1. Tính cấp thiết của đề tăi
1.2.2. Những nghiín cứu về dinh dưỡng câ Nđu
Theo Gisha Sivan vă ctv (2011), câ Nđu lă loăi câ nước lợ có giâ trị kinh tế cao, nó được nuôi lăm câ cảnh vă cũng lă một nguồn thực phẩm quan trọng hiện nay.Khi nghiín cứu về tập tính dinh dưỡng của câ Nđu ở hai nhóm câ có chiều dăi trung bình < 70mm vă >70mm, Gisha Sivan đê kết luận rằng tảo vă câc mênh vụn hữu cơ lă những thănh phần chính có trong ruột câ. Với sự phong phú về thănh phần thức ăn trong ống tiíu hoâ đê được tìm thấy, tâc giả đê kết luận rằng đđy lă một loăi câ ăn tạp. Độ dăi tương đối của đường ruột lă 3,1mm (dao động 2,14- 3,96mm), độ dăi năy thường được coi lă bình thường đối với một loăi câ ăn tạp (Nguyễn Thị Thanh Thủy, 2014) [20].
Theo Wongchinawit vă ctv (2007), câ Nđu phđn bố rất nhiều ở vùng cửa sông Pak Phanang, Thâi Lan. Khi nghiín cứu về đặc điểm dinh dưỡng của câ tâc giả cũng đê chỉ ra rằng câ Nđu có kích thước miệng nhỏ, miệng có nhiều răng (câ lớn) vă dạ dăy có hình dạng chữ U. Ở giai đoạn ấu trùng, câ ăn chủ yếu thực vật phù du cỡ nhỏ (micro-phytoplankton). Giai đoạn tiền trưởng thănh, câ ăn tảo, sinh vật đây, động vật phù du vă mảnh vụn hữu cỡ nhỏ. Câ trưởng thănh, thănh phần thức ăn trong ống tiíu hoâ rất đa dạng, từ micro-phytoplankton, sinh vật đơn băo, động vật phù du, sinh vật đây vă mảnh vụn. Trong đó sinh vật đây vă câc mảnh vụn hữu cơ lă tìm thấy nhiều nhất trong ống tiíu hoâ của câ trưởng thănh. Tuy nhiín, câ sinh sống ở những vùng có độ mặn khâc nhau thì số lượng loăi thức ăn trong ống tiíu hoâ cũng khâc nhau [65].
Bảng 1.8. Danh sâch câc loại thức ăn được tìm thấy trong ống tiíu hoâ câ Nđu vă giâ
trị chỉ số tầm quan trọng tương đối (index of relative importance (IRI) value).
Loại thức ăn
Ấu trùng Câ giống Câ trưởng
thănh Vùng độ mặn cao Vùng độ mặn thấp Vùng độ mặn cao Vùng độ mặn thấp Vùng độ mặn cao Vùng độ mặn thấp Cyanophyceae 3221 4692 3791 3350 2311 3624 Chlorophyceae - 0.38 0.001 3.7 24.4 - Eluglenophyceae 0.03 0.013 - - - - Bacillariophyceae 10265 9243 9622 11272 10610 8240 Dinophyceae 3.4 6.5 1.4 1.5 - - Dictyochophyceae - 0.003 - - - - Nguyín sinh động vật (Protozoa) 1270 1316 874 896 633 650 Thực vật phù du (Zooplankton) 819 817 1002 1060 1295 267 Sinh vật đây (Benthos) 64.3 71.2 117 86.4 272 514
Côn trùng (Insect) - - 0.647 0.083 - 0.07
Mảnh vụn (Debris) 390 801 2403 1346 5354 16.1 (Nguồn: Wongchinawit vă ctv, 2009) [66] Theo Nguyễn Xuđn Đồng (2012), câ Nđu lă loăi câ có thể sống trong môi trường nước ngọt, lợ vă mặn. Câ Nđu lă loăi câ ăn tạp, thức ăn tương đối đa dạng bao gồm cả động vật vă thực vật vă cả mùn bê hữu cơ. Tuy nhiín, dựa trín tần suất gặp thức ăn trong ống tiíu hóa thì thức ăn động vật chiếm số lượng nhiều hơn [2].
Bảng 1.9. Tần số xuất hiện thức ăn trong ống tiíu hoâ câ nđu Stt Thănh phần thức ăn Tần số bắt gặp Ít Nhiều Rất nhiều 1 Rotifera X 2 Ấu trùng câ X
3 Giâp xâc (tôm, câ, cua) X 4 Hai mênh vỏ X 5 Thđn mềm (ốc) X 6 Mùn bả hữu cơ X 7 Nereis X 8 Câ nhỏ X 9 Thực vật thuỷ sinh X
(Nguồn: Nguyễn Xuđn Đồng, 2012)[2]. Theo Nguyễn Thanh Phương vă ctv (2004), nghiín cứu đặc điểm sinh học dinh dưỡng câ Nđu phđn bố tại huyện Ngọc Hiển, tỉnh Că Mau cho kết quả: (i) Câ Nđu có miệng nhỏ, rạch miệng nằm ngang vă ngắn; môi co duỗi được; răng nhỏ vă mịn; câ có bốn đôi cung mang vă mỗi cung mang có hai hăng lược mang; măng mang hẹp vă liền với eo mang; thực quản câ nhỏ vă ngắn; dạ dăy nhỏ, vâch mỏng, mặt trong có nhiều nếp gấp; ruột nhỏ, vâch mỏng vă cuộn tròn. Tỷ lệ giữa chiều dăi ruột vă chiều dăi thđn câ lă 2,88, cho thấy rằng câ Nđu có thuộc tính ăn tạp; (ii)Thức ăn mùn bê hữu cơ chiếm 97,75%, câc loăi tảo chiếm 2,25%. Trong câc loăi tảo, câ Nđu sử dụng câc loăi
Coscinodiscus, Nitzchia, Lygbia, Closteria vă Navicula chiếm ưu thế. Khi phđn tích phât hiện thấy ở đầu ống tiíu hóa câc tế băo tảo chứa đầy nguyín sinh chất nhưng khi phđn tích ở phần ruột sau thì hầu hết chỉ còn vỏ tảo; đối với câc loăi tảo sợi thì câc tế băo tảo bị biến đổi vă hầu như lực liín kết giữa chúng hết sức lỏng lẻo điều năy cho thấy khẩu phần thực vật được câ tiíu hóa tốt [19].
Chiều dăi ống tiíu hoâ của câ Nđu dao động trong khoảng từ 290 - 420mm, trung bình lă 274,63 ± 62,63mm ứng với kích thước dao động trong khoảng từ 119 - 130mm, trung bình lă 123,20 ± 4,38mm. Với chiều dăi cơ thể vă chiều dăi ống tiíu
hoâ như trín thì tỷ lệ% giữa chiều dăi ống tiíu hoâ so với chiều dăi cơ thể dao động trong khoảng từ 223,08 - 352,94%, trung bình lă 274,63 ± 55,33%. Như vậy, câ Nđu lă loăi câ có ống tiíu hoâ khâ dăi (Nguyễn Xuđn Đồng, 2012) [2].
Theo Dương Thị Nga (2009), khi phđn tích ống tiíu hóa của câ Nđu, câc ngănh tảo chiếm ưu thế hơn về số lượng loăi chiếm tới 61,54%, động vật chiếm 38,46%. Điều năy cho thấy câ Nđu thích ăn thực vật hơn động vật. Tuy nhiín, thănh phần thức ăn trong ống tiíu hóa của câ Nđu còn phụ thuộc văo từng giai đoạn phât triển vă kích cỡ của câ. Nhóm câ có kích thước L ≤ 76mm, có phổ thức ăn hẹp nhất gồm gồm 12 loăi, chiếm 18,5% so với tổng số. Nhóm câ có kích thước từ 17 - 153mm, có phổ thức ăn gồm 15 loại, chiếm 21%. Nhóm câ có kích thước từ 154 - 230mm có phổ thức ăn gồm 17 loại, chiếm 27,7% vă nhóm có kích thước từ 231mm trở lín gồm 18 loại chiếm 30% so với tổng số [16].
Nguyễn Tiến Triển vă ctv (2012)cũng đê chỉ ra rằng câ Nđu lă loăi ăn tạp, thức ăn của câ Nđu lă tảo Enteromorpha, tảo Chaetomorpha, tảo Silic, tảo
Euglenophyta. Trong đó,Chaetomorpha không chỉ có tần số xuất hiện cao mă còn chiếm số lượng lớn trong ống tiíu hóa. Theo Chang (1997), thức ăn cho ấu trùng trong những ngăy đầu mới nở lă rotifer (Branchionus), sau 9 ngăy câ có thể ăn được ấu trùng Artemia vă sau 19 ngăy câ có thể sử dụng được giâp xâc chđn chỉo Copepoda. Theo Nikolsky (1963), thì những loăi câ ăn thiín về động vật có tỷ lệ chiều dăi ruột/chiều dăi thđn ≤ 1, câ ăn tạp có tỷ lệ chiều dăi ruột trín chiều dăi thđn lă 1:3, vă câ ăn thiín về thực vật có tỷ lệ chiều dăi ruột trín chiều dăi thđn lă ≥3 (Nguyễn Thị Thanh Thủy, 2014) [20].
Võ Thănh Tiếm (2004) đê chỉ ra rằng câ Nđu thuộc loại ăn tạp thiín về thực vật vì câ có tỷ lệ chiều dăi ruột/chiều dăi thđn lă 2,88. Kết quả phđn tích thănh phần thức ăn tự nhiín trong ống tiíu hóa câ Nđu trưởng thănh đê cho thấy thức ăn lă mùn bê hữu cơ chiếm 97,8%, câc loăi tảo chiếm 2,25% [19].
CHƯƠNG 2. NỘI DUNG VĂ PHƯƠNG PHÂP NGHIÍN CỨU 2.1. Thời gian vă địa điểm nghiín cứu
Thời gian nghiín cứu: Từ ngăy 1/1/2015 – 1/5/2015
Địa điểm nghiín cứu: Trung tđm nghiín cứu vă thực hănh NTTS – Viện Nghiín Cứa vă Phât Triển – Trường Đại học Nông Lđm Huế.
2.2. Nội dung nghiín cứu vă câc kết quả đạt được
1) Theo dõi biến động của câc yếu tố môi trường trong quâ trình nuôi thí nghiệm
Câc chỉ tiíu theo dõi bao gồm: Nhiệt độ, pH, DO, NH3/NH4+, độ mặn. 2) Xâc định câc mức lysine tối ưu trong khẩu phần thức ăn cho câ, dựa văo:
Tỷ lệ sống
Tốc độ tăng trưởng
Hệ số chuyển đổi thức ăn (FCR) Hiệu quả sử dụng protein (PER).
2.3. Phương phâp nghiín cứu
1) Bố trí thí nghiệm
Thí nghiệm gồm 5nghiệm thức, tương ứng với 5 mức lysine: 35, 40, 45, 50, 55 g/kg protein thô (CP), mỗi nghiệm thức được bố trí lặp lại 3 lần.
Thí nghiệm được tiến hănh trong 8 tuần. Câc nghiệm thức được bố trí theo kiểu hoăn toăn ngẫu nhiín (CRD) với 3 lần lặp lại. Sau khi bốc thăm ngẫu nhiín, câc nghiệm thức được bố trí như bảng 2.1.
Bảng 2.1.Sơ đồ bố trí thí nghiệm Bể 1 Lys 55 Bể 2 Lys 45 Bể 3 Lys 35 Bể 4 Lys 40 Bể 5 Lys 45 Bể 6 Lys 50 Bể 7 Lys 50 Bể 8 Lys 45 Bể 9 Lys 55 Bể 10 Lys 35 Bể 11 Lys 55 Bể 12 Lys 50 Bể 13 Lys 35 Bể 14 Lys 45 Bể 15 Lys 40
2) Cơ sở khoa học để xđy dựng khẩu phần thức ăn với mức lysine trong thí nghiệm
Để xâc định nhu cầu acid amin thiết yếu ở câ người ta thông thường căn cứ văo hăm lượng acid amin phđn tích được từ cơ thể câ (Yan Q vă ctv, 2007) [67]. Trong nghiín cứu năy, nhằm xđy dựng mức lysine hợp lý trong khẩu phần thức ăn cho câ Nđu giống, chúng tôi đê tiến hănh thu mẫu câ vă gửi mẫu đi phđn tích tại phòng Phđn Tích Thức Ăn Gia Súc, Viện Khoa Học Nông Nghiệp Miền Nam.
Phương phâp thu vă gửi mẫu được thực hiện như sau: Câ Nđu giống có khối lượng trung bình dao động từ 7 – 11g/con được thu với số lượng hợp lý, câ được rửa sạch, lấy hết phần nội quan bín trong vă được sấy khô ở nhiệt độ 600C, sau đó nghiền nhỏ vă đóng gói gửi đi phđn tích, trọng lượng của mỗi mẫu gửi đi phđn tích tối thiểu lă 150g.
Kết quả phđn tích hăm lượng lysine trong câ trung bình lă 43,6g lysine/kg CP. Trín cơ sở kết quả thu được, chúng tôi tiến hănh thí nghiệm với sâu mức lysine 35, 40, 45, 50, 55 g/kg protein thô (CP) trong khẩu phần thức ăn cho câ.
3) Chuẩn bị khẩu phần thí nghiệm
Sau khi tiến hănh lựa chọn nguyín liệu sử dụng lăm thức ăn cho câ, chúng tôi tiín hănh phđn tích mẫu để xâc định thănh phần dinh dưỡng vă thănh phần acid amin trong nguyín liệu. Dựa văo kết quả phđn tích chúng tôi sẽ cđn đối khẩu phần bao gồm cđn đối protein vă lượng. Câc khẩu phần có bổ sung hỗn hợp axit amin tinh khiết để đảm bảo cđn đối với acid amin của cơ thể, ngoại trừ sự thay đổi mức lysine.
Khẩu phần thí nghiệm có hăm lượng protein thô CP lă 35% vă năng lượng thô (GE) lă 18,3MJ/kg. Khẩu phần sẽ được phối trộn từ câc nguyín liệu: bột câ, casein, gelatin, dextrin, cellulose, carboxymethyl cellulose, dầu câ, dầu thực vật, hỗn hợp vitamin vă khoâng chất, lysine tổng hợp.
Bảng 2.2.Thănh phần nguyín liệu vă thănh phần hóa học (%VCK) vă năng lượng
(MJ/kg) của câc khẩu phần thí nghiệm
Nguyín liệu
Mức Lysine bổ sung (g lysine/kg protein)
35 40 45 50 55 Casein1 10,0 10,0 10,0 10,0 10,0 Bột câ2 6,5 6,5 6,5 6,5 6,5 Dextrin 38,0 38,0 38,0 38,0 38,0 Gelatin 4,0 4,0 4,0 4,0 4,0 α cellulose 6,5 6,5 6,5 6,5 6,5 Hỗn hợp EAA3 10,0 10,0 10,0 10,0 10,0 Hỗn hợp NEAA4 10,0 9,825 9,65 9,475 9,3 Lysine bổ sung 0 0,175 0,35 0,525 0,7
Hỗn hợp vitamin vă khoâng5 4,0 4,0 4,0 4,0 4,0
Chẩt kết dính 5,0 5,0 5,0 5,0 5,0
Dầu đậu nănh 5,0 5,0 5,0 5,0 5,0
Tổng 100 100 100 100 100
Protein tính toân 35 35 35 35 35 Năng lượng tính toân 18,3 18,3 18,3 18,3 18,3
Chú thích:
1Casein (g/100g): Leucine 9,2; lysine 8,9; valine 6,8; histidine 3,8; isoleucine 5,6; methionine 1,8; threonine 4,4; phenylalanine 5,3; arginine 3,3.
2Bột câ (g/100g): Methionine 1,63; cystine 0,56; lysine 5,31; threonine 2,48; arginine 3,50; isoleucine 2,20; leucine 4,20; valine 2,29; histidin 1,71; tryptophan 0,82.
3Hỗn hợp EAA (g/100g): Arginine 1,658; histidine 0,392; isoleucine 2,262; leucine 1,072; lysine variable, methionine 1,086; phenylalanine 1,648; threonine 1,092; tryptophan 0,472; valine 1,770.
4Hỗn hợp NEEA (g/100g): cystine 0,896; tyrosine 0,980; alanine 1,420; aspartic acid 0,144.
5Vitamin vă khoâng: vitamin A, 4.000.000UI; vitamin D3, 800.000UI; vitamin E, 8.500UI; vitamin K3, 750UI; vitamin B1, 375UI; vitamin C, 8.750UI; vitamin B2, 1.600mg; vitamin B6, 750mg; folic acid, 200mg; vitamin B12, 3.000mcg; biotin, 20.000mcg; methionine, 2.500mg; Mn, Zn, Mg, K vă Na, 10mg.
* Lăm thức ăn viín
Chất có hăm lượng lớn trong khẩu phần như bột câ, casein, cellulose, dextrin được phối trộn cùng nhau.Câc chất bổ sung có khối lượng nhỏ như vitamin, khoâng chất, dầu được phối trộn với nhau.Trôn lysine văo trộn đều với hai hỗn hợp trín.Chất kết dính được hồ hóa, sau đó trộn đều với hỗn hợp trín nhằm tạo độ kết dính cho thức ăn khi đùn viín.
Sau đó thức ăn được đùn thănh viín bằng mây tạo viín thức ăn, kích thước mắt lưới 3mm, thức ăn được sấy khô ở điều kiện nhiệt độ 600C vă bảo quản lạnh 40C cho đến khi sử dụng.
4) Câ giống
Câ giống được mua ở 2 địa điểm lă: thôn Tđn An, thị trấn Thuận An, huyện Phú Vang vă xê Vinh Hiền, huyện Phú Vang, Thừa Thiín Huế. Câ giống thí nghiệm có khối lượng 7-11 g/con, chiều dăi 5-7 cm/con. Câ được vận chuyển về phòng thí nghiệm vă nuôi trong bể composite 3 tuần trước khi đưa văo thí nghiệm.
Trong thời gian nuôi thích nghi, câ được cho ăn thức ăn viín công nghiệp
(GreenFeed) trong hai tuần đầu, sau đó chuyển sang cho ăn bằng thức ăn phối trộn theo nghiệm thức nghiín cứu trong tuần thứ ba. Câ được cho ăn 2 lần/ngăy với lượng thức ăn bằng 5% trọng lượng thđn. Sau 3 tuần nuôi thích nghi, câ được thả ngẫu nhiín văo từng bể thí nghiệm với mật độ 20 con/bể.
5) Hệ thống bể nuôi
Thí nghiệm được tiến hănh trong một hệ thống bể thí nghiệm bao gồm 15 bể compusite có thể tích 4 m3, chứa 3,5 m3 nước. Ngoăi ra, còn có hệ thống bể chứa, bể lắng, bể khử clorine, mây sục khí, mây bơm nước, mây lọc nước tuần hoăn, hệ thống điện, hệ thống nước ngọt.
6) Chăm sóc câ
Trong thời gian thí nghiệm cho ăn ngăy 2 lần: sâng (8h)vă chiều (16h) với lượng thức ăn 5% trọng lượng thđn.
thức ăn trong mỗi ngăy. Tiến hănh xi phông lượng thức ăn dư thừa nếu có.
Câc yếu tố môi trường lă nhiệt độ, độ mặn, pH, DO, NH3/NH4+được kiểm tra 2 lần/tuần.
7)Câc chỉ tiíu theo dõi
* Câc yếu tố môi trường: nhiệt độ, pH, DO, NH3/NH4+, độ mặn được đo 2 lần/tuần.
* Tỷ lệ sống: Xâc định số lượng câ đầu thí nghiệm vă số lượng câ sau khi kết thúc thí nghiệm.
* Tốc độ tăng trưởng: Câ thí nghiệm được đo chiều dăi vă trọng lượng văo lúc bắt đầu thí nghiệm vă lúc kết thúc thí nghiệm.
Chiều dăi xâc định bằng thước đo chiều dăi độ chính xâc đến mm. Trọng lương xâc định bằng cđn điện tử độ chính xâc 0,1g
* Lượng thức ăn câ sử dụng: Tính lượng thức ăn hăng ngăy vă lượng thức ăn cả đợt nuôi thí nghiệm.
8) Công thức tính toân
- Tốc độ tăng trưởng (weight gain, MWG, %):
WG(%)=W-2-W1
W1 x 100
- Tốc độ tăng trưởng đặc biệt (Specific growth rate, SGR, %/ngăy)
SGR (%/ngăy)=ln(W2)-ln(W1)
t2-t1 x 100 Trong đó:
W1: Khối lượng trung bình tại thời điểm t1 W2: Khối lượng trung bình tại thời điểm t2 t2 – t1: Khoảng thời gian khảo sât
- Tỷ lệ sống (TLS, %)
TLS(%)=Tổng số câ kết thúc thí nghiệm Tổng số câ ban đầu thí nghiệm×100 - Hệ số chuyển đổi thức ăn (FCR)
FCR= Lượng thức ăn câ sử dụng (kg)
- Hiệu quả sử dụng protein (PER)
PER= Tăng trọng của câ (g) Lượng protein tiíu thụ (g)
9) Phương phâp xử lý số liệu
Số liệu về sinh trưởng (tốc độ tăng trưởng, tốc độ tăng trưởng đặc biệt), hệ số chuyển đổi thức ăn, hiệu quả sử dụng protein, tỷ lệ sống, được xử lý bằng phần mềm Excel 2007, phđn tích phương sai (ANOVA) bằng phần mềm SPSS 16.0, so sânh sự sai khâc giữa câc nghiệm thức bằng phương phâp Tukey với khoảng tin cậy 95%.
Nhu cầu lysine của câ được xâc định theo phương phâp đường cong hồi quy bậc hai.
* Phương phâp sử dụng đường cong hồi quy bậc hai
Tốc độ tăng trưởng vă hăm lượng protein trong thức ăn lă tương quan bậc hai theo phương trình Y = aX2 + bX + c; đồ thị của phương trình lă dạng parabol bậc hai có giâ trị cực đại duy nhất. Tại điểm cực đại được xem như mức dinh dưỡng tối đa cho tốc độ tăng trưởng tối đa .
Tuy nhiín, sau khi đạt được tốc độ tăng trưởng tối đa thì đường cong biểu