C, 300 500 cần chuẩn bị mẫu muối bằng cách nghiền mịn muối tạo thành trong giấy bạc để giúp
S : Độ tan (g/100g dung môi)
3.3. ĐỊNH LƢỢNG MUỐI MAGIE HYDROXYCITRAT BẰNG PHƢƠNG PHÁP HPLC
PHÁP HPLC
Chất chuẩn: là (-)-Calcium threo-hydroxycitrat tribasic hydrate (CaHC), cung cấp bởi hãng Sigma-Aldrich, công thức C12H10Ca3O16.xH2O.
Xây dựng đƣờng chuẩn: Phương pháp xây dựng đường chuẩn được thực hiện bằng cách dựa vào kết quả phân tích một chuỗi các mẫu CaHC chuẩn. Năm mẫu dung dịch chuẩn chứa lần lượt 1,954; 4,89; 9,772; 19,54; 48,85 ppm CaHC chuẩn được tiêm vào HPLC, kết quả thu được các diện tích pic. Đường chuẩn CaHC được vẽ dựa trên biểu diễn sự phụ thuộc giữa nồng độ của CaHC và diện tích pic.
Phương trình đường chuẩn: A = 14589. C – 8145,2 với A là diện tích pic của CaHC, C là nồng độ CaHC, hệ số tương quan R2
= 1 (hình 3.15).
Định lƣợng muối Magie hydroxycitrat trong mẫu muối tạo thành: Hòa tan 0,1139 g mẫu muối tạo thành với nước cất 2 lần, định mức tới 50 ml, pha loãng theo tỉ lệ 1:50 với nước cất 2 lần. Tiêm mẫu vào HPLC, MgHC thu được trực tiếp dựa vào diện tích pic, bằng cách áp dụng hệ số pha loãng và sử dụng đường chuẩn. Nồng độ
của MgHC trong mẫu được trình bày dưới dạng % và được tính toán theo công thức sau: X = m Vdm f Kpl Cm Trong đó,
Cm : Nồng độ mẫu tính theo đường chuẩn
f : Hệ số chuyển đổi (f= MMgHC/MCaHC= 0,9094) Kpl : Hệ số pha loãng
Vdm : thể tích định mức m : khối lượng mẫu
Theo kết quả tính được thì hàm lượng của muối magie hydroxycitrat trong mẫu muối tạo thành là 53,9%.
Hình 3.16. Sắc kí đồ muối Magie hydroxycitrat tổng hợp đƣợc
Nhận xét: Đối chiếu hai đường sắc kí đồ muối tổng hợp được với sắc kí đồ muối canxi hydroxycitrat chuẩn ta thấy thời gian lưu gần như là trùng nhau. Như vậy có thể kết luận rằng thành phần chính của muối tổng hợp được là muối magie hydroxycitrat, ngoài ra còn có tạp chất.