CHƢƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4.1. Các mẫu khảo nghiệm được tạo ra
Các yếu tố ảnh hƣởng đến chất lƣợng và số lƣợng của dấu vết máu trên vật mang là vải sau khi bị giặt bằng xà phòng:
- Loại xà phòng dùng để giặt.
- Cách thức giặt, phơi bao gồm: Thời gian giặt, thời gian ngâm xà phòng, dụng cụ giặt như giặt tay, giặt máy, giặt tay nhưng dùng bàn chải để chà, nhiệt độ của nước giặt, phơi trong nhà hay ngoài trời, nhiệt độ phơi...
Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang
- Lượng dấu vết bám trên vật mang.
- Thời gian dấu vết máu tồn tại trên vật mang trước khi bị giặt. - Chất liệu vải, màu sắc của vải.
Đề tài chỉ nghiên cứu biến động của những yếu tố mà chúng tôi cho là cần thiết và có ý nghĩa phục vụ công tác giám định đó là các yếu tố sau:
+ Loại xà phòng dùng để giặt: Sử dụng 3 loại bột giặt đó là bột giặt Ô mô, bột giặt Tide và bột giặt Ariel là 3 loại bột giặt thông dụng nhất trên thị trường hiện nay tại Việt Nam.
+ Cách thức giặt phơi: Không tiến hành khảo sát tất cả những biến động của yếu tố này vì trên thực tế cũng rất đa dạng và không thể xác định được thủ phạm đã giặt như thế nào nên chúng tôi chỉ đưa ra hai cách giặt thông thường nhất đó là giặt tay vàgiặt máy, dùng nước máy sạch và nhiệt độ của nước giặt là nhiệt độ tự nhiên phù hợp với thời tiết ở Việt Nam vào mùa hè đó là khoảng 250C đến 300C, phơi ở điều kiện nắng gió bình thường và nhiệt độ là khoảng 250
C đến 350C. Sử dụng bột giặt ô mô loại giặt tay (sản xuất tại công ty TNHH Quốc tế Unilever Việt Nam, theo công nghệ của Hà Lan là loại bột giặt thông dụng nhất hiện nay tại Việt Nam), dùng bột giặt ô mô cho máy giặt cửa đứng (sản xuất tại công ty TNHH Quốc tế Unilever Việt Nam, theo công nghệ của Hà Lan là loại bột giặt thông dụng nhất hiện nay tại Việt Nam). Ngoài ra còn khảo sát thêm hai loại xà phòng nữa là bột giặt Tide dùng chung cho cả tay và máy sản phẩm của công ty TNHH Procter Gamble Việt Nam và nước giặt Ariel dùng chung cho cả tay lẫn máy sản phẩm của công ty TNHH Procter Gamble sản xuất tại Malaysia cũng là hai loại xà phòng thông dụng hiện nay tại Việt Nam.
+ Lượng dấu vết bám trên vật mang: Sử dụng lượng máu là 3 ml và 0,5 ml tạo dấu vết trên vải.
Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang
+ Thời gian dấu vết máu tồn tại trên vật mang trước khi bị giặt: Giặt sau khi được tạo mẫu và để khô ở nhiệt độ phòng 24 giờ và giặt sau khi được tạo mẫu và để khô ở nhiệt độ phòng 72 giờ.
+ Chất liệu vải, màu sắc của vải: Sử dụng loại vải mỏng mềm chất liệu polyeste chiếm 90% và loại chất vải dày cứng chất liệu cotton chiếm 90%. Sử dụng 3 mảnh vải cùng chất liệu nhưng khác nhau về màu sắc đó là trắng, đen, đỏ.
Các mẫu khảo nghiệm đƣợc tạo ra: Tổng số mẫu là 16 mẫu (mỗi mẫu sẽ đƣợc tách chiết bằng 2 phƣơng pháp): đƣợc chia làm 6 nhóm (là các nhóm bị tác động) và nhóm 7 (là nhóm không bị tác động).
+ Nhóm 1: So sánh dấu vết được tạo ra trên vải và bị giặt bởi 3 loại xà phòng
khác nhau gồm 3 mẫu: 01 mẫu giặt bằng bột giặt Ô mô loại giặt tay (mẫu 1A) và 01 mẫu giặt bằng bột giặt Tide loại dùng cho cả giặt tay và giặt máy (mẫu 1B) và 01 mẫu giặt bằng nước giặt Ariel (mẫu 1C). Ba mẫu được tạo giống nhau và mỗi mẫu được tạo ra như sau:
Tạo mẫu:
Lấy mẫu máu tươi, dạng dịch lỏng (máu toàn phần) của người, nhỏ với lượng 1,5 ml lên một mảnh vải thô màu trắng có kích thước 15 cm x 15 cm trên một diện tích khoảng 4,5 cm x 4,5 cm, sao cho lượng dấu vết được tạo trên vải là khá đồng đều, để khô dấu vết trong 24 giờ ở nhiệt độ phòng sau đó đem giặt. Cách giặt của nhóm 1 như sau:
- Đối với mẫu 1A: Dùng 10 gram bột giặt Ô mô loại giặt tay hòa tan với 0,5 lít nước máy sạch, sau đó cho mẫu máu đã được tạo ra trên mảnh vải vào, vò khoảng 1 phút, vắt kiệt nước xà phòng và cho sang một chậu nước máy sạch (dùng khoảng 5 lít nước) vò khoảng 1 phút, vắt kiệt nước. Lặp lại bước này 3 lần.
- Đối với mẫu 1B: Dùng 10 gram bột giặt Tide loại dùng chung cho cả giặt tay và giặt máy, hòa tan với 0,5 lít nước máy sạch, sau đó giặt giống mẫu 1A.
Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang
- Đối với mẫu 1C: Dùng 10 gram nước giặt Ariel dùng chung cho cả tay lẫn máy hòa tan với 0,5 lít nước máy sạch, sau đó sau đó giặt giống mẫu 1A.
+ Nhóm 2: So sánh lượng dấu vết sau khi bị giặt tay và giặt máy gồm 02
mẫu: 01 mẫu giặt tay (mẫu 2A) và 01 mẫu giặt máy (mẫu 2B). Hai mẫu được tạo giống nhau và mỗi mẫu được tạo ra như sau:
- Lấy mẫu máu tươi, dạng dịch lỏng (máu toàn phần) của người, nhỏ với lượng 1,5 ml lên 01 mảnh vải thô màu trắng có kích thước 15cm x 15cm trên một diện tích khoảng 4,5 cm x 4,5 cm, sao cho lượng dấu vết được tạo trên vải là khá đồng đều. Để khô dấu vết trong 24 giờ ở nhiệt độ phòng sau đó đem giặt. (Một mẫu giặt tay và một mẫu giặt máy).
- Với 01 mẫu giặt bằng tay: Dùng 10 gram xà phòng bột ô mô hòa tan với 0,5 lít nước máy sạch, sau đó cho mẫu máu đã được tạo ra trên mảnh vải vào, vò khoảng 1 phút, vắt kiệt nước xà phòng và cho sang một chậu nước máy sạch (dùng khoảng 5 lít nước) vò khoảng 1 phút, vắt kiệt nước. Lặp lại bước này 3 lần.
- Với 01 mẫu giặt bằng máy: Sử dụng máy giặt LG cửa đứng, loại 7 kg, (loại máy giặt tương đối thông dụng có mức giá trung bình), dụng bột giặt ô mô dùng cho giặt máy và sử dụng nước máy sạch, cho mẫu máu đã được tạo ra trên mảnh vải vào cùng khoảng 4 kg quần áo. Sử dụng chế độ giặt bình thường với 50 gram xà phòng. (Số lượng xà phòng được dùng theo như hướng dẫn sử dụng xà phòng của nhà sản xuất).
+ Nhóm 3: So sánh lượng dấu vết bị giặt và được tạo ra theo hai cách nhiều ít
khác nhau trên một loại vải gồm 2 mẫu: - Tạo mẫu:
+ 01 mẫu (mẫu 3A) được tạo ra như sau:
Lấy mẫu máu tươi, dạng dịch lỏng (máu toàn phần) của người, nhỏ với lượng 3ml lên một mảnh vải thô màu trắng có kích thước 15cm x 15cm trên một diện tích khoảng 4,5 cm x 4,5 cm, sao cho lượng dấu vết được tạo trên vải là khá đồng đều. Để khô dấu vết trong 24 giờ ở nhiệt độ phòng sau đó đem giặt.
Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang
+ 01 mẫu (mẫu 3B) được tạo ra như sau:
Lấy mẫu máu tươi, dạng dịch lỏng (máu toàn phần) của người, nhỏ với lượng 0,5 ml lên một mảnh vải thô màu trắng có kích thước 15cm x 15cm trên một diện tích khoảng 4,5 cm x 4,5 cm, sao cho lượng dấu vết được tạo trên vải là khá đồng đều. Để khô dấu vết trong 24 giờ ở nhiệt độ phòng sau đó đem giặt. Cách giặt của nhóm 3 như sau:
- Dùng 10 gram xà phòng bột ô mô loại giặt tay hòa tan với 0,5 lít nước máy sạch, sau đó cho mẫu máu đã được tạo ra trên mảnh vải vào, vò khoảng 1 phút, vắt kiệt nước xà phòng và cho sang một chậu nước máy sạch (dùng khoảng 5 lít nước) vò khoảng 1 phút, vắt kiệt nước. Lặp lại bước này 3 lần.
+ Nhóm 4: So sánh dấu vết bị giặt được tạo ra sau 24 giờ (mẫu 4A) và dấu
vết bị giặt được tạo ra sau 72 giờ (mẫu 4B). Tạo mẫu:
01 mẫu (mẫu 4A) được tạo ra như sau:
Lấy mẫu máu tươi, dạng dịch lỏng (máu toàn phần) của người, nhỏ với lượng 1,5 ml lên một mảnh vải thô màu trắng có kích thước 15cm x 15cm trên một diện tích khoảng 4,5 cm x 4,5 cm, sao cho lượng dấu vết được tạo trên vải là khá đồng đều. Để khô dấu vết trong 24 giờ ở nhiệt độ phòng sau đó đem giặt. 01 mẫu (mẫu 4B) được tạo ra như sau:
Lấy mẫu máu tươi, dạng dịch lỏng (máu toàn phần) của người, nhỏ với lượng 1,5 ml lên một mảnh vải thô màu trắng có kích thước 15cm x 15cm trên một diện tích khoảng 4,5 cm x 4,5 cm, sao cho lượng dấu vết được tạo trên vải là khá đồng đều. Để khô dấu vết trong 72 giờ ở nhiệt độ phòng sau đó đem giặt. Cách giặt của nhóm 4 giống nhóm 3.
+ Nhóm 5: So sánh dấu vết bị giặt được tạo ra trên ba mảnh vải có cùng chất
liệu chỉ khác nhau về màu sắc đó là một loại vải với 3 màu đen, đỏ, trắng
Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang
Tạo mẫu: Cả ba mẫu được tạo giống nhau và như sau: 01 mẫu (mẫu 5A) được tạo ra như sau:
Lấy mẫu máu tươi, dạng dịch lỏng (máu toàn phần) của người, nhỏ với lượng 1,5 ml lên một mảnh vải thô màu đen có kích thước 15cm x 15cm trên một diện tích khoảng 4,5 cm x 4,5 cm, sao cho lượng dấu vết được tạo trên vải là khá đồng đều, để khô dấu vết trong 24 giờ ở nhiệt độ phòng sau đó đem giặt. 01 mẫu (mẫu 5B) được tạo ra như sau:
Lấy mẫu máu tươi, dạng dịch lỏng (máu toàn phần) của người, nhỏ với lượng 1,5 ml lên một mảnh vải thô màu đỏ có kích thước 15cm x 15cm, trên một diện tích khoảng 4,5 cm x 4,5 cm, sao cho lượng dấu vết được tạo trên vải là khá đồng đều. Để khô dấu vết trong 24 giờ ở nhiệt độ phòng sau đó đem giặt. 01 mẫu (mẫu 5C) được tạo ra như sau:
Lấy mẫu máu tươi, dạng dịch lỏng (máu toàn phần) của người, nhỏ với lượng 1,5 ml lên một mảnh vải thô màu trắng có kích thước 15cm x 15cm trên một diện tích khoảng 4,5 cm x 4,5 cm, sao cho lượng dấu vết được tạo trên vải là khá đồng đều. Để khô dấu vết trong 24 giờ ở nhiệt độ phòng sau đó đem giặt. Cách giặt của nhóm 5 như sau:
Cả 3 mẫu trên được giặt bằng tay, giặt riêng cho từng mẫu và cách giặt của nhóm 5 giống nhóm 3.
+ Nhóm 6: So sánh lượng dấu vết bị giặt và được tạo ra trên hai loại vải một
loại vải mỏng mềm, chất liệu 90% polyeste, màu trắng và một loại vải dày cứng chất liệu 90% cottong màu trắng gồm 2 mẫu:
Tạo mẫu:
01mẫu được tạo ra như sau: (Mẫu 6A)
Lấy mẫu máu tươi, dạng dịch lỏng (máu toàn phần) của người, nhỏ lên một mảnh vải có kích thước 15 cm x 15 cm (vải mỏng mềm, chất liệu 90% polyeste) sao cho dấu vết thấm đẫm trên một diện tích vải khoảng 4,5 cm x 4,5 cm, để khô dấu vết trong 24 giờ ở nhiệt độ phòng sau đó đem giặt.
Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang
01mẫu được tạo ra như sau: (Mẫu 6B)
Lấy mẫu máu tươi, dạng dịch lỏng (máu toàn phần) của người, nhỏ lên một mảnh vải có kích thước 15 cm x 15 cm (loại có chất vải dày cứng chất liệu cotton chiếm 90%) sao cho dấu vết thấm đẫm trên một diện tích vải khoảng 4,5cm x 4,5 cm để khô dấu vết trong 24 giờ ở nhiệt độ phòng sau đó đem giặt. Cách giặt của nhóm 6 giống nhóm 3.
+ Nhóm 7: Tạo hai mẫu:
01 mẫu (Mẫu 7A) được tạo ra giống như mẫu 6A nhưng không giặt (sử dụng
làm mẫu so sánh).
01 mẫu (Mẫu 7B) được tạo ra giống như mẫu 6B nhưng không giặt (sử dụng
làm mẫu so sánh).
Nguyên liệu:
+ Chuẩn bị khoảng 20 ml máu tươi toàn phần.
Sử dụng máu tươi toàn phần (không có chất chống đông và những thành phần khác không phải là máu) của một người lấy từ động mạnh.
+ Các loại vải như trên.
+ Chuẩn bị các loại xà phòng: Bột giặt ô mô loại giặt tay, bột giặt ô mô loại cho máy giặt cửa đứng (sản xuất tại công ty TNHH Quốc tế Unilever Việt Nam, theo công nghệ của Hà Lan), bột giặt Tide dùng chung cho cả tay và máy sản phẩm của công ty TNHH Procter Gamble Việt Nam và nước giặt Ariel dùng chung cho cả tay lẫn máy sản phẩm của công ty TNHH Procter Gamble sản xuât tại Malaysia.
+Nước máy sạch. +Máy giặt, chậu giặt.
2.4.2. Các mẫu tạo ra được ký hiệu 1A, 1B, 1C, 2A, 2B, 3A, 3B, 4A, 4B, 5A, 5B, 5C, 6A, 6B, 7A, 7B, được tiến hành các bước thí nghiệm như sau:
- Tiến hành thử định hướng và xác định tính đặc hiệu loài đối với tất cả các dấu vết thu được từ các mẫu khảo nghiệm.
Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang
- Tách chiết: Cắt chuyển dấu vết trên 16 mẫu có ký hiệu 1A, 1B, 1C, 2A, 2B, 3A, 3B, 4A, 4B, 5A, 5B, 5C, 6A, 6B, 7A, 7B các dấu vêt trên sẽ được cắt chuyển các diện tích vải bằng nhau có kích thước 1,2 cm x 1,2 cm cho vào các ống để tách chiết với hai phương pháp: Chelex 5% và bộ kít Prepfier với mỗi thí nghiệm lặp lại 3 lần vậy tổng số mẫu tách chiết sẽ là 96 mẫu.
- Định lượng: Tiến hành định lượng đối với 96 mẫu kể trên.
- PCR: Căn cứ vào kết quả định lượng và tính toán để tiến hành PCR các mẫu sao cho lượng ADN có được trong mỗi phản ứng là khoảng từ 0,5 ng.
- Chạy điện di và phân tích kết quả.
2.4.3. Tách chiết ADN bằng dung dịch Chelex 5% và bộ kít PrepFiler
Các mẫu được chia làm 2 mẻ mỗi mẻ 16 ống nghiệm. Mẻ 1 gồm 16 ống, mỗi ống nghiệm tách chiết ADN bằng phương pháp sử dụng 200 µl dung dịch chelex có nồng độ 5%. Mẻ 2 gồm 16 ống, mỗi ống nghiệm được tách chiết ADN bằng phương pháp sử dụng bộ kít PrepFier. (Mỗi thí nghiệm lặp lại 3 lần).
Khi tách chiết xong với chelex 5% và bộ kít PrepFier tiến hành định lượng, PCR, chạy điện di và phân tích kết quả.
So sánh các kết quả của hai phương pháp tách chiết để tìm ra phương pháp tách chiết tối ưu nhất cho các loại dấu vết trên.
2.4.4. Thử nghiệm kết quả tách chiết bằng bộ kít PrepFiler trên các mẫu từ các vụ án cụ thể các vụ án cụ thể
Dùng 8 ống nghiệm chuyển mẫu lấy chủ yếu từ những bộ quần áo trong các vụ án đã rõ, tách bằng bằng bộ kít PrepFiler, định lượng, PCR, chạy điện di để kiểm tra kết quả tách chiết bằng bộ kít PrepFilervới vụ án thực tế.
Nội dung một số vụ án thƣ̣c tế:
A1. Tối ngày 21/4/2011, Hà Văn Trưởng và Hoàng Trung Du đều trú tại xã Khánh Yên Thượng, huyện Văn Bàn, tỉnh Lào Cai đi uống rượu đến khoảng
Luận văn cao học Đặng Thị Thu Giang
22 giờ cùng ngày trên đường về thì bị Đào Văn Tâm sinh năm 1984 chặn đường xin tiền và hỏi mượn điện thoại, Trường trả lời không có thì bị đạp vào bụng. Trưởng và Du bỏ chạy về nhà sau đó quay lại, Trưởng đã mang theo một con dao tìm Đào Văn Tâm và dùng dao chém Đào Văn Tâm. Hậu quả Đào Văn Tâm tử vong. Quá trình điều tra, Cơ quan CSĐT đã thu giữ các vật chứng trong đó có chiếc áo thu giữ của Hà Văn Trưởng mặc trong quá trình gây án và đã bị giặt.
A2. Khoảng 12 giờ ngày 02/7/2015, Vi Văn Hai (sinh năm 1995) trú tại bản Phồng, xã Tam Hợp, huyện Tương Dương, tỉnh Nghệ An, đi từ lán rẫy ở C5 Dọt Dẹt đến C5 Kèn Tạ, đều thuộc bản Phồng, xã Tam Hợp, huyện Tương Dương, tỉnh Nghệ An để hái quả chanh. Quá trình hái quả chanh Hai xảy ra mâu thuẫn với anh Lo Văn Thọ (sinh năm 1987) cư trú cùng bản Phồng xã Tam Hợp, huyện Tương Dương, tỉnh Nghệ An dẫn đến việc Hai dùng dao của gia đình anh Lo Văn Thọ và chị Lê Thị Yến (sinh năm 1989) chém Lo Văn Thọ, Lê Thị Yến, Lo Việt Chung (sinh năm 2014) và bà Viêng Thị Dương (sinh năm 1952) đều trú tại bản Phồng, xã Tam Hợp, huyện Tương Dương, tỉnh Nghệ An. Hậu quả: Lo Văn Thọ, Lê Thị Yến, Lo Việt Chung và bà Viêng Thị Dương đều bị tử vong. Quá trình điều tra, Cơ quan CSĐT đã thu