3.3. Tinh sạch, phân đoạn và khảo sát tính chất của các phân đoạn collagen
3.3.1. Thành phần hóa học của dịch thủy phân, lọc sơ bộ và sau khi ly tâm của
da cá ngừ vây vàng
Da cá ngừ vây vàng sau khi đã được xử lý bằng dung dịch NaOH và thủy phân bằng enzyme alcalase thì phần lớn lipid và protein không phải là collagen đã bị loại bỏ. Collagen thủy phân đã được tinh sạch qua hai bước là lọc chân không và ly tâm. Thành phần của dịch collagen sau tinh sạch được trình bày ở Bảng 3.16.
Bảng 3.16. Bảng thành phần hóa học của dịch collagen sau thủy phân và làm sạch sơ bộ
Chỉ tiêu Dịch thủy phân Dịch sau lọc Dịch sau ly tâm chân không
Đạm (gN/L) Lipid (%) Tro (%)
Chất khô (%) Hiệu suất thu hồi nitrogen trong da cá (%) Hiệu suất thu hồi
collagen (%) 14,7a 0,50 15,1a 0,53 14,6a 0,32 0,55a 0,05 0,08b 0,02 0,09b 0,01 0,17a 0,01 0,17a 0,02 0,171a 0,01 10,06a 0,31 9,77a 0,24 9,69ba 0,15 82,82a 1,50 79,92b 1,05 79,30ba 0,50 96,61a 0,95 94,81b 1,02 94,52b 0.35
a, b, c: trên cùng một hàng thì khác biệt có ý nghĩa về mặt thống kê ở 95%
Dịch collagen sau khi thủy phân được làm lạnh xuống 4 C sau đó được lọc qua 2 lớp bông thấm nước bằng thiết bị lọc chân không. Dịch collagen thủy phân sau khi lọc chân không có hàm lượng chất khô giảm chủ yếu là do chất béo bị loại ra khỏi dịch thủy phân (Bảng 3.16). Sau khi lọc chân không, đã loại bỏ một lượng lớn lipid từ 0,55 0,05% xuống còn 0,08 0,02% điều này rất tốt cho bảo quản collagen thủy phân sau này. Dịch collagen sau khi ly tâm có màu sắc trong hơn và không còn màu đen. Như vậy công đoạn ly tâm cũng giúp loại bỏ các sắc tố trên da cá ngừ. Như vậy sau khi làm sạch bằng phương pháp lọc và ly tâm, dịch thủy phân trong hơn và hàm lượng chất béo giảm đáng kể.
3.3.2. Kết quả khảo sát phân bố khối lượng phân tử peptide collagen trongdịch thủy phân sau khi tinh sạch