PHẦN 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 KẾT QUẢ XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH
3.1.1.2. Khảo sát lựa chọn chất chuẩn nộ
Dựa trên tính chất hóa lý của DTZ và tham khảo tài liệu, chúng tôi tiến hành khảo sát lựa chọn nội chuẩn cho phương pháp phân tích từ các chất felodipine
(FELO), trimetazidine (TMZ) và lidocain (LID) tương tự như mục 3.1.1.1. Bơm trực tiếp lần lượt các dung dịch FELO, TMZ và LID có nồng độ 1 àg/ml vào hệ thống khối phổ với tốc độ 5àl/phỳt với chế độ phun điện tử ion dương (+ESI). Phổ khối của TMZ, LID và FELO được ghi lại ở hình 3.6, 3.7 và 3.8.
(a) (b)
Hình 3.6.Phổ khối [TMZ-H]+ m/z = 267 (a) và phân mảnh m/z 267 181 (b)
(a) (b)
Hình 3.7. Phổ khối [LID-H]+ m/z=235 (a) và phân mảnh m/z 235 86 (b)
Hình 3.8.Phổ khối [FELO-H]+ m/z=384 (a) và phân mảnh m/z 384 338 (b)
Kết quả khảo sát lựa chọn nội chuẩn cho thấy:
- Khi sử dụng các mức năng lượng khác nhau để phân mảnh ion mẹ trong kỹ thuật khối phổ 2 lần (MS/MS) cả TMZ, LID và FELO đều tạo ra các mảnh phổ con bền vững, ổn định và có số khối tương ứng là 181 Da (TMZ: 267 181), 86 Da (LID: 235 86) và 338 Da (FELO: 384 338).
- Ở cùng nồng độ 1 àg/ml, lượng mảnh phổ m/z = 338 tạo thành của FELO là khoảng 107 gấp khoảng 10 lần lượng mảnh phổ m/z = 181 tạo thành của TMZ và gấp khoảng 104 lần lượng mảnh phổ m/z = 86 tạo thành từ LID.
- Các điều kiện để tạo mảnh phổ m/z = 338 của FELO tương tự điều kiện tạo mảnh phổ của chuẩn DTZ (điện thế nguồn phun ion, áp suất khí mang, khí bổ trợ, …) nên có thể sử dụng chung điều kiện khối phổ trong phân tích. Trong khi đó điều kiện tạo mảnh phổ m/z 235 86 của LID và m/z 267
181 của TMZ, khác điều kiện tạo mảnh phổ của DTZ nhiều, không thể sử dụng chung điều kiện khối phổ trong phân tích mẫu, cần tạo điều kiện khối phổ riêng. Trong cùng một phương pháp phân tích không thể chạy hai điều kiện khối phổ khác nhau trên cùng một khoảng thời gian xác định. Do vậy, chúng tôi lựa chọn FELO làm nội chuẩn để tiếp tục triển khai nghiên cứu.