Cấu trúc của NTD.031 được phân tích bằng phương pháp NMR, các điều kiện đo mẫu và thiết bị đo mẫu được thực hiện tương tự như các hợp chất đã được trình bày ở trên.
Phổ 1H-NMR thể hiện NTD.031 là hỗn hợp hai đồng phân epoxit (oxiran), phần lớn các tín hiệu của các trung tâm bất đối được tách ra khỏi nhau trong từ trường. Tín hiệu của proton H-12 và H-10 trên khung cấu trúc của hợp phần artemisinin đều được tách biệt giữa hai đồng phân
3,91 ppm (2H, m) là đặc trưng của H-3” ở mạch nhánh của S-oxiran, trong đó H- 3” của R-oxiran cộng hưởng ở vùng trường cao hơn 3,76-3,80 ppm (2H, m). Tín hiệu cộng hưởng của H-2” cũng được tách biệt trong từ trường, giá trị cộng hưởng tại 3,46-3,49 (1H, m) là H-2”của R-oxiran); 3,37-3,39 (1H, m) là H-2”của S-oxiran. Tín hiệu của H-1” cộng hưởng tại 3,67-3,74 (4H, m).
Hình 3.7. Phổ 1H-NMR của hợp chất NTD.031
Trên phổ 13C-NMR của NTD.031 xuất hiện đầy đủ tín hiệu cộng hưởng của 18 nguyên tử cacbon của hai đồng phân lập thể. So sánh với phổ 13C-NMR của hợp chất NTD.031 với NTD.01 thì các tín hiệu của nhóm olefin đã hoàn toàn mất đi đồng thời xuất hiện tín hiệu đặc trưng của vòng epoxit tại 53,8 ppm (C-2”) và 45,2 ppm (C-3”).
Hình 3.8. Phổ 13C-NMR của hợp chất NTD.031
Kết quả phân tích các dữ liệu NMR ở trên cho phép khẳng định cấu trúc của NTD.031.
3.4.3. Phân tích tỷ lệ hai đồng phân oxiran bằng 1H-NMR
Vì H-12 của DHA cố định nên lựa chọn làm tín hiệu để tính tỷ lệ hai đồng phân S và R-oxiran (epoxit) được tính theo công thức sau [41, 42]:
( ox ) %( ox ) 100 ( ox ) ( ox ) S S iran S iran x S S iran S R iran Trong đó:
S(R-oxiran) là diện tích tín hiệu proton H-12 của R-oxiran
Hình 3.9. Tỷ lệ tích phân của H-12 và H-10
Dựa theo phổ 1H-NMR ta có kết quả sau:
0, 750
%( ox ) 100 69, 25%
0, 750 0, 333
S iran x
Như vậy đồng phân R-oxian có 100-69,25=30,75% Độ chọn lọc lập thể của phản ứng: %( ) %( ) 69, 25 30, 75 . 38, 5% %( ) %( ) 100 DHA DHA d e DHA DHA
Tóm lại, phản ứng epoxit hóa hợp chất NTD.01 nhận được hỗn hợp hai đồng phân đối quang S-oxiran và R-oxiran(NTD.031) với tỷ lệ các đồng phân lần lượt là 69,25 và 30,75%; độ chọn lọc lập thể là 38,5%.