CHƢƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.2. CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT PULLULAN TRÊN THẾ GIỚI
1.2.4. Phƣơng pháp tinh sạch và thu hồi pullulan
Một số tác giả sử dụng phƣơng pháp sau để thu hồi pullulan sau quá trình lên men bởi chủng A.pullulans: Dịch lên men nhận đƣợc chứa pullulan đƣợc ly tâm để tách tế bào nấm mốc, tẩy màu. Sau đó pullulan đƣợc tách ra bằng phƣơng pháp kết tủa pullulan bởi dung môi methanol, etanol, axeton.
Tuy nhiên với phƣơng pháp này pullulan nhận đƣợc vẫn chứa 40-60% nƣớc, thậm chí cả dung mơi bổ sung vào, ngồi ra cịn chứa một lƣợng tạp chất đƣờng, tri-, di-, monosaccharide, các chất vô cơ, protein, chất màu. Các chất này tồn tại trong kết tủa pullulan khó tách ra và làm sạch, đặc biệt lƣợng nƣớc lớn nằm trong khối bầy nhầy, rất khó để xử lý nhiệt. Các phƣơng pháp này đòi hỏi bổ sung một lƣợng rất lớn các dung môi hữu cơ, thƣờng gấp từ hai đến ba lần thể tích dịch lên men. Mặc dù các dung mơi có thể thu hồi bằng chƣng cất nhƣng đó vẫn là một bất lợi trong chi phí sản xuất. Việc bổ sung methanol gấp khoảng ba lần thể tích dịch lên men cho kết tủa pullulan dễ dàng và gần nhƣ hoàn toàn đƣợc ghi nhận.
Các sắc tố hiện diện trong dung dịch lên men đƣợc hấp phụ vào và kết tủa với pullulan gây khó khăn cho việc tẩy màu pullulan này. Hơn nữa, ngay cả bổ sung than hoạt tính hoặc H2O2 để tẩy màu trƣớc khi lọc cũng rất khó vì dịch lên men có độ nhớt cao, do đó địi hỏi phải pha lỗng đến mức độ nào đó. Hiện nay chƣa có tài liệu nào nói về tỷ lệ than hoạt tính hoặc H2O2 cần
thiết trong quá trình tẩy màu. Tuy nhiên trong sản xuất maltodextrin, có nguồn gốc từ tinh bột nhƣ pullulan thì đều đƣợc tẩy màu bằng than hoạt tính hoặc H2O2 ở 800C, thời gian từ 20-30 phút. Dịch đƣờng fructose thu hồi đƣợc sau q trình đƣờng hóa đƣợc tẩy màu bằng than hoạt tính hoặc H2O2 ở 800C trong thời gian 30 phút rồi lọc bằng máy lọc chân không là các kinh nghiệm tốt khi áp dụng trong việc tinh sạch và thu nhận pullulan.
Hình 1.7 sau đây thể hiện quy trình tinh sạch và thu nhận pullulan của dự án SXTN “Hồn thiện cơng nghệ sản xuất pullulan và ứng dụng trong
sản xuất một số sản phẩm thực phẩm” của Viện Hóa học các hợp chất thiên
Hình 1.7: Sơ đồ khối quy trình tinh sạch và thu nhận pullulan Lên men Lên men Tách sinh khối Tẩy màu Lọc Kết tủa Lọc Hòa tan Lọc Sấy phun Pullulan Sinh khối C hoạt tính/H2O2 Ethanol Nƣớc