Chương 2 Vật liệu và Phương pháp nghiên cứu
2.1. Vật liệu sử dụng trong nghiên cứu
2.1.1. Nguyên liệu sử dụng trong nghiên cứu
Trong nghiên cứu này, mẫu cây Sâm Đá được thu nhận tại các mơ hình ni trồng cây giống trên địa bàn huyện Kbang, Tỉnh Gia Lai. Mẫu cây Sâm Đá bao gồm thân, lá, củ, hoa được thu thập trong tự nhiên nhằm phục vụ cho việc định danh. Mẫu thân rễ và củ của cây Sâm Đá được thu thập trên địa bàn huyện Kbang tại hai khu vực phân bố khác nhau.
Các mẫu cây Sâm Đá thu nhận được phân loại, định danh tại Phịng thí nghiệm CNSH Thực vật trọng điểm phía Nam, Viện Sinh học Nhiệt đới. Mẫu tiêu bản được lưu giữ tại Viện Sinh học Nhiệt đới. Mẫu nguyên liệu được rửa sạch, cắt nhỏ, sấy khô và tán tạo bột mịn. Bột cây Sâm đá được kiểm tra độ ẩm và phân tích sơ bộ về thành phần hóa học
Địa điểm nghiên cứu và lấy mẫu: huyện KBang, tỉnh Gia Lai Thời gian: 2 đợt điều tra vào tháng 3/2019 và tháng 11/2020.
2.1.2. Các dòng tế bào sử dụng trong nghiên cứu
Dòng tế bào ung thư gan người HepG2 được cung cấp bởi viện nuôi cấy tế bào Hoa Kỳ (American Type Culture Collection – ATCC, Mã số: HB8065)
Dòng tế bào ung thư da người A375 được cung cấp bởi viện nuôi cấy tế bào Hoa Kỳ (American Type Culture Collection – ATCC, Mã số: CRL-1619)
Dòng tế bào ung thư vú người BT474 được cung cấp bởi ATCC (Mã số: HTB-20).
Dòng tế bào ung thư đại trực tràng Caco2 được cung cấp bởi ATCC (Mã số: HTB-37)
Dịng tế bào nội mơ người HUVEC được cung cấp bởi ATCC (Mã số: CRL-1730)
Dòng nguyên bào sợi người WS1 được cung cấp bởi ATCC (Mã số: CRL-1502).
2.1.3. Các bộ kit sử dụng trong nghiên cứu
Bộ kit phân tích sự tăng sinh của tế bào (WST-1 cell proliferation kit, 05015944001, Roche, Thụy Sĩ).
Bộ kit kiểm tra tạp nhiễm Mycoplasma (e-Myco™ plus Mycoplasma PCR Detection Kit, 25237, Intron Biotechnology, Hàn Quốc).
Bộ kit phân tích apoptosis tế bào (Annexin V-FITC Apoptosis Detection kit, APOAF-50TST, Sigma-Aldrich, Hoa Kỳ).
2.1.4. Các mơi trường và hóa chất dùng trong nghiên cứu
Môi trường DMEM/F12 (11320-033, Gibco Life Technologies, Hoa Kỳ).
Môi trường EGM-2 (CC-3156, Lonza, Hoa Kỳ)
Huyết thanh thai bò đã bất hoạt (Fetal Bovine Serum, 10082147, Gibco Life Technologies, Hoa Kỳ).
Dung dịch Trypsin/EDTA (25200-072, Gibco Life Technologies, Hoa Kỳ).
Kháng sinh Penicillin-Streptomycin (15140-122, Life Technologies, Hoa Kỳ).
Dung dịch FACSFlow Sheath Fluid (342003, BD Bioscience, Hoa Kỳ) Thuốc nhuộm nhân DAPI (D9542, Sigma Aldrich, Hoa Kỳ)
Dung dịch Crystal Violet (V5265, Sigma Aldrich, Hoa Kỳ) Dung môi Ethanol (Labscan, Hàn Quốc)
2.1.5. Các thiết bị dụng cụ dùng trong nghiên cứu (tham khảo phụ lục) lục)