謂pj"j逢荏 ng c栄a t益 l羽 Mg/Al

Một phần của tài liệu Nghiên cứu cố định enzyme lipase porcine pancreas trên chất mang hydrotalcite mg AlCO3 2 (Trang 66 - 99)

L 云 IM 雲 A井 U

3.2.1. 謂pj"j逢荏 ng c栄a t益 l羽 Mg/Al

違nh h逢荏ng 8院n hi羽u su医t c嘘 8鵜nh lipase [12]. Trong nghiên c泳u này, enzyme PPL

8逢嬰c c嘘 8鵜nh lên v壱t li羽u v噂i t益 l羽 mol Mg/Al l亥p"n逢嬰t là 2:1; 3:1; 4:1, ttqpi"8k隠u ki羽n pH 7.5; nhi羽v"8瓜: 30oC; th運i gian c嘘 8鵜nh 6 gi運; t嘘e"8瓜 l逸c: 300 v/p="n逢嬰ng enzym PPL dùng cho m厩i m磯u<"302"oi"*v逢挨pi"泳pi"x噂k"185.25 UI/g enzyme+="n逢嬰ng ch医t mang: 0.1 g.

B違ng 3.5. 謂pj"j逢荏ng c栄a t益 l羽 mol Mg/Al lên hi羽u su医t c嘘8鵜nh theo kh嘘k"n逢嬰ng và theo ho衣t tính V壱t li羽u T益 l羽 mol Mg/Al Hi羽u su医t theo kh嘘i n逢嬰ng protein(1) (%) Hi羽u su医t tính theo ho衣t tính(2) (%) LDHs 1 2:1 79.155±0.96a 65.015±0.94a LDHs 2 3:1 70.023±0.29b 59.41±1.85b LDHs 3 4:1 64.738±0.17c 36.229±0.38c Ghi chú:

(1): Hiうu suXt tính dばa trên khぐk"n⇔ぢng protein cịn lTi cてa dung dおch sau khi cぐ 8おnh

(2): Hiうu suXt cぐ8おnh protein tính trên hoTt tính cてa enzyme tば do cĩ trong dおch rぬa sau khi cぐ8おnh.

Trong cùng mじt cじt, các chの cái a, b, c, d, e, f thあ hiうn sば khác biうt cĩ ý ngh c"cてa các giá trおぞ g"?"20270

Hi羽u su医t c嘘 8鵜pj"8衣v"8逢嬰c cao nh医t (79% theo kh嘘k"n逢嬰ng và 65% theo ho衣t tính riêng) khi c嘘 8鵜nh enzyme PPL trên LDHs Mg/Al-CO32- 8ã nung 荏 4500C t益 l羽

mol 2:1. Khi c嘘 8鵜nh trên LDHs Mg/Al-CO32- t益 l羽 mol 3:1 hi羽u su医t cịn 70% tính theo kh嘘k" n逢嬰ng protein và 59% theo ho衣t tính riêng c栄a enzyme. Cu嘘i cùng là LDHs v噂i t益 l羽 mol Mg/Al là 4:1 v噂i hi羽u su医t c嘘8鵜pj"8衣t kho違ng 64% theo protein và hi羽u su医t tính theo ho衣t tính riêng c栄a enzyme ch雨 cịn 36%.

Trong c違 dc"vt逢運ng h嬰p, hi羽u su医t tính trên kh嘘k"n逢嬰pi"rtqvgkp"nw»p"ecq"j挨p"

ph亥n hi羽u su医t tính trên ho衣t tính riêng c栄a enzyme. Nguyên nhân là do khơng ph違i t医t c違 các protein h医p ph映 trên b隠 m員t ch医v"ocpi"8隠u là c栄a PPL. Ch院 ph育m enzyme do nhà s違n xu医t cung c医p cịn l磯n khá nhi隠u protein t衣p, các protein này cĩ th吋 h医p ph映 c衣nh tranh v噂i protein PPL trong quá trình c嘘8鵜nh.

Ch医t mang cĩ 3 t益 l羽 kim lo衣i khác nhau c pi"ejq"jk羽u su医t c嘘8鵜nh khác nhau,

8k隠u này cĩ th吋 do s詠 khác nhau c栄a 8k羽n tích b隠 m員t c栄a lo衣i v壱t li羽u này. 雲 LDHs cĩ t益 l羽 kim lo衣i Mg/Al là 2:1, l噂r"8k羽p"v ej"f逢挨pi"vt‒p"d隠 m員t ch医t mang l噂p"j挨p"

l噂r"8k羽n tích f逢挨pi"c栄a hai v壱t li羽u cịn l衣i do LDHs 2:1 ion Al3+ chi院m 1/2 so v噂i ion Mg2+. Trong khi hai v壱t li羽u cịn l衣i t益 l羽 Al3+ ch雨 chi院m 1/3 hay 1/4 so v噂i ion Mg2+ .

M磯u v壱t li羽w"e„"j o"n逢嬰ng Al càng cao thì giá tr鵜 pHpzc càng l噂n do m厩i ion Al3+ thay th院 vào các v鵜 trí c栄a m厩i ion Mg2+ n o"f逢"o瓜v"8k羽p"v ej"f逢挨pi."f磯p"8院n b隠 m員v"v ej"8k羽p"f逢挨pi"nhi隠u j挨p"uq"x噂i m磯u cĩ t益 l羽 Al3+ th医p.

K院t qu違 này c pi" v逢挨pi" v詠 pj逢" m院t qu違 nghiên c泳u c栄a tác gi違 sau: Ren Lingling và c瓜ng s詠 (2001) c嘘 8鵜nh enzyme Penicillin G acylase lên LDHs Zn/Al

v噂i các t益 l羽 2.0; 3.0 và 4.0. K院t qu違 cho th医y hi羽u su医t c嘘8鵜nh gi違m d亥p"mjk"v<pi"v益

l羽 Zn/Al. C映 th吋: hi羽u su医t c嘘 8鵜pj"8嘘i v噂i t益 l羽 2.0; 3.0 và 4.0 l亥p"n逢嬰t là: 99.4%; 96.7% và 88.2% [17].

T瑛 k院t qu違 vjw"8逢嬰c cho th医y ch医t mang LDHs v噂i t益 l羽 mol 2:1 phù h嬰r"8吋

ti院n hành c嘘 8鵜nh enzyme PPL nên ch丑n t益 l羽 mol này cho các thí nghi羽m c嘘 8鵜nh

8逢嬰c th詠c hi羽n trong nghiên c泳u.

3.2.2. 謂pj"j逢荏ng c栄a n欝pi"8瓜 enzyme lên hi羽u su医t c嘘8鵜nh

Th詠c hi羽n c嘘8鵜nh enzyme lên ch医t mang Mg/Al – CO32- sau nung 4500C. T益 l羽

kim lo衣i 2:1. Vtqpi"8k隠u ki羽n pH 7.5; nhi羽v"8瓜: 30oC; th運i gian c嘘8鵜nh 6 gi運; t嘘e"8瓜

l逸c: 300 v1r="n逢嬰ng ch医t mang: 0.1 g.

B違ng 3.6. 謂pj"j逢荏ng c栄a n欝pi"8瓜 enzyme lên hi羽u su医t c嘘8鵜nh

N欝ng 8瓜 enzyme (mg/ml) Hi羽u su医t theo kh嘘i n逢嬰ng protein(1) (%) Hi羽u su医t tính theo ho衣t tính(2) (%) 1.0 84.749±1.81b 65.539±0.42a 1.5 93.549±1.37a 74.235±00b 2.0 67.443±0.55de 29.939±1.56c 2.5 65.834±1.237 26.868±0.22d 3.0 78.574±0.64c 19.54±1.12e 3.5 71.646±1.67d 16.382±0f 4.0 66.669±1.44de 16.287±0.89f Ghi chú:

(1): Hiうu suXt tính theo khぐk"n⇔ぢng protein cịn lTi cてa dung dおch sau khi cぐ8おnh (2): Hiうu suXt cぐ 8おnh protein tính trên hoTt tính riêng cてa enzyme tば do cĩ trong dおch rぬa sau khi cぐ8おnh.

Trong cùng mじt cじt, các chの cái a, b, c, d, e, f thあ hiうn sば khác biうt cĩ ý ngh c"cてa các giá trおぞ g"?"2027

T瑛 s嘘 li羽u c栄a b違ng 3.6 mjk"v<pi"p欝pi"8瓜 enzyme t瑛 1 t噂i 1.5 mg/ml thì hi羽u su医t c嘘 8鵜pj"v<pi0"Ucw"8„."vk院p t映e"v<pi"n欝pi"8瓜 thì hi羽u su医t c嘘 8鵜nh enzyme gi違m d亥n khi s穎 d映ng cùng m瓜v"n逢嬰ng ch医t mang là 0.1 g.

Quá trình c嘘8鵜pj"gp¦{og"8逢嬰c th詠c hi羽p"vjgq"e挨"ej院 h医p ph映, vì di羽n tích b隠

m員t ch医t mang (l噂p hydroxides) gi噂i h衣p"p‒p"n逢嬰ng enzyme h医p ph映 n‒p"8„"e pi"

h衣n ch院. Khi n欝ng 8瓜 gp¦{og"v<pi"ecq"o "fk羽n tích h医p ph映 mj»pi"8鰻i thì l逢嬰ng enzyme t詠 do cịn l衣i trong dung d鵜ch c嘘8鵜nh càng nhi隠u, d磯p"8院n hi羽u su医t c嘘 8鵜nh th医r"8欝ng th運i lãng phí enzyme t詠fq0"Pi逢嬰c l衣k."n逢嬰ng enzyme quá ít thì khơng 8栄 8吋 rj¤p"vƒp"8隠u trong dung d鵜ch c嘘 8鵜nh, c pi"pj逢"vk院p xúc v噂i b隠 m員t ch医t mang nên hi羽u su医t c嘘8鵜nh th医p.

Hi羽u su医t c栄a enzyme c嘘8鵜nh 荏 t益 l羽 1.5 là 93% theo kh嘘k"n逢嬰ng protein, 65% theo ho衣t tính và ho衣v"v pj"v逢挨pi"泳ng c栄a enzyme c嘘8鵜nh là 347 UI/g enzyme. V壱y ch丑n n欝pi"8瓜 enzyme 1.5 (mg/ml) làm n欝pi"8瓜 c嘘8鵜nh.

3.2.3. 謂pj"j逢荏ng c栄a pH lên hi羽u su医t c嘘8鵜nh

Th詠c hi羽n c嘘 8鵜nh enzyme PPL lên ch医t mang Mg/Al – CO32- sau nung 荏

4500C t益 l羽 kim lo衣i 2:1. Vtqpi"8k隠u ki羽n nhi羽v"8瓜: 30oC; th運i gian c嘘8鵜nh 6 gi運; t嘘c

8瓜 l逸c: 300 v/p; n逢嬰ng enzyme PPL dùng cho m厩i m磯u<"307"oi"*v逢挨pi"泳pi"x噂k"565 WK1i"gp¦{og+="n逢嬰ng ch医t mang: 0.1 g. B違ng 3.7 : 謂pj"j逢荏ng c栄a pH lên hi羽u su医t c嘘8鵜nh pH Hi羽u su医t theo kh嘘i n逢嬰ng protein(1) (%) Hi羽u su医t tính theo ho衣t tính(2) (%) 6.0 58.62±0.307c 59.524±0e 6.5 2.874±0f 0±0g 7.0 67.595±2.085b 56.2±0f 7.5 83.272±2.161a 74.531±0.419a 8.0 55.967±2.292c 72.066±0.202b

8.5 46.24±2.709d 70.317±0.683c

9.0 42.126±2.749e 36.15±0.795d

Ghi chú:

(1): Hiうu suXt tính theo khぐk"n⇔ぢng protein cịn lTi cてa dung dおch sau khi cぐ8おnh (2): Hiうu suXt cぐ8おnh protein tính trên hoTt tính cてa enzyme tば do cĩ trong dおch rぬa sau khi cぐ8おnh.

Trong cùng mじt cじt, các chの cái a, b, c, d, e, f thあ hiうn sば khác biうt cĩ ý ngh c"cてa các giá trおぞ g"?"2027

K院t qu違 trình bày trong b違ng 3.7 cho th医y khi pH v<pi"v瑛 6 t噂i 7 thì hi羽u su医t

gp¦{og"v<pi"37'"x "8衣t cao nh医t 荏 pH 7.5 (83% - theo protein), (74% - theo ho衣t tính). T瑛rJ"907"8院n 8.0 hi羽u su医t c嘘8鵜nh gi違m m衣nh (t瑛 83% cịn 55%) và ti院p t映c gi違o"8院n pH 9 ch雨 cịn 42% (theo protein), 36% (theo ho衣v"v pj+0"rJ"807"n "8k吋m

8鰯pi"8k羽n c栄a enzyme, t衣k"8k吋m này lipase trung hịa v隠 8k羽n nên kh違 p<pi"h医p ph映

ch医t mang th医p nh医t (b茨ng liên k院t v壱t lý) ho員c do s詠 h医p ph映 c栄a các protein t衣p. Cịn hi羽u su医t tính theo ho衣t tính b茨ng 0, do PPL t衣k"8k吋m pH này khơng cịn ho衣t tính.

Theo nghiên c泳u c栄a Yanjing Li và cじng sば (2009) protein c栄a PPL s胤 tích

8k羽p"f逢挨pi"f逢噂i pH c栄c"rK"x "v ej"8k羽n âm trên pH c栄a pI, cịn LDHs Mg/Al CO32- 2:1 s胤v ej"8k羽p"f逢挨pi"f逢噂i pHpzc c栄a v壱t li羽u. pI c栄a PPL kho違ng 6.0 trong khi pI c栄a LDHs là 9.38. T瑛 kho違ng pH 6.5 8院n pH 9.38 protein c栄a enzyme s胤v ej"8k羽n trái d医u v噂i b隠 m員t ch医t mang, nên kh違p<pi"j医p ph映 di宇n ra d宇f pi"j挨p0"Fq"8„."荏

kho違pi"rJ"902"8院n 8.0 hi羽u su医t c嘘8鵜nh enzyme cao pj逢pi"mjk"rJ"e pi"vk院n v隠 g亥n pHpzc 8k羽p"v ej"f逢挨pi"vt‒p"d隠 m員t LDHs càng gi違m, liên k院t tpj"8k羽n gi英a enzyme và ch医t mang y院u d亥n nên hi羽u su医t c嘘8鵜nh th医r"8k0

V逢挨pi"v詠, hi羽u su医t c嘘8鵜nh enzyme tính theo ho衣t tính c pi"8衣t cao nh医t 荏 7.5, gi違m d亥n v隠 hai biên. Ak隠u này m瓜t l亥n n英a ch泳ng t臼 r茨ng, càng ti院n v隠 8k吋o"8鰯ng

8k羽n (pHpzc) c栄a ch医t mang, kh違 p<pi"v衣o liên k院t gi英a enzyme và LDHs càng th医p,

p‒p"n逢嬰ng protein t詠 do cịn l衣i trong h厩n h嬰p nhi隠u, d磯p"8院n hi羽u su医t tính theo ho衣t tính th医p.

V壱y chúng tơi ch丑n pH 7.5 làm pH t嘘k"vj ej"8吋 c嘘8鵜nh enzyme PPL. 3.2.4. 謂pj"j逢荏ng c栄a nhi羽v"8瓜

Th詠c hi羽n c嘘 8鵜nh enzyme PPL lên ch医t mang Mg/Al – CO32- sau nung 荏

4500C, t益 l羽 kim lo衣i 2:1. Vtqpi"8k隠u ki羽n pH 7.5; th運i gian c嘘 8鵜nh 6 gi運; t嘘e"8瓜

l逸c: 300 v/p=" n逢嬰ng enzyme PPL dùng cho m厩i m磯u<" 307" oi" *v逢挨pi" 泳pi" x噂k" 565 WK1i"gp¦{og+="n逢嬰ng ch医t mang: 0.1 g.

B違ng 3.8. 謂pj"j逢荏ng c栄a nhi羽v"8瓜 lên hi羽u su医t c嘘8鵜nh enzyme

Nhi羽v"8瓜 Hi羽u su医t tính theo ho衣t tính(2) (%) 20 6.691±0.951d 25 42.834±1.752b 30 71.945±0.513a 35 45.657±1.905b 40 14.675±0c 45 13.738±0.657c 50 9.676±0.172d Ghi chú:

(2): Hiうu suXt cぐ8おnh protein tính trên hoTt tính cてa enzyme tば do cĩ trong dおch rぬa sau khi cぐ8おnh.

Trong cùng mじt cじt, các chの cái a, b, c, d, e, f thあ hiうn sば khác biうt cĩ ý ngh c"cてa các giá trおぞ g"?"2027

K院t qu違 kh違o sát trình bày trong b違ng 3.8 cho th医y nhi羽v"8瓜 cĩ 違pj"j逢荏pi"8院n hi羽u su医t c嘘8鵜nh enzyme tính theo ho衣t tính. Khi nhi羽v"8瓜v<pi"v瑛 200E"8院n 250C thì hi羽u su医v"v<pi"v逢挨pi"泳ng t瑛 6.69% lên 42.83%. Hi羽u su医v"8衣t cao nh医t 荏 300C là 71% và ho衣t tính c栄a enzyme c嘘 8鵜nh 荏 nhi羽v"8瓜 này là kho違ng 300 UI/g enzyme. Do 荏 nhi羽v"8瓜 th医p, v壱n t嘘c ph違n 泳ng x違y ra ch壱o"8欝ng th運k"8¤{"e pi"mj»pi"rj違i là kho違ng nhi羽v"8瓜 t嘘k"逢w"ejq"jq衣v"8瓜ng c栄a enzyme PPL. Khi nhi羽v"8瓜 l噂p"j挨p"520C, protein c栄a enzyme b鵜 bi院n tính nên ho衣t tính enzyme gi違m, d磯n t噂i hi羽u su医t c嘘 8鵜nh th医p. K院t qu違p {"v逢挨pi"8逢挨pi"x噂i k院t qu違 c栄a tác gi違 Hong-yan Yen và cじng

sば *422;+" 8ã c嘘 8鵜nh lipase t瑛 Saccharomyces cerevisiae lên hydrotalcite Mg/Al.

Ho衣t v pj"v逢挨pi"8嘘i c栄a lipase c嘘8鵜pj"8衣t giá tr鵜 cao nh医t trong kho違ng nhi羽v"8瓜 30 – 350C (100%). [10]

T瑛 nh英ng nghiên c泳w" 8ã cơng b嘘 vt逢噂e" 8¤{" x " m院t qu違 vjw" 8逢嬰c t瑛 th詠c nghi羽m chúng tơi ch丑n nhi羽v"8瓜 300C làm nhi羽v"8瓜 c嘘8鵜nh cho enzyme PPL lên ch医t mang LDHs Mg/Al – CO32- 8ã nung 荏 4500C.

3.2.5. 謂pj"j逢荏ng c栄a th運i gian c嘘8鵜nh lên hi羽u su医t c嘘8鵜nh

Th詠c hi羽n c嘘 8鵜nh enzyme PPL lên ch医t mang Mg/Al – CO32- sau nung 荏

4500C, t益 l羽 kim lo衣i 2:1. Vtqpi" 8k隠u ki羽n pH 7.5; t嘘e" 8瓜 l逸c: 300 v/p=" n逢嬰ng enzyme PPL dùng cho m厩i m磯u<"307"oi"*v逢挨pi"泳pi"x噂k"565 WK1i"gp¦{og+="n逢嬰ng ch医t mang: 0.1 g.

B違ng 3.9: 謂pj"j逢荏ng c栄a th運i gian c嘘8鵜nh lên hi羽u su医t c嘘8鵜nh c栄a enzyme

Th運i gian Hi羽u su医t tính theo kh嘘i n逢嬰ng protein(1) (%) Hi羽u su医t tính theo ho衣t tính(2) (%) 5 85.81±0.394ab 72.25±1.255b 6 90.774±1.688a 75.421±0.426a 7 79.214±2.942b 73.233±1.127ab 8 60.688±4.481c 43.357±0.856c

12 50.344±1.3d 22.274±0.767d

Ghi chú:

(1): Hiうu suXt tính theo khぐk"n⇔ぢng protein cịn lTi cてa dung dおch sau khi cぐ8おnh (2): Hiうu suXt cぐ8おnh protein tính trên hoTt tính cてa enzyme tば do cĩ trong dおch rぬa sau khi cぐ8おnh.

Trong cùng mじt cじt, các chの cái a, b, c, d, e, f thあ hiうn sば khác biうt cĩ ý ngh c"cてa các giá trおぞ g"?"0.05

Sau th運i gian c嘘 8鵜nh là 6 gi運, hi羽u su医t c嘘 8鵜pj"8衣t cao nh医t 73% (theo ho衣t

v pj+"x ";2'"*vjgq"rtqvgkp+0"A嘘i v噂i ph亥n hi羽u su医t tính theo ho衣t tính, khơng cĩ s詠

khác bi羽t th嘘ng kê khi kh違o sát th運i gian c嘘8鵜nh (6h; 7h) pj逢pi"荏rj逢挨pi"rjƒr"v pj"

theo kh嘘k"n逢嬰ng protein thì cĩ s詠 khác bi羽t, cho th医{"n逢嬰ng protein h医p ph映 lên ch医t

ocpi"vjc{"8鰻i rõ r羽t sau m厩i gi運.

T瑛 5 gi運 8院n 6 gi運 c嘘 8鵜nh, hi羽u su医v" v<pi" mjq違ng 5% (:7'" 8院n 90% theo

rtqvgkp+0"Pj逢pi"ucw"9"ik運 c嘘 8鵜nh, hi羽u su医t theo protein ch雨 cịn 79% (gi違m 11%) và ti院p t映c gi違m cịn 50% sau 12 gi運0"Ak隠w"8„"ejq"vj医y, sau 6 gi運 enzyme khơng cịn kh違p<pi"j医p ph映 lên ch医t mang. Kho違ng th運i gian quá dài (:"8院n 12 gi運+."f逢噂i 違nh

j逢荏ng c栄a l詠c ma sát trong quá trình l逸e"8違o, nhi羽v"8瓜o»k"vt逢運pi"v<pi."gp¦{og"RPL b鵜 bi院n tính khơng cịn kh違p<pi"v逢挨pi"vƒe"v衣o liên k院t tpj"8k羽n v噂i ch医t mang. Ho員c do các h衣t LDHs b鵜 phá v叡 vtqpi"o»k"vt逢運ng c嘘8鵜nh nên hi羽u su医t tính theo protein gi違m d亥n.

A嘘i v噂i hi羽u su医t tính theo ho衣t tính, do th運i gian c嘘 8鵜nh khá dài trong mơi

Các tác gi違 Funda Yagiz (2009), Hong-yan Zeng (2009) c pi"pijkên c泳u c嘘 8鵜pj"nkrcug"n‒p"j{ftqvcnekvg"8隠u k院t lu壱p"v逢挨pi"v詠 và cho bi院t th運i gian c嘘 8鵜nh thích h嬰p t瑛7"8院n 6h. [4, 10]

V壱y ch丑n 6h làm th運i gian c嘘8鵜nh cho PPL 荏 các thí nghi羽m ti院p theo.

3.2.6. 謂pj"j逢荏ng c栄a v壱n t嘘c l逸c lên hi羽u su医t c嘘8鵜nh

Th詠c hi羽n c嘘 8鵜nh enzyme PPL lên ch医t mang Mg/Al – CO32- sau nung 荏

4500C, t益 l羽 kim lo衣i 2:1. Vtqpi" 8k隠u ki羽n pH 7.5; t嘘e" 8瓜 l逸c: 300 v1r=" n逢嬰ng enzyme PPL dùng cho m厩i m磯u<"307"oi"*v逢挨pi"泳pi"x噂k"565 WK1i"gp¦{og+="n逢嬰ng ch医t mang: 0.1 g. B違ng 3.10. 謂pj"j逢荏ng c栄a v壱n t嘘c l逸e"8院n hi羽u su医t c嘘8鵜nh enzyme V壱n t嘘c l逸c (v/p) Hi羽u su医t c嘘8鵜nh enzyme (2) (%) 200 45.822±1.068d 250 63.76±2.728b 300 80.119±1.407a 350 52.816±2.114c 400 50.344±1.108cd Ghi chú:

(2): Hiうu suXt tính theo khぐk"n⇔ぢng protein cịn lTi cてa dung dおch sau khi cぐ8おnh. Trong cùng mじt cじt, các chの cái a, b, c, d, e, f thあ hiうn sば khác biうt cĩ ý ngh c"cてa các giá trおぞ g"?"2027.

K院t qu違 cho th医y hi羽u su医v"v<pi"f亥p"mjk"v<pi"v嘘e"8瓜 l逸c t瑛 200 v/p (45%) lên 300 v/p (80%). T瑛 300 v/p hi羽u su医t c嘘 8鵜nh enzyme b逸v"8亥u gi違o"pjcpj."8院n 400 v/p hi羽u su医t c嘘8鵜nh cịn kho違ng 50%.

Vi羽c l逸e"8違o liên t映c nh茨o"n o"v<pi"fk羽n tích ti院p xúc gi英a enzyme và ch医t mang. 雲 t嘘e"8瓜 l逸c th医r"eƒe"gp¦{og"mj»pi"rj¤p"vƒp"8隠u vào trong kho違ng khơng gian gi英a các h衣t LDHs nên kh違 p<pi"vk院p xúc kém. T嘘e"8瓜 l逸c 300 v/p cho hi羽u su医t c嘘8鵜nh cao nh医t, do các phân t穎 enzyme PPL phân tán hồn tồn vào gi英a các h衣t LDHs, di羽n tích ti院r"z¿e"v<pi"n‒p."eƒe"gp¦{og"8栄 th運i gian liên k院t v噂i b隠 m員t ch医t mang hay g逸n lên trên b隠 m員t h衣t LDHs.

Tuy nhiên, khi ti院p t映e"v<pi"v嘘e"8瓜 l逸e"n‒p"ecq"j挨p."vc"vj医y hi羽u su医t c嘘 8鵜nh gi違m m衣nh. Nguyên nhân do t嘘e"8瓜 chuy吋p" 8瓜ng trong h厩n h嬰p ph違n 泳ng nhanh làm cho các phân t穎gp¦{og"mj»pi"8栄 th運k"ikcp"8吋 t衣o liên k院t v噂i h衣t LDHs. Ngồi ra, vi羽c hình thành và v叡 bong bĩng khí khi l逸c t嘘e"8瓜 cao cĩ th吋 gây 違pj"j逢荏pi"8院n c医u trúc c栄a enzyme.

V壱y t嘘e"8瓜 l逸e"522"x1r"8逢嬰c ch丑p"8吋 ti院n hành ti院p các thí nghi羽m sau.

T瑛 k院t qu違 khi kh違q"uƒv"vjw"8逢嬰e."8k隠u ki羽n c嘘8鵜nh phù h嬰p nh医t cho enzyme PPL trên ch医t mang Mg/Al – CO32- 8ãnung 荏 4500C là 荏 nhi羽v"8瓜 300C; t嘘e"8瓜 l逸c 300 v/p; th運i gian c嘘 8鵜nh 6 gi運; pH 7.5; t益 l羽 enzyme/ch医t mang là 15 w/w. Ho衣t tính c栄c"gp¦{og"vtqpi"8i隠u ki羽n c嘘 8鵜nh phù h嬰p là 350 UI/g enzyme. T瑛 k院t qu違

th詠c nghi羽m trên, ti院n hành kh違o sát các y院u t嘘違pj"j逢荏pi"8院n ho衣t tính c栄a enzyme c嘘8鵜nh.

3.3. Kh違o sát các y院u t嘘違pj"j逢荏pi"8院n ho衣t tính enzyme c嘘8鵜nh

Ho衣t tính c栄c"nkrcug"vj逢運ng b鵜 違pj"j逢荏ng b荏i r医t nhi隠u y院u t嘘. Trong nghiên c泳u này, chúng tơi kh違o sát b嘘n y院u t嘘違pj"j逢荏ng lên ho衣t tính c栄a PPL là nhi羽v"8瓜; pH; v壱n t嘘c khu医{"x "n逢嬰pi"e挨"ej医t s穎 d映ng.

3.3.1. 謂pj"j逢荏ng c栄a pH lên kh違p<pi"z¿e"vƒe"e栄a h羽 enzyme c嘘8鵜nh

Kh違o sát 違pj"j逢荏ng c栄a nhi羽v"8瓜 lên ho衣t tính c栄a enzyme c嘘 8鵜nh và so sánh v噂i ho衣t tính c栄a enzyme t詠 fq"vtqpi"épi"8k隠u ki羽n nhi羽v"8瓜 300C; v壱n t嘘c khu医y 300 x1r="n逢嬰ng nh "v逢挨pi"f亥u olive 50ml.

Hình 3.9. 謂pj"j逢荏ng c栄a pH lên ho衣t tính c栄a h羽 enzyme c嘘8鵜nh và enzyme t詠 do

Ghi chú:

CD: HoTv"v pj"v⇔¬pi"8ぐi cてa hう enzyme cぐ8おnh (%) TD: HoTv"v pj"v⇔¬pi"8ぐi cてa enzyme tば do (%)

K院t qu違 kh違q"uƒv"8逢嬰c trình bày trong hình 3.9 cho th医y h羽 enzyme c嘘 8鵜nh v磯n duy trì 8逢嬰c kh違p<pi"z¿e"vƒe"荏 vùng pH 5.0 (23%) so v噂i enzyme t詠 do (0%).

Mjk"rJ"v<pi"v瑛 7"8院n 5.5 ho衣v"v pj"v逢挨pi"8嘘i c栄a enzyme c嘘8鵜pj"v<pi"t医t ít (t瑛 23

0 20 40 60 80 100 120 4 4.5 5 5.5 6 6.5 7 7.5 8 8.5 9 J qc v"v pj "v逢 挨p i" 8嘘 k"*'+ pH CD TD

Một phần của tài liệu Nghiên cứu cố định enzyme lipase porcine pancreas trên chất mang hydrotalcite mg AlCO3 2 (Trang 66 - 99)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(99 trang)