Chương 2 Vật liệu và Phương pháp nghiên cứu
2.2. Phương pháp nghiên cứu
2.2.2. Phương pháp phân tích sơ bộ các hợp chất trong cao chiết
Phân tích tinh khiết: Độ tinh khiết của bột dược liệu được xác định các chi tiêu gồm: độ ẩm, độ tro và chất chiết trong bột dược liệu. Xác định độ ẩm bằng cách xác định khối lượng mất do làm khô bằng Máy hoặc xác định độ ẩm bằng cân hồng ngoại, xác định độ tro bằng cách cân dược liệu, xác định chất chiết được trong dược liệu bằng cách tiến hành theo phương pháp chiết nóng dùng dung mơi là nước và ethanol 96!. Các nhóm chất hóa học thường gặp trong cao chiết của bột dược liệu được định tính bằng các phản ứng hóa học đặc trưng. Các phản ứng hóa học đặc trưng để xác định các nhóm hợp chất trong từng loại dịch chiết (Bảng 2.3).
Bảng 2.3. Các thuốc thử dùng để phân tích sơ bộ thành phần hóa học Nhóm hợp chất Cách thực hiện Phản ứng dương tính
Chất béo Nhỏ dd lên giấy Vết trong mờ Carotenoid Carr – Price
H2SO4
Xanh chuyển sang đỏ Xanh dương hay xanh lục Alkaloid Thuốc thử chung
alkaloid
Kết tủa
Courmarin Phát quang / kiềm Phát quang mạnh hơn
Antraglycosid NaOH 10% Dd kiềm có màu hồng tới đỏ Flavonoid Mg/HCl đđ Dd có màu hồng tới đỏ
Tanin Dd FeCl3 Xanh rêu hay xanh đen (polyphenol)
Anthocyanidin HCl/NaOH Đỏ/Xanh Proanthocyanidin HCl/to Đỏ
Triterpenoid tự do Lierbermann- Burchard
Vịng đỏ nâu tím, lớp trên màu xanh lục
Saponin Lắc mạnh/H2O Bọt bền Acid hữu cơ Tinh thể Na2CO3 Sủi bọt Chất khử TT Fehling Tủa đỏ gạch
Chỉ tiêu đánh giá: Quan sát hiện tượng màu sắc trước và sau phản ứng để ghi nhận có hoặc khơng có các hợp chất tự nhiên trong cao chiết