Tương tự như giới hạn về ô nhiễm vi sinh vật thì giới hạn ô nhiễm đối với kim loại nặng cũng là một trong những tiêu chí để đánh giá mức độ an toàn của sản phẩm thực phẩm. Một số chỉ tiêu đối với kim loại chì, cadimi và asen được xác định và kết quả thử nghiệm của dịch chiết dành dành được thể hiện như bảng 9 dưới đây.
Bảng 9: Kết quả đánh giá các chỉ tiêu kim loại nặng của dịch chiết dành dành STT Tên chỉ tiêu Phương pháp
thử Kết quả thử nghiệm Kết luận
1 Chì TCVN 7602:2007 Không phát hiện (LOD 0,02 mg/kg) Đạt 2 Cadimi AOAC 999.11.2012 Không phát hiện (LOD 0,02 mg/kg) Đạt
3 Asen AOAC 986.15.2012
Không phát hiện
(LOD 0,5 mg/kg) Đạt
Các thử nghiệm được thực hiện bởi Phòng Thí nghiệm Hóa sinh, Trung tâm chứng nhận phù hợp (QUACERT), Tổng cục tiêu chuẩn đo lường chất lượng, các kết quả được tham chiếu với QCVN 8-2:2011/BYT là quy chuẩn kỹ thuật quốc gia đối với giới hạn ô nhiễm kim loại nặng trong thực phẩm. Giới hạn ô nhiễm kim loại nặng là mức tối đa hàm lượng kim loại nặng đó được phép có trong thực phẩm, cụ thể hơn giới hạn của asen là 0,5mg/kg, chì 0,02mg/kg, cadimi là 0,02mg/kg. Kết quả cho thấy trong sản phẩm đều không phát hiện được chì, asen hay cadimi.
Với các kết quả trên, có thể tin tưởng rằng, dịch chiết dành dành hoàn toàn có thể đạt các điều kiện tiêu chuẩn để đưa vào sản xuất đại trà và đưa ra thị trường dưới dạng phẩm màu thực phẩm.
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
Kết luận
1. Crocin là thành phần tạo màu chính trong dịch chiết dành dành chiếm 42,4% so với khối lượng của bột dịch chiết, bao gồm crocin-1 với khối lượng phân tử 976 Dalton và crocin-2 với khối lượng phân tử 814 Dalton.
2. Dịch chiết dành dành có hoạt tính chống oxi hóa với giá trị IC50 là 0,33 g/L. 3. Dịch chiết dành dành không gây độc tính trên chuột ở mức liều cao 33,0g/kg,
nhưng lại có ảnh hưởng tăng dần lên phôi cá theo thời gian và nồng độ. Giá trị LC50 tại thời điểm 72h của dịch chiết dành dành là 4,9 g/L; nồng độ không gây dị dạng lên phôi cá ngựa vằn là 0,1-1g/L.
4. Chế phẩm bột màu vàng từ hạt dành dành có độ hòa tan tốt trong nước, chịu được khoảng pH rộng từ 1-12, bền với nhiệt độ cao lên đến 100ºC và có khả năng giữ màu 96% sau thời gian bảo quản 12 tháng ở 4ºC.
5. Chế phẩm bột màu vàng từ hạt dành dành đảm bảo một số chỉ tiêu về vệ sinh an toàn thực phẩm như chỉ tiêu vi sinh vật (Pseudomonas, E.coli, Coliforms) dưới giá trị giới hạn dưới cho phép (1,0x101 CFU/g) và không phát hiện được kim loại nặng (chì, cadimi, asen) trong chế phẩm.
Kiến nghị
Tiếp tục đánh giá một số chỉ tiêu an toàn thực phẩm khác của bột màu vàng từ dịch chiết hạt dành dành nhằm đưa chế phẩm ra thị trường.
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt
1. Nguyễn Thị Thanh Thủy, Nguyễn Thị Hiển (2016), "Chiết tách và khảo sát độ bền của chất màu crocin từ quả dành dành", Tạp chí Khoa học Nông nghiệp Việt Nam, 14(12), tr. 1978-1985.
2. Đào Thị Vui, Giang Thị Sơn, Mai Hải Yến (2001), "Nghiên cứu thành phần hoá học và thăm dò độc tính cấp của quả dành dành (Gardenia jasminoides)", Tạp chí Dược học, 9, tr. 12-14.
Tiếng Anh
3. Brand-Williams W., Cuvelier M.-E., and Berset C., (1995), "Use of a free radical method to evaluate antioxidant activity", LWT - Food Science and Technology, 28(1), pp. 25-30.
4. Chen J., Shi B., Xiang H., Hou W., Qin X., Tian J., and Du G., (2015), "1H NMR-based metabolic profiling of liver in chronic unpredictable mild stress rats with genipin treatment", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 115, pp. 150-158.
5. Chen S., Zhao X., Yi R., Qian J., Shi Y., and Wang R., (2017), "Anticancer effects of Gardenia jasminoides in HepG2 human hepatoma cells", Biomedical Research, 28(2), pp. 716-726.
6. Chen Y., Cheng Y., Tzeng C., Lee Y., Chang Y., Lee S., Tsai C., Chen J., Tzen J.T.C., and Chang S.L., (2014), "Peroxisome proliferator-activated receptor activating hypoglycemic effect of Gardenia jasminoides Ellis aqueous extract and improvement of insulin sensitivity in steroid induced insulin resistant rats", BMC Complementary and Alternative Medicine, 14, pp. 30.
7. FAO, (2004), "CURCUMIN", Chemical and Technical Assessment 61st JECFA. 8. Fu Y., Liu B., Liu J., Liu Z., Dejie, Liang, Li F., Li D., Cao Y., Zhang X., Zhang N., and Yang Z., (2012), "Geniposide, from Gardenia jasminoides Ellis, inhibits the inflammatory response in the primary mouse macrophages and mouse models",
9. Gao L. and Zhu B.-Y., (2013), "The Accumulation of Crocin and Geniposide and Transcripts of Phytoene Synthase during Maturation of Gardenia jasminoides Fruit", Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, pp. 686351. 10. H L., L Y., J C., X G., Y M., Y C., P L., and C Z., (2015), "Analysis of volatile ingredients in Gardeniae Fructus and its processed products by GC-MS", J Tradit Chin Med, 40(9), pp. 1732-1737.
11. Hadizadeh F., Mohajeri S.A., and Seifi M., (2010), "Extraction and Purification of Crocin from Saffron Stigmas Employing a Simple and Efficient Crystallization Method", Pakistan Journal of Biological Sciences, 13, pp. 691-698.
12. Hausenblas H.A., Heekin K., Mutchie H.L., and Anton S., (2015), "A systematic review of randomized controlled trials examining the effectiveness of saffron (Crocus sativus L.) on psychological and behavioral outcomes", J Integr Med, 13, pp. 231-240.
13. He W., Gao Y., Yuan F., Bao Y., Liu F., and Dong J., (2010), "Optimization of Supercritical Carbon Dioxide Extraction of Gardenia Fruit Oil and the Analysis of Functional Components", Journal of the American Oil Chemists' Society, 87(9), pp. 1071-1079.
14. Hong I.K., Jeon H., and Lee S.B., (2015), "Extraction of natural dye from Gardenia and chromaticity analysis according to chi parameter", Journal of Industrial and Engineering Chemistry, 24, pp. 326-332.
15. İnanç A.L., (2011), "Chlorophyll: Structural Properties, Health Benefits and Its Occurrence in Virgin Olive Oils ", Academic Food Journal 9(2), pp. 26-32.
16. Kaji T., Hayashi T., Nsimba M., Kaga K., Ejiri N., and Sakuragawa N., (1991), "Gardenia Fruit Extract Does Not Stimulate the Proliferation of Cultured Vascular Smooth Muscle Cells, A10", Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 39(5), pp. 1312-1314.
17. Khoo H.E., Azlan A., Tang S.T., and Lim S.M., (2017), "Anthocyanidins and anthocyanins: colored pigments as food, pharmaceutical ingredients, and the potential health benefits", Food Nutr Res, 61(1), pp. 1361779.
18. Kojima K., Shimada T., Nagareda Y., Watanabe M., Ishizaki J., Sai Y., Miyamoto K.-i., and Aburada M., (2011), "Preventive Effect of Geniposide on
Metabolic Disease Status in Spontaneously Obese Type 2 Diabetic Mice and Free Fatty Acid-Treated HepG2 Cells", Biological and Pharmaceutical Bulletin, 34(10), pp. 1613-1618.
19. Lee J.H., Lee D.U., and Jeong C.S., (2009), "Gardenia jasminoides Ellis ethanol extract and its constituents reduce the risks of gastritis and reverse gastric lesions in rats", Food and Chemical Toxicology, 47(6), pp. 1127-1131.
20. Lin W.H., Kuo H.H., Ho L.H., Tseng M.L., Siao A.C., Hung C.T., Jeng K.C., and Hou C.W., (2015), "Gardenia jasminoides extracts and gallic acid inhibit lipopolysaccharide-induced inflammation by suppression of JNK2/1 signaling pathways in BV-2 cells", Iranian J Basic Med Sci, 18, pp. 555-562.
21. Ma T., Li X., Li W., Yang Y., Huang C., Meng X., Zhang L., and Li J., (2015), "Geniposide alleviates inflammation by suppressing MeCP2 in mice with carbon tetrachloride-induced acute liver injury and LPS-treated THP-1 cells", International Immunopharmacology, 29(2), pp. 739-747.
22. Martins N., Roriz C.L., Morales P., Barros L., and Ferreira I.C.F.R., (2016), "Food colorants: Challenges, opportunities and current desires of agroindustries to ensure consumer expectations and regulatory practices", Trends in Food Science & Technology, 52, pp. 1-15.
23. Nagata Y., Watanabe T., Nagasaka K., Yamada M., Murai M., Takeuchi S., Murase M., Yazaki T., Murase T., Komatsu K., Kaizuka M., Sano M., Asano K., Ando C., and Taniuchi N., (2016), "Total dosage of gardenia fruit used by patients with mesenteric phlebosclerosis", BMC Complementary and Alternative Medicine, 16(1), pp. 207.
24. Park E.H., Joo M.H., Kim S.H., and Lim C.J., (2003), "Antiangiogenic activity of Gardenia jasminoides fruit", Phytotherapy Research, 17(8), pp. 961-962.
25. Sato S., Kitamura H., Chino M., Takei Y., Hiruma M., and Nomura M., (2007), "A 13-week oral dose subchronic toxicity study of gardenia yellow containing geniposide in rats.", Food and Chemical Toxicology, 45(8), pp. 1537-1544.
26. Sengar G. and Sharma H.K., (2014), "Food caramels: a review", J Food Sci Technol, 51(9), pp. 1686–1696.
27. Song X., Zhang W., Wang T., Jiang H., Zhang Z., Fu Y., Yang Z., Cao Y., and Zhang N., (2014), "Geniposide Plays an Anti-inflammatory Role via Regulating TLR4 and Downstream Signaling Pathways in Lipopolysaccharide-Induced Mastitis in Mice", Inflammation, 37(5), pp. 1588-1598.
28. Srivastava R., Ahmed H., Dixit R.K., Dharamveer, and Saraf S.A., (2010), "Crocus sativus L.: A comprehensive review", Pharmacognosy Reviews, 4, pp. 200-208.
29. Stahl W. and Sies H., (2005), "Bioactivity and protective effects of natural carotenoids", Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis of Disease, 1740(2), pp. 101-107.
30. Suzuki Y., Kondo K., Ikeda Y., and Umemura K., (2001), "Antithrombotic Effect of Geniposide and Genipin in the Mouse Thrombosis Model", Planta Med, 67, pp. 807-810.
31. Tao W., Zhang H., Xue W., Ren L., Xia B., Zhou X., Wu H., Duan J., and Chen G., (2014), "Optimization of Supercritical Fluid Extraction of Oil from the Fruit of Gardenia jasminoides and Its Antidepressant Activity", Molecules, 19, pp. 19350- 19360.
32. Thantsin K., (2011), "Natural Colorant from Gardenia jasminoides Ellis (Cape jasmine) ", Universities Research Journal, 4(1), pp. 65-74.
33. Tseng T.H., Chu C.Y., Huang J.M., Shiow S.J., and Wang C.J., (1995), "Crocetin protects against oxidative damage in rat primary hepatocytes", Cancer Letters, 97(1), pp. 61-67.
34. Wei-E Z., Yuan Z., Yang L., Yun L., Hong-Na L., Shao-Hui L., Shou-Jun J., Zhi-Qin R., Zhi-Qiang H., and Feng Z., (2016), "Determination of gardenia yellow colorants in soft drink, pastry, instant noodles with ultrasound-assisted extraction by high performance liquid chromatography-electrospray ionization tandem mass spectrum", Journal of Chromatography A, 1446, pp. 59-69.
35. Wu S., Wang G., Liu Z., Rao J., Lü L., Xu W., Wu S., and Zhang J., (2009), "Effect of geniposide, a hypoglycemic glucoside, on hepatic regulating enzymes in diabetic mice induced by a high-fat diet and streptozotocin", Acta Pharmacologica Sinica, 30(2), pp. 202-208.
36. Xiao W., Li S., Wang S., and Ho C.-T., (2017), "Chemistry and bioactivity of Gardenia jasminoides", Journal of Food and Drug Analysis, 25(1), pp. 43-61. 37. Xu G.L., Li G., Ma H.P., Zhong H., Liu F., and Ao G.Z., (2009), "Preventive Effect of Crocin in Inflamed Animals and in LPS-Challenged RAW 264.7 Cells", J. Agric. Food Chem, 57(18), pp. 8325-8330.
38. Yamada S., Oshima H., Saito I., and Hayakawa J., (1996), "Adoption of Crocetin as an Indicator Compound for Detection of Gardenia Yellow in Food Products", Analysis of Natural Coloring Matters in Food. V, 37, pp. 372-377. 39. Zhiguo J., Wenxue C., Sixin L., and Qizhen D., (2011), "Preparation of crocin from gardenia yellow pigment by slow rotary countercurrent chromatography",
Chinese Journal of Chromatography, 29(033), pp. 277-180.
PHỤ LỤC
Hình PL1: Sắc ký đồ HPLC của mẫu chuẩn crocin ở hàm lượng 5µg
0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 30.0 32.5 35.0 37.5 40.0 42.5 min -30 -20 -10 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 mAU Ch4-440nm,4nm (1.00)
Hình PL2: Sắc ký đồ HPLC của mẫu chuẩn crocin ở hàm lượng 10µg 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 30.0 32.5 35.0 37.5 40.0 42.5 min -25 0 25 50 75 100 125 150 175 200 225 250 275 mAU Ch4-440nm,4nm (1.00)
Hình PL3: Sắc ký đồ HPLC của mẫu chuẩn crocin ở hàm lượng 15µg 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 30.0 32.5 35.0 37.5 40.0 42.5 min -50 -25 0 25 50 75 100 125 150 175 200 225 250 275 300 325 350 mAU Ch4-440nm,4nm (1.00)
Hình PL4: Sắc ký đồ HPLC của mẫu chuẩn crocin ở hàm lượng 20µg 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 30.0 32.5 35.0 37.5 40.0 42.5 min -75 -50 -25 0 25 50 75 100 125 150 175 200 225 250 275 300 325 350 375 400 425 450 475 mAU Ch4-440nm,4nm (1.00)
Hình PL5: Sắc ký đồ HPLC của mẫu chuẩn crocin ở hàm lượng 25µg 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 30.0 32.5 35.0 37.5 40.0 42.5 min -50 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600mAUCh4-440nm,4nm (1.00)