8. Cấu trúc luận văn
2.5.6. Kỹ thuật nuôi bọ gậy, muỗi Anopheles (An dirus, An epiroticus)
Mục đích của kỹ thuật: nhầm nhân rộng chủng bọ gậy thu thập ngoài thực địa, có 2 chủng bọ gậy muỗi Anopheles được sử dụng trong nghiên cứu. Chủng thứ nhất là chủng bọ gậy được nuôi tại phòng thí nghiệm khoa Côn Trùng, Viện Sốt rét-KST-CT Quy Nhơn (chủng labo). Chủng thứ hai là thu thập ngoài tự nhiên. Bọ gậy sau khi thu thập tại các điểm nghiên cứu sẽ được đem về phòng thí nghiệm khoa Côn Trùng, Viện Sốt rét-KST-CT Quy Nhơn tiếp tục nuôi giữ để phát triển lên muỗi (F0), sau đó cho muỗi (F0) đốt máu chuột hoặc thỏ để đẻ trứng, phát triển thành bọ gậy (F1), loăng quăng, muỗi (F1). Nếu số lượng cá thể bọ gậy thu thập ngoài thực địa không đủ để tiến hành thử nghiệm thì có thể sử dụng chủng bọ gậy thế hệ (F1) nuôi trong phòng thí nghiệm làm chủng thực địa sử dụng cho thử nghiệm.
Vật liệu
+ Lồng nuôi muỗi có kích thước 40x40x40 cm.
+ Đĩa cho muỗi đẻ: Dùng đĩa Petri có phủ một lớp bông thấm nước, bên trên đặt một tờ giấy thấm Whatman.
+ Khay men cao 12cm, đường kính 50cm hoặc khay nhựa nuôi bọ gậy có kích thước 25 x 30 x 6 cm.
+ Ống hút để thu thập bọ gậy, quăng. + Chén đựng quăng.
+ Ly giấy có vải màn phủ kín. + Ống hút muỗi
+ Ống nghiệm bằng thuỷ tinh đựng ether gây mê muỗi. + Kính lúp.
+ Ether.
+ Bông thấm nước.
+ Thức ăn cho bọ gậy: bột tôm, bột đậu xanh, bột bánh mì.
Quy trình nuôi bọ gậy Anopheles Trứng
Thu thập trong bát bằng nhựa sâu 12 cm và đường kính 20 cm, mực nước chứa trong bát khoảng 6-8 cm, xung quanh lót bằng giấy thấm Whatman cho muỗi đẻ.
Bọ gậy
Nuôi bọ gậy trong khay men, mỗi khay thả từ 300 - 500 bọ gậy. Trong thời gian đầu khi bọ gậy đang ở tuổi 1 mực nước trong khay khoảng 3-5 cm, khi bọ gậy sang tuổi 2,3,4 tăng dần lượng nước trong khay.
Thức ăn : Bọ gậy tuổi I ăn nước bột tôm hoà tan, mỗi ngày cho bọ gậy ăn 2 lần. Khi bọ gậy sang tuổi 2 có thể ăn hỗn hợp ngày 4 lần, số lượng thức ăn, số lần ăn tăng khi bọ gậy sang tuổi 4 (không cho bọ gậy ăn nhiều vì thức ăn thừa
sẽ làm hỏng nước nuôi). Dùng đầu tăm lấy thức ăn cho bọ gậy để không quá lượng quy định.
Trong trường hợp nước nuôi bọ gậy bẩn, có thể thay nước cho bọ gậy hoặc dùng ống hút hút chất bẩn ra.
Hằng ngày thêm nước vào khay nuôi bọ gậy. Nước nuôi bọ gậy là nước sạch, tuyệt đối không nhiễm hoá chất và các vi sinh vật kí sinh. Nên dùng nước uống tinh khiết để nuôi bọ gậy, có thể dùng nước máy nhưng phải để 3-5 ngày cho chloramin trong nước bay hơi.
Thức ăn cho bọ gậy:
+ Tôm tươi hấp chín, sấy khô, xay mịn.
Quăng
+ Dùng ống hút có miệng rộng để nhặt quăng từ khay nuôi bọ gậy cho vào chén. Đặt các chén này vào lồng muỗi.
+ Sau 2 -3 ngày quăng lột xác thành muỗi, lấy các chén ra.
Muỗi
+ Dùng một miếng bọt biển tẩm dung dịch đường Glucoza 10% và polyvitamin đặt vào trong lồng nuôi muỗi. Thay bọt biển 2 ngày 1lần.
+ Đặt bát nhựa xung quang có lót giấy thấm Whatman cho muỗi đẻ. - Kỹ thuật nuôi muỗi Anopheles
Vật liệu
+ Lồng nuôi muỗi có kích thước: 30x30x30 cm; 40x40x40 cm.
+ Đĩa cho muỗi đẻ: Dùng đĩa Petri có phủ một lớp bông thấm nước, bên trên đặt một tờ giấy thấm Whatman.
+ Khay nuôi bọ gậy bằng nhựa có kích thước: 20x30x6 cm. + Ống hút để thu thập bọ gậy, quăng.
+ Chén đựng quăng.
+ Ống hút muỗi.
+ Ống nghiệm bằng thủy tinh đựng ether gây mê muỗi. + Kim cắm muỗi làm giao cấu.
+ Kính lúp. + Ether.
+ Bông thấm nước.
+ Thức ăn cho bọ gậy: Gan gà, vịt, men Saccaroza, bột tôm, bột đậu xanh, bột bánh mì.
+ Thức ăn cho muỗi: Đường Glucoza 10%, polyvitamin, chuột nhắt trắng, chuột Hamster.
Quy trình nuôi muỗi Anopheles Trứng
+ Đặt 1-2 đĩa Petri có bông thấm nước và giấy thấm cho muỗi đẻ vào lồng nuôi muỗi có muỗi cái sắp đẻ. Chú ý giữ cho giấy thấm luôn luôn ẩm.
+ Sau 1-2 ngày thu trứng trên giấy thấm. Trứng của Anopheles có thể giữ không quá 5 ngày. Sau khi đẻ 3-5 ngày trứng được thả vào khay nước với mức nước từ 2-3cm. Sau một ngày bọ gậy sẽ nở ra.
Bọ gậy
+ Mỗi khay thả từ 200-300 con bọ gậy. Trong thời gian đầu khi bọ gậy đang ở tuổi một mức nước trong khay không quá 3cm, khi bọ gậy sang tuổi 2, 3, 4 tăng dần lượng nước trong khay.
+ Thức ăn: Bọ gậy tuổi 1 ăn nước bột gan, bột tôm hòa tan, mỗi ngày cho bọ gậy ăn 2 lần. Khi bọ gậy sang tuổi 2 có thể ăn hỗn hợp ngày 3 lần; số lượng thức ăn, số lần ăn tăng khi bọ gậy sang tuổi 4 (không cho bọ gậy ăn nhiều vì thức ăn thừa sẽ làm hỏng nước nuôi). Dùng đầu tăm lấy thức ăn cho bọ gậy để không quá lượng quy định.
hoặc dùng ống hút hút chất bẩn ra.
+ Hàng ngày thêm nước vào khay nuôi bọ gậy. Nước nuôi bọ gậy là nước sạch, tuyệt đối không nhiễm hóa chất và các vi sinh vật ký sinh. Nên dùng nước uống tinh khiết để nuôi bọ gậy, có thể dùng nước máy nhưng phải để 3-5 ngày cho chloramin trong nước bay hơi.
+ Thức ăn cho bọ gậy:
Gan gà, gan vịt luộc, sấy khô, xay mịn để đảm bảo thức ăn nổi trên nước. Tôm tươi hấp chín, sấy khô xay mịn.
Bột đậu xanh, ruột bánh mì hấp chín, sấy khô, xay mịn. Men saccaroza.
Trộn hỗn hợp trên với tỷ lệ: 1:1:1:1.
Quăng
+ Dùng ống hút có miệng rộng để nhặt quăng từ khay nuôi bọ gậy cho vào chén. Đặt các chén này vào lồng nuôi muỗi.
+ Sau 1-2 ngày quăng lột xác thành muỗi, lấy các chén ra.
Muỗi
+ Dùng một miếng bọt biển tẩm dung dịch đường Glucoza 10% và Polyvitamin đặt vào trong lồng nuôi muỗi. Thay bọt biển 2 ngày một lần.
+ Đặt các đĩa petri có giấy thấm nước cho muỗi đẻ.