Áp dụng theo tiêu chuẩn TCVN 8684:2011, mỗi lô vacxin lấy ngẫu nhiên 20 mẫu.
Song song với quá trình kiểm tra vô trùng của lô vacxin, chúng tôi tiến hành lấy 3 mẫu để kiểm tra hiệu giá virus trên 1 liều sử dụng của mỗi lô vacxin. Cách tiến hành như sau:
- Pha loãng 1 liều virus vacxin theo cơ số 10, nồng độ từ 10-1 đến 10-10
. Mỗi nồng độ pha loãng tiêm vào xoang niệu mô 5 phôi với liều 0,1ml/phôi. Sau 96 giờ theo dõi, ghi số phôi sống, số phôi chết. Tính EID50 theo công thức Reed Muench. Kết quả được trình bày ở bảng 4.1.
Kết quả thể hiện trong bảng 4.1 cho thấy: cả 3 mẫu thí nghiệm, mỗi liều vacxin đều cho hiệu giá virus từ 106.5đến 107.4
EID50/0,1ml. Theo tiêu chuẩn nhà sản xuất đưa ra thì lô vacxin phải đạt hiệu giá virus ít nhất là 106 EID50/1 liều vacxin.
Như vậy, sau khi kiểm tra hiệu giá virus của lô vacxin thứ nhất, chúng tôi thấy: cả 3 mẫu vacxin của lô 1 đều phù hợp với tiêu chuẩn đề ra.
Bảng 4.1. Kết quả xác định hiệu giá virus vacxin nhƣợc độc Newscatle chủng Clone Entero (3 mẫu vacxin lô 1)
Mẫu số Độ pha loãng Số trứng tiêm/ nồng độ Liều tiêm (ml) Kết quả EID50/ liều
Yêu cầu vacxin
01 10-1- 10-10 5 0,1 106.5 ≥106 EID50/liều 02 10-1- 10-10 5 0,1 106.6 ≥106 EID50/liều 03 10-1- 10-10 5 0,1 107.4 ≥106 EID50/liều
Đối với lô vacxin thứ 2 và thứ 3, chúng tôi cũng làm tương tự như lô vacxin thứ nhất. Kết quả được thể hiện ở bảng 4.2.
Bảng 4.2. Kết quả xác định hiệu giá virus vacxin ND-Clone Entero của 3 lô vacxin
Lô vacxin ∑ số mẫu kiểm tra Số lần thí nghiệm/lô EID50trung bình/lô EID50trung bình/3lô 1 3 3 106.8 106.53/liều 2 3 3 106.5 3 3 3 106.3
Qua bảng 4.2 cho thấy:
+ Lô vacxin 1: với 3 lần thí nghiệm ở 3 mẫu kiểm tra cho chỉ số EID50 trung bình là 106.8
+ Lô vacxin 2: cho chỉ số EID50trung bình là 106.5 + Lô vacxin 3: cho chỉ số EID50trung bình là 106.3
Từ đó thấy cả 3 lô vacxin được kiểm tra hiệu giá virus đều cho kết quả đạt yêu cầu đề ra.