2.3.4. Thử nghiệm nhân giống Bương mốc.
2.3.5. Đề xuất một số giải pháp kỹ thuật trong gây trồng rừng Bương mốc tại vùng đệm VQG Ba Vì. tại vùng đệm VQG Ba Vì.
2.4. Phương pháp nghiên cứu
2.4.1. Phương pháp luận
Quá trình sinh trưởng của cây rừng nĩi riêng, các lồi thực vật nĩi chung là kết quả tổng hợp của các nhân tố nội tại và điều kiện ngoại cảnh, nếu điều kiện nơ ̣i ta ̣i đồng nhất thì nhân tố ngoa ̣i cảnh sẽ quyết định đến quá trình sinh trưởng và phát triển của chúng. Mặt khác, trong mỗi giai đoạn sống, tốc độ sinh trưởng của chúng cũng khác nhau. Sự biểu thị đĩ được biểu hiện thơng qua chỉ tiêu tiêu sinh trưởng khác nhau như: D, Hvn….Vì vậy, nghiên cứu tìm hiểu về chúng chính là nghiên cứu và đánh giá các chỉ tiêu đĩ.
2.4.2. Phương pháp thu thập số liệu
2.4.2.1. Phương pháp kế thừa
- Trong quá trình nghiên cứu đề tài kế thừa các tài liệu về điều kiện tự nhiên, tình hình dân sinh kinh tế xã hội trong vùng; Số liệu khí hậu được kế thừa từ nơi đề tài điều tra nghiên cứu; Các tài liê ̣u đã nghiên cứu về tre trúc và các cơng trình có liên quan đã nghiên cứu trước đây…
- Kế thừa tài liệu về lịch sử rừng trồng của loài Bương mớ c ta ̣i khu vực.
2.4.2.2. Thu thập số liệu ngoại nghiệp
a. Điều tra sơ thám
Nhằm phục vụ cho điều tra tỉ mỉ được thuận lợi, tơi tiến hành thu thập tài liệu, bản đồ nơi điều tra. Tiến hành điều tra sơ thám tài nguyên thực vật nơi điều nhằm tìm hiểu sơ qua về tình hình sinh trưởng của Bương mốc; đă ̣c điểm đi ̣a hình khu vực nghiên cứu từ đó đề ra kế hoa ̣ch điều tra cu ̣ thể như: Xác đi ̣nh đi ̣a điểm, vi ̣ trí lấy mẫu....
b. Điều tra tỷ mỷ
Tại đi ̣a điểm, đề tài đã tiến hành lâ ̣p OTC để điều tra, nghiên cứu cụ thể: Tại xã Tản Lĩnh đề tài tiến hành lập 6 OTC. Tại xã Ba Vì và Xã Vân Hịa tiến hành lâ ̣p mỗi địa điểm 2 OTC, OTC có dạng hình chữ nhâ ̣t mỡi OTC có diê ̣n tích 500 m2 và được bớ trí đều ở 3 vi ̣ trí chân, sườn, đỉnh.
* Nội dung 1: Nghiên cứu đặc điểm sinh vật học của lồi
- Trong OTC tiến hành mơ tả các đă ̣c điểm:
+ Hình thái lá: Lấy mẫu lá rồi mơ tả các đặc điểm về màu sắc, hình dạng phiến lá, mép lá, gân lá, cuống lá...
+ Hình thái mo nang: Lấy mo nang ở đốt thư 7 từ dưới lên, sau đĩ mơ tả các đặc điểm về màu sắc mặt trong, mặt ngồi mo, hình dạng mo nang, tai mo… + Mơ tả các đặc điểm về hình dạng, màu sắc thân khí sinh, măng, thân ngầm, hoa quả (nếu cĩ). Đồng thời kết hợp giữa tham khảo tài liệu và phỏng
vấn các hộ gia đình trồng Bương mốc, người cao tuổi trong dân và cán bộ của vườn quốc gia, thu thập các thơng tin về vật hậu như: Mùa vụ ra măng, đặc điểm măng thân và măng cành, thời điểm rụng mo nang, ra cành lá, lá rụng, mùa vụ hoa quả… thơng tin được ghi vào mẫu biểu sau:
Mẫu biểu 2.1: Điều tra vật hậu lồi Bương mốc
Tên nguồn cung cấp thơng tin:... Dân tộc: ………... Người điều tra………. Tuổi:………. Địa điểm:………..
Nam, Nữ:………. Ngày điều tra…….
Bộ phận
quan sát Đặc điểm quan sát Thời điểm qua sát
T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 T11 T12
Măng thân
Măng sớm xuất hiện Măng mọc rộ Măng muộn xuất hiện Mo nang bắt đầu mở Mo nang rụng Bắt đầu ra cành Định hình Măng cành Xuất hiện Ra lá non Lá mở Định hình Lá Chồi lá Lá bắt đầu mở Lá mở hết Lá chuyển màu Lá rụng Hoa
Xuất hiện cành hoa Hoa nở Quả non
- Nghiên cứu cấu tạo giải phẫu và phân tích hàm lượng diệp lục lá Bương mốc Để xác định cấu tạo giải phẫu lá và phân tích hàm lượng diệp lục tơi tiến hành lấy mẫu lá (30 lá) ở vườn ươm và ở rừng trồng (ở 3 vị trí: Chân đồi, sườn đồi, đỉnh đồi, mỗi vị trí 30 lá) rồi đem về phân tích, xác định các chỉ tiêu sau đĩ so sánh sự khác nhau của các chỉ tiêu giải phẫu và hàm lượng diệp lục. Kết quả thu được ghi vào biểu mẫu sau:
Mẫu biểu 2.2: Các chỉ tiêu giải phẫu lá Bương mốc
Stt Đối tượng Vị trí
Các chỉ tiêu giải phẫu lá tại các vị trí (đơn vị µm)
CTT BBT MĐH trên MĐH dưới ∑MĐH BBD CTD ∑BDL % MĐH 1 Cây rừng trồng Chân đồi Sườn đồi Đỉnh đồi TB 2 Cây vườn ươm
Ghi chú: - CTT: Cu tin trên; BBT: Biểu bì trên; MĐH: Mơ đồng hĩa - BBD: Biểu bì dưới; CTD: Cu tin dưới; BDL: Bề dày lá.
Mẫu biểu 2.3. Hàm lượng diệp lục ở các vị trí
Stt Đối tượng Vị trí Ca (mg/l) Cb (mg/l) DL tổng số (mg/l) a/b 1 Cây rừng trồng Chân đồi Sườn đồi Đỉnh đồi TB
Ghi chú: - Cây ưa sáng: Tỷ lệ diệp lục a/b >3.
- Cây trung tính: Tỷ lệ diệp lục a/b: Từ 2,3 – 3. - Cây chịu bĩng: Tỷ lệ diệp lục a/b < 3.
- Điều tra sinh trưở ng cá thể của măng Bương mốc
Vào mùa ra măng, cho ̣n 30 măng chính vu ̣ theo dõi tớc đơ ̣ tăng trưởng về Hvn, D00 kể từ khi măng nhú nên khỏi mă ̣t đất cho đến khi cây đi ̣nh hình ra lá cành thâ ̣t, cứ 7 ngày đo 1 lần, kết quả ghi vào mẫu biểu sau:
Mẫu biểu 2.4: Biểu điều tra sinh trưở ng măng
OTC sớ :……….. Độ dốc:………
Vị trí:………... Người điều tra:………
Số thứ tự măng:……… Địa điểm:……….
Stt Ngày đo D00 (cm) Hvn (m) Ghi chú
1
* Nội dung 2: Nghiên cứu điều kiện hồn cảnh nơi trồng Bương mốc
- Điều kiện địa hình, đất đai nơi cĩ trồng Bương mốc
+ Độ cao nơi trồng được xác định bằng máy định vị GPS, địa bàn cầm tay để xác định độ dốc, hướng dốc từng địa điểm nghiên cứu.
+ Điều tra đất và lấy mẫu phân tích đất.
Tại địa điểm nghiên cứu, tiến hành đào mỗi OTC mợt phẫu diện chính và 2 phẫu diện phụ lấy mẫu trộn để phân tích và mơ tả. Mẫu đất của một phẫu diện được lấy theo hệ thống từ 0 – 20 (cm), 20 – 50 (cm). Sử dụng phương pháp điều tra nhanh tại hiện trường để sơ bộ xác định các tính chất vật lý của đất:
Độ xốp (X) của đất được xác định bằng ống dung trọng. Độ xốp tầng đất mặt của điểm điều tra là giá trị bình quân của độ xốp từ 5 điểm đo, 1 điểm ở trung tâm, 4 điểm ở vị trí cách đều tâm điểm điều tra 1(m).
Tỉ lệ đá lẫn (DL) được điều tra theo phương pháp ước lượng %.
Số rễ/dm2 : đếm trực tiếp trên mặt cặt phẫu diện ở các độ sâu khác nhau. Độ ẩm được xác định bằng phương pháp cân sấy trong phịng thí nghiệm. Kết quả thu được ghi vào mẫu biểu sau:
Mẫu biểu 2.5: Mơ tả phẫu điê ̣n đất
OTC sớ :……… Ngày điều tra:……
Vi ̣ trí:………. Người điều tra:……
Đơ ̣ dớc:……… Địa điểm…………
Sơ đồ phẫu diện Độ sâu tầng đất Tên tầng đất Mầu sắc Độ ẩm Rễ cây (%) Kết cấu đất Độ chặt Chất mới sinh Tỷ lệ đá lẫn Chuyển lớp
- Đặc điểm thực bì nơi trồng Bương mốc
Trong OTC tiến hành lập các ODB để điều tra cây bụi thảm tươi trong rừng trồng Bương mốc. Mỗi ODB cĩ diện tích 4 m2 được lập ở 4 gĩc OTC, trong ODB tiến hành xác định tên lồi, số lượng cây bụi thảm tươi, tình hình sinh trưởng và dộ che phủ. Kết quả thu được ghi vào mẫu biểu sau:
Mẫu biểu 2.6: Điều tra cây bụi thảm tươi
OTC số:………. Ngày điều tra:……… Vị trí:……….. Người điều tra:……...
Độ dốc:………... Địa điểm:………
ODB Stt cây Tên cây Độ cao (m) Độ che phủ
(%) Ghi chú 1 1 ….. n 2 ….. 1 n
- Sinh trưởng lâm phần Bương mốc
Đo đếm các chỉ tiêu sinh trưởng như: Hvn, D1.3 (tương ứng với đốt thứ 7)... D1.3: Sử du ̣ng thước ke ̣p kính, thước dây để đo.
Hvn: Sử du ̣ng sào đo cao có chia va ̣ch để xác đi ̣nh chiều cao cây. Kết quả thu đươ ̣c ghi vào các mẫu biểu sau:
Mẫu biểu 2.7: Biểu điều tra thân khí sinh
OTC sớ :……… Ngày điều tra:…… Vi ̣ trí:………. Người điều tra:……
Đơ ̣ dớc:……… Địa điểm…………
TT Bụi Stt cây D1.3 Hvn Tuởi Ghi
chú 1 2 3 >4 1 .... 1 … ….. n n
*) Nội dung 3: Thực trạng bảo tồn và phát triển Bương mốc tại Ba Vì
- Tiến hành điều tra theo phương pháp phỏng vấn, đối tượng phỏng vấn là những người trong gia đình (30 người) cĩ trồng Bương mốc và cán bộ vườn quốc gia về lịch sử trồng rừng, kỹ thuật trồng và chăm sĩc Bương mốc….
- Về tình hình khai thác, sử dụng thân khí sinh, khai thác sử dụng măng Bương mốc: Tiến hành phỏng vấn các hộ, điều tra trước, trong mùa vụ măng về cách thu hoạch, chế biến măng, thân khí sinh, đồng thời tiến hành phân tích, xác định ảnh hưởng của khai thác măng tới kết cấu và sinh trưởng của Bương mốc làm cơ sở đề xuất giải pháp kĩ thuật tác động.
*) Nội dung 4: Thử nghiệm nhân giống Bương mốc
- Tham khảo, kế thừa tài liệu cĩ liên quan về tách gốc, chiết cành… tre mọc cụm, đồng thời phỏng vấn người dân và cán bộ vườn quốc gia trực tiếp nhân giống Bương mốc.
- Thí nghiệm tách gốc, chiết Bương mốc tại hiện trường (mỗi phương pháp thử nghiệm với dung lượng mẫu n ≥ 30 vào 4 mùa khác nhau trong năm (mùa Xuân; mùa Hè; mùa Thu, mùa Đơng). Sau đĩ dùng thống kê tốn học để xử lý, so sánh tỷ lệ sống, tỷ lệ ra rễ.
+ Tiêu chuẩn cành chiết/ gốc tách:
Tách gốc: Thử nghiệm đối với cây giống 1 tuổi.
Chiết cành: Thử nghiệm đối với cành giống 3 tháng, 6 tháng, 9 tháng, 12 tháng và 24 tháng tuổi. Chọn các cành chính đã định hình trên các cây Bương mốc bánh tẻ, tiến hành cắt bỏ phía ngọn cành để lại 2 - 3 lĩng cành phía đùi gà rồi tiến hành chiết cành gồm: Cưa cắt và bĩ hỗn hợp bùn rơm rạ (nơi tiếp giáp giữa đùi gà và thân khí sinh).
+ Căn cứ vào kết quả đề tài của thạc sỹ Vũ Quốc Phương (2013), cho thấy sử dụng loại thuốc kích thích ra rễ là IBA nồng độ 1500 (ppm) cho tỷ lệ ra rễ cao nhất. Vì vậy, đề tài đã áp dụng nồng độ này để thử nghiệm nhân giống Bương mốc vào các thời vụ khác nhau: mùa Xuân; mùa Hè; mùa Thu; mùa Đơng, thơng qua đĩ xác định được thời điểm chiết cành tốt nhất.
+ Phương pháp thí nghiệm (Với n ≥ 30). • Phương pháp tách gốc
Xác định ảnh hưởng của mùa vụ đến tỷ lệ sống của cây tách gốc, kết quả được ghi vào mẫu biểu sau:
Mẫu biểu 2.8: Ảnh hưởng của mùa vụ đến tỷ lệ sống cây tách gốc
Mùa vụ Số gốc tách Tỷ lệ sống vườn giâm (%) Tỷ lệ sống sau trồng 1 tháng 3 tháng Xuân Hạ Thu Đơng
• Phương pháp chiết cành
Xác định ảnh hưởng của mùa vụ đến tỷ lệ ra rễ của cành chiết. Kết quả được ghi vào mẫu biểu sau:
Mẫu biểu 2.9: Ảnh hưởng của mùa vụ đến tỉ lệ ra rễ của cành chiết
Mùa vụ Số cành chiết Ngày bắt đầu ra rễ Tỉ lệ ra rễ định kỳ (%) Ngày thứ Tỉ lệ (%) 7 ngày 14 ngày 21 ngày 28 ngày 35 ngày Xuân Hạ Thu Đơng TB
Xác định ảnh hưởng của tuổi cành đến khả năng ra rễ của cành chiết, kết quả được ghi vào mẫu biểu sau:
Mẫu biểu 2.10: Ảnh hưởng của tuổi cành đến khả năng ra rễ của Bương mốc Tuổi cành chiết Đặc điểm nhận biết Số cành chiết Thời gian bắt đầu ra rễ (ngày) Quá trình ra rễ (ngày) Tỉ lệ (%) số cành ra rễ 3 tháng 6 tháng 9 tháng 12 tháng 24 tháng
2.4.2.3. Xử lý số liệu nội nghiệp
Số liệu sau khi thu thập về được tổng hợp, xử lý, tính tốn và phân tích với sự trợ giúp của phần mềm EXCEL và SPSS 16.0.
Đối với khu vực vườn ươm, lá lấy nghiên cứu bao gồm những lá bánh tẻ. Đối với khu vực rừng trồng, ngồi việc lấy những lá bánh tẻ, lá lấy nghiên cứu được lấy trải đều ở 3 vị trí: Chân, sườn, đỉnh đồi, ở đủ 3 vị trí: Trên tán, dưới tán, giữa tán, sau đĩ trộn đều chúng rồi lấy ngẫu nhiên 30 lá đem nghiên cứu. Trên mỗi lá nghiên cứu, dùng dao lam cắt một miếng lá cĩ diện tích 0,5 x 0,5 cm ở giữa lá, kẹp miếng lá đã cắt vào miếng xốp cĩ kích thước 1 x 1x 1,5 cm đã xẻ đơi ở giữa sẵn. Dùng dao lam cắt các lát mỏng bao gồm cả lá lẫn xốp, sao cho chúng tạo thành một mặt phẳng vuơng gĩc. Khi cắt chú ý mặt lát cắt < bề dày lá. Sau đĩ chọn những lát cắt nhỏ nhất đặt vào giọt nước đã nhỏ sẵn trên lam kính, đậy lamen và đưa lên kính hiển vi quan sát. Chọn vị trí đẹp nhất trên tiêu bản, rồi sử dụng cơng cụ đo kích thước của kính hiển vi Optika Vision pro đo bề dày các phần: Lớp cutin trên, cutin dưới; biểu bì trên; mơ dậu; mơ khuyết. Số liệu đo đếm sẽ được quy đổi sang µm theo cơng thức sau:
+ Nếu vật kính cĩ độ phĩng đại 10 lần: L (µm) = n.0,0264. + Nếu vật kính cĩ độ phĩng đại 40 lần: L (µm) = n.0,1061. (n: trị số đo dược trên kính hiển vi)
- Phương pháp xác định hàm lượng diệp lục a, b
Cân chính xác 0,5 gam lá cần phân tích, cho lá vào cối sứ cùng với 2ml cồn tuyệt đối, thêm một ít CaCO3 và bơng thủy tinh, rồi nghiền mẫu đến khi tạo thành một thể đồng nhất. Dùng giấy lọc, phễu thủy tinh lọc thu dịch chiết, dịch nghiền được rửa nhiều lần bằng dung dịch cồn tuyệt đối đến khi dịch chiết chảy ra khơng cĩ màu. Chuyển dịch chiết chảy sang bình định mức 50ml, thêm cồn tuyệt đối đưa thể tích dịch chiết lên đúng vạch định mức (cĩ thể pha lỗng dịch chiết tiếp). Đo mật độ quang học của dịch chiết tại các bước sĩng 663.6 nm và 646.6 nm trên máy đo màu. Nồng độ diệp lục a, b được tính theo cơng thức sau:
Ca=12.25*D663.6 - 2.55*D646.6(mg/l). Cb=20.31*D646.6 - 4.91*D663.6 (mg/l). Ca+b = 17.76*D646.6 + 7.34*D663.6.
Hàm lượng diệp lục a, b được tính theo cơng thức: A = C.V.n/1000.p (mg/g). Trong đĩ: A là hàm lượng diệp lục tính theo đơn vị mg/g lá cây.
C: Nồng độ diệp lục (mg/l) V: thể tích dịch rút được (ml) n: số lần pha lỗng
p: khối lượng mẫu lá dùng để rút dịch (gam)
→ Nguyên lý của phương pháp là: Các sắc tố xanh là yếu tố quan trọng trong quá trình quang hợp của cây. Trong đĩ quan trọng nhất là nhĩm diệp lục chlorophyl gồm: chlorophyl a và chlorophyl b. Trong vùng ánh sáng nhìn thấy (λ = 400-700 nm), các phân tử hấp thụ mạnh nhất 2 vùng: Ánh sáng đỏ (λ = 662 nm) và ánh sáng tím (λ = 430 nm). Căn cứ vào sự hấp thụ các bước sĩng khác nhau của diệp lục trên máy đo màu mà ta cĩ thể tính được hàm lượng của chúng.
- Đối với cá thể Bương mốc
Lượng tăng trưởng về D00 và Hvn của măng giữa 2 lần quan sát được tính theo cơng thức: Zx=Zx(n)-Zx(n-1)
Với: Zx là lượng tăng trưởng về D00, Hvn
Zx(n) là lượng tăng trưởng về D00, Hvn ngày thứ n
Zx(n-1) là lượng tăng trưởng về D00, Hvn ngày thứ n -1
- Đối với quần thể Bương mốc
+ Tính các giá trị trung bình của các OTC: D00 ,Hvn,.D1.3,theo cơng thức : n i i X n X 1 1 (2.1)
+ Kiểm tra sự sai khác về sinh trưởng D1.3 ,Hvn ở các địa điểm nghiên cứu với giả thiết:
H0: Sinh trưởng về các chỉ tiêu sinh trưởng (D1.3, Hvn) ở 3 địa điểm nghiên cứu thuần nhất với nhau.
H1: Sinh trưởng về các chỉ tiêu sinh trưởng (D1.3, Hvn) ở 3 địa điểm nghiên cứu khơng thuần nhất với nhau.
• Sử dụng tiêu chuẩn U của Mann-whitney để tiến hành so sánh sinh trưởng về D1.3, Hvn ở 2 địa điểm nghiên cứu với nhau theo cơng thức: