II. THỰC HÀNH 1 Dụng cụ, hóa chất, thuốc thử
DƯỢC LIỆU CHỨA TANIN
Mục tiêu
Sau khi thực hành, sinh viên phải:
- Thực hiện được các phản ứng định tính chung của tanin trong dược liệu. - Phân biệt được 2 loại tanin bằng các phản ứng hóa học.
- Định lượng được tanin trong dược liệu bằng phương pháp oxy hóa với KmnO4.
I. CƠ SỞ LÝ THUYẾT
Tanin (tannin, taninoid) là những hợp chất polyphenol phức tạp, có nguồn gôc thực vật, có vị chát và có tính thuộc da.
Dựa vào cấu trúc hóa học, người ta xếp tanin vào 2 nhóm chính: - Tanin thủy phân được (tanin pyrogallic)
- Tanin không thủy phân được (tanin ngưng tụ, tanin pyrocatechic) Tanin dễ tan trong kiềm loãng, trong hỗn hợp cồn nước.
Tanin tan được trong cồn, glycerin, propylen glycol, aceton và ethyl acetat. Tanin không tan trong dung môi kém phân cực.
Tanin tạo tủa với dung dịch nước của protein. Đây là tính chất quan trọng để định tính tanin.
Để phân biệt 2 loại tanin pyrogallic và pyrocatechic có thể dựa vào phản ứng thế và phản ứng ngưng tụ trên nhân thơm của tanin pyrocatechic cũng như sự tạpưo màu sắc khác nhau của cả hai loại tanin với các thuốc thử FeCl3, thuốc thử Stiassny, nước Brom…
Có nhiều phương pháp định lượng tanin, như phương pháp chuẩn độ thể tích, phương pháp đo màu… DĐVN IV quy định dùng phương pháp bột da để định lượng tanin trong dược liệu.
II. THỰC HÀNH
A.Nguyên vật liệu thí nghiệm 1.Hóa chất, thuốc thử
- Dung dịch gelatin muối 1% - Thuốc thử stiasny
- Dung dịch FeCl3 1% - Dung dịch chì acetat - Dung dịch KMnO4 0.1 N - Chỉ thị màu sulfo indigo. - Nước brom
2.Cách pha một số thuốc thử
2.1. Dung dịch gelatin – muối
Dung dịch gelatin 1% trong nước muối 10%.
2.2. Thuốc thử Stiasny: Dung dịch formol – HCl đậm đặc (2:1), pha khi dùng. dùng.
2.3. Chỉ thị sulfo indigo: Hòa tan 1 g carmin indigo trong 25 ml acid sulfuric đậm đặc. (TT). Thêm 25 ml acid sulfuric đậm đặc nữa. Sau đó pha sulfuric đậm đặc. (TT). Thêm 25 ml acid sulfuric đậm đặc nữa. Sau đó pha vào nước đến vừa đủ 1000 ml.
3.Dược liệu
- Ngũ bỗi tử
- Lá ổi (Psidium guajava L., Myrtaceae)
B. Phương pháp tiến hành1. Chiết xuất 1. Chiết xuất
Lấy 1g bột dược liệu cho vào erlen 50ml, thêm 30ml nước sôi, đun trên bế cách thủy sôi 10 phút, lắc đều khi đun. Lọc nóng lấy dịch lọc trong. Chiết tiếp bã dược liệu lần 2 với 10ml nước, nếu cần.
Dịch lọc thu được dùng làm các phản ứng định tính tanin.