +35 (c = 0.4, CHCl3)], gợi ý rằng hợp chất A1 là đồng phân đối quang của aspergillusol [93]. Trên cơ sở đó, cấu hình tuyệt đối của hợp chất A1 đƣợc xác định bẳng phƣơng pháp tính toán phổ

lƣỡng sắc tròn điện tử (ECD) bằng chƣơng trình Gaussian 16W. Đầu tiên, các cấu dạng của cặp đồng phân 6R và 6S đƣợc phân tích bằng chƣơng trình Spartan'18 (MMFF).

Các cấu dạng đƣợc lựa chọn đƣợc tối ƣu hóa thông qua hàm tính toán B3LYP/6- 31++G(d,p) và conductor-like polarizable continuum model (CPCM) trong dung môi methanol [86]. Tiếp theo, phổ ECD của các cấu dạng đƣợc tính toán sử dụng TDDFT với hàm chức năng tƣơng tự. Cuối cùng, phổ ECD tính toán của các cấu hình đƣợc mô phỏng bằng công cụ SpecDis 1.71 [87, 94]. Nhƣ thể hiện trong hình 3.5, phổ ECD tính toán cho đồng phân 6S cho thấy sự phù hợp với dữ liệu phổ ECD thực nghiệm, trong khi phổ ECD tính toán cho cấu hình 6R cho kết quả đối xứng hoàn toàn. Điều này cho phép khẳng định cấu hình tuyệt đối của vị trí C-6 của hợp chất A1 là S. Trên cơ sở các phân tích phổ nêu trên, cấu trúc của hợp chất A1 đƣợc xác định là epi-aspergillusol.

Hình 3.5. Phổ ECD tính toán lý thuyết và thực nghiệm của hợp chất A1

Hằng số hóa lý của hợp chất epi-Aspergillusol (A1): bột màu trắng vô định

hình. Công thức phân tử: C14H14O4. = –61.0 (c = 0.5, CHCl3). HRESITOFMS:

m/z 247.0963 [M+H]+ (tính toán lý thuyết cho công thức C14H15O4+, 247.0965). ECD (MeOH) mdeg (λmax): 2.13 (283), +0.97 (234), 2.67 (219), +2.09 (205) nm. 1H NMR (CDCl3 và CD3OD, 500 MHz) và 13C NMR (CDCl3 và CD3OD, 125 MHz): trình bày ở Bảng 3.1.

Bảng 3.1. Số liệu phổ 1H và 13C NMR của hợp chất A1

Vị trí Ca,b Ha,c (mult., J in Hz) Cd,b Hd,c (mult., J in Hz)

1 164.2 167.0 2 88.2 5.44 (d, 2.5) 88.7 5.56 (d, 2.0) 3 171.3 173.6 4 99.0 6.05 (dd, 1.0, 2.5) 100.6 6.09 (dd, 1.0, 2.0) 5 165.2 167.8 6 71.3 4.60 (dd, 4.0, 8.0) 72.5 4.58 (dd, 5.0, 7.5) 7 41.6 3.26 (dd, 4.0, 14.0) 2.93 (dd, 8.0, 14.0) 42.3 3.15 (dd, 5.5, 13.5) 2.97 (dd, 8.0, 13.5) 8 136.2 138.5 9 129.5 7.22 (d, 8.0) 130.5 7.23 (d, 8.0) 10 128.8 7.32 (t, 8.0) 129.3 7.27 (t, 8.0) 11 127.1 7.26 (t, 8.0) 127.6 7.21 (t, 8.0) 12 128.8 7.32 (t, 8.0) 129.3 7.27 (t, 8.0) 13 129.5 7.22 (d, 8.0) 130.5 7.23 (d, 8.0) 3- OCH3 56.0 3.84 (s) 56.9 3.84 (s) a Đo trong CDCl3, b 125 MHz, c 500 MHz, d CD3OD Hìn h 3.6. Phổ HRE SIM S của A1

Hình 3.7. Phổ 1H NMR (CDCl3, 500 MHz) của A1

Hình 3.9. Phổ HSQC (CDCl3, 500 MHz) của A1

Hình 3.11. Phổ 1H NMR (CD3OD, 500 MHz) của A1

Hình 3.13. Phổ HSQC (CD3OD, 500 MHz) của A1

Hình 3.15. Phổ COSY (CD3OD, 500 MHz) của A1