vàng tại Huyện Ba Chẽ, Tỉnh Quảng Ninh.
Phương pháp giám định tác nhân gây hại
Hoạt động chẩn đoán, giám định tên khoa học của các đối tượng dịch hại trên cây Trà hoa vàng sẽ được tiến hành tại Viện Bảo vệ thực vật bằng các phương pháp sau:
- Bằng phương pháp hình thái học: Các loài bệnh hại sẽ được giám định theo phương pháp hình thái học dựa trên các tài liệu tùy thuộc vào từng nhóm đối tượng dịch hại như: Barnett and Hunter, 1998; Bradbury, 1986; Burgess et al., 1994; Crous and Braun, 2003; Cummins and Hiratsuka, 1996; Drenth and Guesrt, 2004; Ellis, 1971, 1976; Roger 1954; Robert and Gunnell, 1992; Williams và Watson 1988, 1990; Watson, 2007, Williams 2004; Waterhouse, 1968; Đặng Vũ Thị Thanh và Hà Minh Trung, 1999, 2001b; Nguyễn Vũ Thanh và cộng sự, 1983; Nguyễn Vũ Thanh, 2002; Truong et al., 2008, 2010, v.v.
- Phương pháp xác định tác nhân gây bệnh (theo phương pháp của Burgess và cộng sự, 2008): Thu các mẫu có triệu chứng điển hình từ các vùng trồng Trà hoa vàng đem về phòng thí nghiệm, mẫu được rửa sạch, các bộ phân thân gốc bị bệnh được cắt thành các miếng nhỏ được khử trùng bằng ethanol và rửa sạch bằng nước vô trùng, cấy lên môi trường PDA, sau đó cấy truyền sang môi trường WA và PDA. Nấm được giám định dựa vào các đặc điểm hình thái, theo khóa phân loại của Domsch và cộng sự (2008).
- Lây nhiễm nhân tạo: Phân lập nuôi cấy vi sinh vật từ các mẫu cây Trà hoa vàng bị bệnh. Sử dụng các nguồn vi sinh vật đã phân lập được lây nhiễm cho cây con Trà hoa vàng khỏe. Thí nghiệm lây bệnh thực hiện trong nhà lưới của Viện Bảo vệ thực vật, mỗi một công thức là 50 cây. Tiến hành tưới vào gốc dung dịch 5 × 106 bào tử/ml cho 1 chậu, công thức đối chứng được lây bệnh bằng nước cất. Chăm sóc và theo dõi thí nghiệm hàng ngày, ghi nhận sự xuất hiện triệu chứng biểu hiện sau khi lây nhiễm nhân tạo 5, 10, 15, 20, 25 và 30 ngày. So sánh triệu chứng bệnh xuất hiện trong các công thức lây bệnh với triệu chứng bệnh thu thập được từ ngoài tự nhiên. Tái phân lập vi sinh vật từ cây biểu hiện triệu chứng bệnh và so sánh với vi sinh vật đã sử dụng lây nhiễm nhân tạo.