trên động vật thực nghiệm
Tác dụng chống viêm cấp trên mơ hình gây phù bàn chân chuột bằng carrageenin
Winter từ những năm 60 của thế kỉ trước đã sử dụng phương pháp gây phù bàn chân sau của chuột bằng carrageenin để đánh giá tác dụng chống viêm của thuốc [133], đến nay phương pháp này vẫn thường xuyên được sử dụng để nghiên cứu tác dụng chống viêm của thuốc trên động vật thực nghiệm [134]. Carrageenin cĩ bản chất là polysaccharid, đường sunfat cĩ trong carrageenin sẽ khởi phát quá trình gây viêm bằng việc kích hoạt phospholipase A2. Giai đoạn đầu của viêm do carrageenin gây ra do tổn thương tại vết tiêm và giải phĩng các chất trung gian gây viêm, đặc biệt là serotonin và histamine [135]. Tiếp sau đĩ, Prostaglandin là tác nhân chính cho sự xuất hiện giai đoạn thứ hai của viêm do carrageenin, xảy ra vào khoảng 3 giờ sau khi tiêm carrageenin
Trong nghiên cứu của chúng tơi, thuốc đối chứng được sử dụng là Aspirin là một thuốc chống viêm thuộc nhĩm Nonsteroid.
Kết quả bảng 3.17 cho thấy Aspirin liều 400mg/kg cĩ tác dụng chống viêm cấp rõ rệt tại tất cả các thời điểm 2 giờ, 4 giờ, 6 giờ và 24 giờ sau khi gây viêm (p < 0,05). Trong khi đĩ, TDGV liều 2,16g/kg thể hiện tác dụng giảm viêm ở thời điểm 4 giờ và giảm rõ rệt ở thời điểm 6 giờ và 24 giờ (p < 0,05).
Kết quả này đã chứng minh được tác dụng chống viêm của viên nang cứng TDGV trên thực nghiệm. Các thuốc Y học cổ truyền thường tác dụng khơng nhanh bằng các thuốc Y học hiện đại, do đĩ thể hiện trên nghiên cứu tại thời điểm 4 giờ thuốc cĩ xu hướng giảm viêm và bắt đầu giảm viêm rõ từ giờ thứ 6. Cĩ kết quả như vậy do tất cả các dược liệu trong TDGV đều đã được nghiên cứu về tác dụng chống viêm trên dược lý học hiện đại. Theo nghiên cứu của Nut Koonrungsesomboon và cộng sự đã cho thấy Thương truật thể hiện tác dụng chống viêm thơng qua việc ức chế 5 – lypoxygenase (5-LOX) và cyclooxygenase-1 (COX-1) [137]. Hoàng bá chứa các chất Baicalein, oroxylin A cĩ tác dụng ức chế NF-κB nên ức chế giải phĩng các yếu tố hoạt hĩa phản ứng viêm PGE2, IL6, IL-1β do đĩ cĩ tác dụng chống viêm cấp tính và ức chế quá trình viêm khớp [138]. Ngưu tất cĩ dụng ức chế các cytokine gây viêm như IL- 1β, TNF-α, cyclooxygenase-2 (COX-2), prostaglandin E2 (PEG2) qua đĩ làm giảm quá trình viêm của cơ thể [139]. Thiên niên kiện là một dược liệu được sử dụng rộng rãi trong điều trị các bệnh lý xương khớp. Một nghiên cứu gần đây đã tìm được 19 Sesquiterpenoids (1-19) từ rễ Thiên niên kiện. Các phân lập này cho thấy tác dụng chống viêm mạnh mẽ thơng qua ức chế COX-2, PGE2 tùy thuộc vào mức liều sử dụng [140]. Chiết suất ethanol của dây đau xương cho thấy các hoạt động ức chế trên COX-1, COX-2, 5-lypoxygenase (5-LO) và phospholipase A(2) (PA2) dẫn đến giảm giải phĩng các chất trung gian gây viêm như TNF-α, IL-4, Nitric oxyd (NO) và IgE [141]. Dịch chiết quế chi cĩ tác dụng ức chế khả năng tăng trương lực cơ học do carrageenan gây ra phù chân chuột trên mơ hình thực nghiệm. Cơ chế được chứng minh do làm giảm
nồng độ các cytokine (TNF-α và IL-1β), NO và PGE2. Hơn nữa, theo phân tích của Western blot cho thấy các biểu hiện COX-2 và inducible nitric oxide synthase (iNOS) trong mơ da chân chuột thử nghiệm cũng giảm đáng kể
[142]. Râu ngơ ngồi cơ chế chống viêm thơng qua ức chế TNF-a, IL-1β, vascular endothelial growth factor alpha (VEGF-α) và IL-17A [143] cịn thể hiện tác dụng chống viêm thơng qua một peptid mới phát hiện là FK2 (được tìm thấy thơng qua quá trình thủy phân trypsin của râu ngơ). FK2 ức chế hoạt động inhibitory kB kinase-β (IKKβ), phosphoryl hĩa IκB và kích hoạt NF-κB từ đĩ ức chế các chất trung gian hĩa học gây viêm trong các mơ [144]. Là một dược liệu đã được sử dụng trong điều trị vết thương từ nhiều năm nay, tuy nhiên, tác dụng chống viêm của Trử ma diệp chưa được nghiên cứu nhiều. Theo nghiên cứu của Mi Jeong Sung và cộng sự, dịch chiết ethanol 70% của
trử ma diệp cĩ tác dụng chống viêm bằng cách ức chế ức chế p38 (P38 kinase đĩng vai trị điều chỉnh việc sản xuất các chất trung gian gây viêm chủ yếu, bao gồm TNF alpha, IL-1beta và COX-2) và c-Jun N-terminal kinases (JNK) (là một protein kinase được hoạt hĩa bằng mitogen và đĩng một vai trị quan trọng trong điều tiết quá trình viêm) [145].
Với mơ hình thực nghiệm gây phù chân sau chuột bằng tiêm carrageenin sẽ bước đầu đánh giá được khả năng chống viêm của thuốc nghiên cứu. Tuy nhiên, để tìm hiểu sâu hơn về tác dụng chống viêm của TDGV, trong nghiên cứu của mình chúng tơi tiến hành mơ hình gây viêm màng bụng chuột để đánh giá khả năng của thuốc nghiên cứu trên các chỉ số viêm phổ biến như: thể tích dịch rỉ viêm, số lượng bạch cầu và protein trong dịch rỉ viêm. Nếu TDGV cĩ tác dụng trên mơ hình này, sẽ làm giảm tính thấm thành mạch, dẫn đến giảm thể tích dịch rỉ viêm, giảm số lượng bạch cầu, giảm lượng protein trong dịch rỉ viêm từ đĩ gĩp phần làm giảm các triệu chứng sưng, nĩng, đỏ, đau do phản ứng viêm gây ra.
Qua bảng 3.18, 3.19 và 3.20 ta thấy, TDGV ở cả hai mức liều đều cho thấy tác dụng chống viêm rõ rệt thơng qua tác dụng giảm số lượng dịch rỉ viêm, giảm số lượng bạch cầu trong dịch rỉ viêm và giảm hàm lượng protein trong dịch rỉ viêm khi so sánh với lơ mơ hình, sự khác biệt cĩ ý nghĩa thống kê (p < 0,05). Như vậy, qua kết quả này cĩ thể thấy rằng, TDGV ở liều lâm sàng cĩ tác dụng chống viêm trên thực nghiệm.
Cơ chế của viêm: Tại ổ viêm cĩ ba biến đổi chủ yếu sau đây: rối loạn tuần hồn, rối loạn chuyển hĩa, tổn thương mơ và tăng sinh tế bào.
Rối loạn tuần hồn tại ổ viêm xảy ra ngay khi yếu tố gây viêm tác động, lần lượt xuất hiện các hiện tượng: co mạch, sung huyết động mạch, sung huyết tĩnh mạch, ứ máu. Giai đoạn co mạch xảy ra rất sớm và rất ngắn. Sung huyết động mạch xảy ra sau co mạch. Đĩ là sự giải phĩng các enzym từ lysosom của tế bào chết, các hĩa chất trung gian cĩ hoạt tính từ tế bào mast và bạch cầu (histamin, bradykinin, prostaglandin, leucotrien…) hay các sản phẩm hoạt động thực bào của bạch cầu, các cytokin: yếu tố hoại tử u (tumor necrosis factor: TNF), interleukin 1 (IL-1), yếu tố hoạt hĩa tiểu cầu (platelet activating factor: PAF)… đặc biệt là sự cĩ mặt của nitric oxyd (NO) do NO synthetase của các tế bào viêm (nhất là tế bào nội mơ thành mạch) bị hoạt hĩa sinh ra. Các tác nhân này sẽ làm tăng thấm mạch, thốt huyết tương, dẫn đến tình trạng sưng, nĩng, đỏ, đau. Dịch viêm là các sản phẩm xuất tiết tại ổ viêm, xuất hiện ngay từ khi sung huyết động mạch. Dịch bao gồm nước, các thành phần hữu hình và thành phần hịa tan (trong đĩ cĩ protein và bạch cầu là hai thành phần quan trọng của quá trình viêm) [146]. Như đã phân tích ở trên về cơ chế chống viêm của các dược liệu trong TDGV, cĩ thể thấy các dược liệu đĩ thể hiện vai trị ngay từ giai đoạn sung huyết của viêm thơng qua ức chế các yếu tố gây viêm, từ đĩ làm giảm các triệu chứng sưng, giảm hàm lượng protein và số lượng bạch cầu trong dịch rỉ viêm.