2. Mục tiêu của đề tài
3.1.1. Phân tích cấu trúc hợp chất 1
Cấu trúc hóa học của chất 1 được xác định dựa vào sự kết hợp phổ 1H- NMR, 13C-NMR, HSQC, HMBC, MS và tài liệu tham khảo để xác định được công thức cấu tạo của chất 1.
Hình 3.1. Phổ 1H-NMR của chất 1
Phổ 1H-NMR của chất 1 cho một tín hiệu của doublet tại δH 0.99 ppm (d, J
= 7.2 Hz, 3H) tương ứng với 3 proton của nhóm metyl liên kết với cacbon bậc 2 tại vị trí C-1’. Một tín hiệu tại δH 2.52 (td, J = 7.4, 5.6 Hz, 1H) tương ứng proton của nhóm CH tại vị trí C-9. Tín hiệu cộng hưởng tại 2.17 (dd, J = 14.7, 7.4 Hz, 1H) và 2.00 (dd, J = 14.7, 7.4 Hz, 1H) ppm là tín hiệu cộng hưởng của 2 proton thuộc nhóm CH2 liên kết trực tiếp với nguyên tử cacbon sp2 tại vị trí C-13.
Tín hiệu cộng hưởng của 3 proton trong nhóm methyl liên kết với oxi. Tín hiệu singlet tại 5.88 (s, 2H) là 2 proton của nhóm -CH2- tại vị trí C-4’ liên kết với 2 nguyên tử oxi. Các tín hiệu proton khác của 1 được tổng hợp ở Bảng 3.1.
Bảng 3.1. Độ chuyển dịch hóa học 1H, 13C-NMR của 1 Vị trí 13C (ppm) 1H (J Hz, δ ppm) 1 202.02 2 118.17 3 107.31 6.67 (d, J = 7.9 Hz, 1H) 4 122.01 6.20 (s, 1H) 5 152.13 6 147.06 7 133.11 8 57.16 9 37.89 2.52 (td, J = 7.4, 5.6 Hz, 1H) 10 132.16 5.59 (m, 1H) 11 145.93 12 190.18 13 32.82 2.17 (dd, J = 14.7, 7.4 Hz, 1H), 2.00 (dd, J = 14.7, 7.4 Hz, 1H) 14 55.22 2.61 (d, J = 5.6 Hz, 1H) 1’ 66.51 3.62 (d, J = 3.2 Hz, 1H) 2’ 16.94 0.99 (d, J = 7.2 Hz, 3H) 3’ 54.60 3.62 (s, 3H) 4’ 100.22 5.88 (s, 2H)
Hình 3.2. Phổ 13C-NMR của chất 1
Phổ 13C-NMR của chất 1 cho thấy có 18 tín hiệu cộng hưởng của các
nguyên tử cacbon. Nguyên tử cacbon của nhóm C=O tại vị trí số 1 có δC202.02 ppm, nguyên tử cacbon tại vị trí 12 có δC 190.18 ppm. Nhóm methyl liên kết với cacbon bậc 2 có δC 16.94 ppm tại vị trí 2’. Độ chuyển dịch hóa học của nhóm methylen -CH2- trong nhóm -O-CH2-O- tại vị trí 4’ có δC 100.22 ppm. Nhóm methyl liên kết với oxi có độ chuyển dịch hóa học là 54.60 ppm. Các tín hiệu cộng hưởng của các nguyên tử cacbon khác được tổng hợp ở Bảng 3.1.
Trên phổ tương quan hai chiều HSQC và HMBC ta nhận thấy các tín hiệu tương tác trực tiếp và gián tiếp của các nguyên tử cacbon và hidro. Đồng thời nhận thấy trong phân tử có nhóm este nội vòng.
Hình 3.3. Phổ HSQC của chất 1
Trên phổ phổ HMBC chỉ ra một số sự tương quan quan trọng giữa tín hiệu của protn và tín hiệu cộng hưởng của các nguyên tử cacbon trong khoảng 2-4 liên kết; proton của nhóm methylen liên kết với oxi (-O-CH2-O-) tương tác với cacbon C-5 và C-6; Nhóm metyl trong nhóm -O-CH3 liên kết nguyên tử C-1’ qua nguyên tử oxi. Các tương quan khác của phổ HSQC và HMBC được sử dụng để quy kết các tin hiệu thể hiện trong Bảng 3.1.
Để xác định lập thể của các nguyên tử, nhóm nguyên tử dựa trên giá trị hằng số tách J và tương quan trên phổ NOESY. Tại H-9 có J = 7.4 và 5.6 Hz (<10 Hz) nên là cấu hình β- [54, 57]. Kết hợp với phổ NOESY nhận thấy kết nguyên tử H-9 không có tín hiệu tương quan với H-14, do đó H-14 có thể tồn tại dưới dạng α-, H-9 không có tương quan với H-1’ nên nhóm cấu trúc tại C-1’ có thể ở dạng α-.
Hình 3.6. Phổ MS của chất 1
Kết hợp với phổ khối lượng có peak ion m/z 347.33 [M+H]+ (100%), kết hợp với phổ NMR nhận thấy chất 1 có công thức phân tử là C18H18O7. Dựa trên dữ liệu về phổ cộng hưởng từ hật nhân và phổ khối lượng, kết hợp tham khảo tài liệu tham khảo [54, 57, 74], có thể khẳng định chất 1 có công thức cấu tạo là:
Hình 3.7. Công thức cấu tạo của chất 1