7. Câu h臼 ic 栄c"pi逢運 inh 壱n xét dành cho h丑c viên (n 院u có):
1.1.4 Các ngu欝n thu nh壱n enzyme LCR
Nkrcug"8逢嬰c phân b嘘 r瓜ng trong các loài vi sinh v壱v."8瓜ng v壱t và c違荏 th詠c v壱t.
雲 pi逢運k"x "8瓜ng v壱v"e„"z逢挨pi"u嘘ng, nhi隠u lipase ki吋m soát s詠 th栄y phân, s詠 h医p th映, s詠 t衣o thành ch医t béo và chuy吋n hóa lipoprotein [1]. Nkrcug"8瓜ng v壱t chia làm 3
Luｆp"x<p"vjＴe"u Page 9
nhóm d詠a trên v鵜 trí và ho衣v"8瓜ng c栄a chúng: lipase th詠c ph育m, lipase mô và lipase s英a.
1.1.4.1 T瑛8瓜ng v壱t
雲 pi逢運k"x "8瓜ng v壱v"e„"z逢挨pi"u嘘ng, nhi隠u lipase ki吋m soát s詠 thu益 phân, s詠
h医p th映, s詠 t衣o thành ch医t béo và chuy吋n hoá lipoprotein. Ngay t瑛 p<o" 3;45."
Willstatter và Klemmen 8«" vjw" pj壱n enzyme t瑛 t映y t衣pi" jgq" pj逢pi" 8院n 1996 Vergen m噂i tinh s衣ch hoàn toàn enzyme lipase này. Enzyme lipase t瑛 t映y t衣ng là enzyme lipase t嘘t nh医t t瑛 ngu欝p"8瓜ng v壱t. Enzyme này hi羽n di羽n trong t映y t衣ng và d鵜ch t映y t衣ng, có kh嘘k"n逢嬰ng phân t穎 là 45000 - 50000 Dalton. Kho違ng pH t嘘k"逢w"
cho enzyme này là 7,0 - 9,3. Enzyme lipase này ho衣v"8瓜ng m衣pj"j挨p"mjk"e„"u詠 hi羽n di羽n c栄a mu嘘i canxi, các acid m壱t và mu嘘i m壱v0"Mjk"e挨"ej医v"8逢嬰e"pj "jqƒ"vj·"e挨"j瓜i
v逢挨pi"vƒe"ik英c"gp¦{og"x "e挨"ej医v"v<pi"ecq [2].
Lipase t瑛 8瓜ng v壱v" 逢w" vk‒p" z¿e" vƒe" vj栄y phân t衣q" tc" eƒe" cekf" dfiq" e„" j挨p" 34"
nguyên t穎 carbon và ch栄 y院u t医n công vào v鵜 trí C-1 c栄a khung glycerol. Lipase t瑛
l嬰n bao g欝m m瓜t chu厩i duy nh医t 449 acid amin và tr丑pi"n逢嬰ng phân t穎 c栄a protein là vào kho違ng 50.000 Dalton. M瓜t lo衣i khác c栄a lipase t瑛8瓜ng v壱t là lipase chi院t t瑛
d衣 dày c栄a dê, c瑛u. Nh英ng ep¦{og"p {"逢w"vk‒p"z¿e"vƒe"vj栄y phân acid béo chu厩i ng逸n trong ch医t béo t瑛 s英c."x "8員c bi羽v"8逢嬰c s穎 d映ng trong vi羽c t衣q"vj pj"j逢挨pi" vj挨o"e栄a phomat.
1.1.4.2 T瑛 th詠c v壱t
雲 th詠c v壱v."nkrcug"8逢嬰c tìm th医y 荏 mô d詠 tr英 c栄a h衣t có d亥u, h衣v"pi "e嘘c trong quá trình n違y m亥m c栄a h衣t. H亥u h院t các lipase không ho衣v"8瓜ng trong th運i k h衣t ng栄8»pi."piq衣i tr瑛 lipase tìm th医y 荏 h衣v"8壱u caston.
Enzyme lipase t瑛 ngu欝n th詠c v壱t có nhi隠u trong các h衣t d亥u bao g欝m: h衣v"8壱u
p pj."8壱u ph瓜ng, ngô, th亥u d亥u và h衣t c栄c"eƒe"e¤{"pj逢 cây mù t衣t, cây c違i d亥u, cây bông, cây anh túc có th吋 8逢嬰c trích ly b茨ng dung d鵜ch aceton ho員e"8羽m thích h嬰p. Trong nh英pi" p<o" i亥p" 8¤{" nkrcug" e”p" e„" vj吋 8逢嬰c chi院t xu医t t瑛 g衣o, m瓜t trong nh英ng lo衣i th詠c ph育m quan tr丑ng nh医v"ejq"eqp"pi逢運i (Prabhu và cじng sば, 1999) [2].
Luｆp"x<p"vjＴe"u Page 10
M瓜v"n逢嬰ng l噂n lipase trong công nghi羽r"8逢嬰c s違n xu医t t瑛 các lo衣i vi sinh v壱t: vi khu育n, n医m m嘘c, n医m men. Nói chung lipase t瑛 vi khu育p" 8隠u là nh英ng
in{eqrtqvgkpu." pj逢pi" o瓜t s嘘 lipase vi khu育n ngo衣i bào là lipoprotein. Enzyme lipase t瑛 gi嘘ng Rhizopus và Aspegillus. Các loài vi n医m có kh違 p<pi"v衣o enzyme lipase cao bao g欝m: Asperills niger, A. terreus, A. oryzae, A. fumigatus, Penicilium chysogenum, P. funiculosum, Fusarium solani, Fusarium moniliforme, Fusarium vasinfectum và Alternaria alternata, Staphylococcus spp., Pseudomonas
spp.,Chromobacterium spp., Achromobacter spp., Alcaligenes .
N医m men: N医m men Candida rugosa là m瓜t ngu欝n s違n xu医t lipase quan tr丑ng.
Eƒe" 8員c tính xúc tác c医u trúc hóa sinh c栄a lipase trong loài n医m men Candida rugosa 8«"8逢嬰c công b嘘 trên nhi隠u tài li羽u [7]. Có ít nh医t 7 gi嘘ng lipase t瑛 Candida rugosa vtqpi"8„"e„"6"ik嘘pi"8«"8逢嬰e"zƒe"8鵜pj"8員c tính và 3 gi嘘pi"8«"8逢嬰e"f́pi"8吋
s違n xu医v"gp¦{og"vj逢挨pi"rj育m.
1.1.5 E挨"ej院8瓜ng h丑c xúc tác c栄a LCR
Theo các nghiên c泳u lipase có nhóm serin, histidin và acid aspastic 荏 trung tâm ho衣v"8瓜ng c栄a nó. V噂k"eƒe"e挨"ej医v"mj»pi"vcp"vtqpi"p逢噂c, ho衣t tính c栄c"nkrcug"8衣t
8逢嬰c c詠e"8衣i ch雨 mjk"p„"8逢嬰c phân tán vào gi英a b隠 m員t phân pha d亥w"p逢噂c. Quá
vt·pj"8„"8逢嬰c g丑i là quá trình ho衣t hoá phân pha [6] (hình 1.1)
Hình 1.3: Mô hình hoＴv"8じng cてc"nkrcug"vt‒p"e￢"ejＸt hòa tan và không tan trong
p⇔ずc. Sばvjc{"8ごi hình thあ cてa lipase trong quá trình hoＴv"8じng xúc tác. Mô hình
p {"fq"Xgtigt"8ｚ xuＸt (1980)
Vtqpi"8„<"
E: Lipase hòa tan không ho衣v"8瓜ng E*: Lipase hòa tan d衣ng ho衣v"8瓜ng
Luｆp"x<p"vjＴe"u Page 11
Es*: Lipase ho衣v"8瓜ng có h医p ph映
Eis*: Lipase không ho衣v"8瓜pi"8逢嬰c h医p ph映 Uy<"E挨"ej医v"vcp"vtqpi"p逢噂c
U<"E挨"ej医v"mj»pi"vcp"vtqpi"p逢噂c
E*Sw và Es*S: Ph泳c h嬰p lipase - e挨"ej医t
Khi không có m員v"p逢噂c ho員e"mjk"e„"p逢噂c v噂k"n逢嬰ng nh臼, ph違n 泳ng ester hóa
8逢嬰e"逢w"vk‒p0"Vtqpi"vt逢運ng h嬰p này, nh英pi"8員e"v pj"pj逢"v嘘e"8瓜 z¿e"vƒe"x "v pj"8員c hi羽u ph映 thu瓜c nhi隠w"x q"8k隠u ki羽n ph違n 泳ng và b違n ch医v"e挨"ej医t (Paul Woolley & Steffen B. Petersen, 1992).
Nhi羽v"8瓜 và pH là hai y院u t嘘 違pj"j逢荏ng r医t nhi隠w"8院n ho衣v"8瓜pi"e pi"pj逢"v pj"
b隠n c栄a lipase. Lipase thu t瑛 các ngu欝n khác nhau ch鵜u 違pj"j逢荏ng b荏i nhi羽v"8瓜 và pH khác nhau.
Theo Marija Ablamic và Iwanalescie, lipase t鰻ng h嬰p t瑛 ch栄ng Streptomyces riromus R6554W ho衣v"8瓜ng m衣nh nh医t 荏 d違i nhi羽v"8瓜 50-60ºC, pH t嘘k"逢w"n ";.70"雲 8k隠u ki羽n pH và nhi羽v"8瓜 không thích h嬰r."nkrcug"8隠u b鵜 kìm hãm ho衣v"8瓜ng và gi違m tính b隠n. 曳 enzyme 荏 pH 9,5; nhi羽v"8瓜 23ºC sau 24 gi運 ho衣v"8瓜 gi違m 5%, 荏 pH 10- 11 ho衣v"8瓜 gi違m 55%. 雲 nhi羽v"8瓜 30ºC ho衣v"8瓜 gi違m còn 25%, 荏 90ºC ho衣v"8瓜 còn 30% so v噂i ho衣v"8瓜 lipase t衣i 55ºC [11].
Lipase t瑛 ch栄ng S.riromus b隠n 荏 cùng nhi羽v"8瓜 20-50ºC và m医t ho衣t tính nhanh
荏 vùng nhi羽v"8瓜ecq"j挨p"92³E"]33̲0"
Lipase t瑛 ch栄ng Penicillium cyclopium có pH t嘘k"逢w"vtqpi"mjq違ng 4,5-7,0 [10]. Lipase t瑛 n医m Pythium ultium có pH ho衣v"8瓜ng 荏 8k隠u ki羽n t嘘k"逢w"n "9.7-8,5. Còn
8嘘i v噂i lipase t瑛 ch栄ng Rhizopus oryae có pH t嘘k"逢w"n "9.7"]8̲0"Ac"u嘘 lipase ho衣t
8瓜ng 荏 nhi羽v"8瓜 50-60ºC, tuy nhiên có m瓜t vài ch栄ng ho衣v"8瓜ng 荏 nhi羽v"8瓜 th医r"j挨p0"
Ch栄ng Penicillium cyclopium, Pythium ultium và Rhizopus oryae ch鵜u nhi羽t kém, s胤
b鵜泳c ch院 khi nhi羽v"8瓜 lên t噂i 50ºC [6].
Lipase t瑛 Candida rugosa 鰻p"8鵜nh 荏 vtqpi"o»k"vt逢運ng ki隠m pH t瑛 7-10 và có ho衣v"8瓜 m衣nh nh医t 荏 pH 8,5 (Sharon và cじng sば, 1998).
Luｆp"x<p"vjＴe"u Page 12 謂pj"j逢荏pi"e栄c"rJ."pjk羽v"8瓜 Piw欝p"i嘘e rJ"v嘘k"逢w Pjk羽v"8瓜"v嘘k"逢w"*0C) Xk"mjw育p Bacillus sp. FH5 8.0 37 Bacillus coagulans BTS-3 8.5 55 Salinivibrio sp. SA-2 7.5 50 Lactobacilli 30 Acinetobacter radioresistens 7.0 30 Enterobacter agglomerans 7.0 30 Pseudomonas sp. 7323 9.0 30 Aeromonas sobria LP004 6.0 45 Acinetobacter sp. CR9 8.0 40 Enterococcus faecalis 8.0 60 P医o"o嘘e Penicillium candidum 9.0 35 Candida rugosa 6.5 30
Aspergillus oryzae RIB128 5.5 40
Rhizopus oryzae 7.5 35
P医o"ogp
Cryptococcus sp. S2 7.0 37
謂pj"j逢荏pi"e栄c"eƒe"kqp"mko"nq衣k
Piw欝p"i嘘e Ej医v"jq衣v"j„c Ej医v"泳e"ej院
Xk"mjw育p
Bacillus thermoleovorans ID-1 Ca2+,Zn2+ Bacillus natto Na+, PO45&."Ca2+
Staphylococcus aureus 226 Ca2+,Mg2+ Mn2+
Staphylococcus aureus Ca2+,Mn2+ Eqdcp."M胤o
Serratia marcescens 345 Mg2+
Fe2+, Ni2+, Cu2+, Hg2+
Luｆp"x<p"vjＴe"u Page 13 Bacillus sp. FH5 Fe2+,Mn2+, Ca2+, Hg2+ , Mg2+, Ba2+ Cu2+, Co2+, Na+,Zn2+ Acinetobacter sp. CR9 Cu2+, Mo2+, Mg2+, Zn2+ Ca2+ Acinetobacter baumannii BD5 Mn2+, Ca2+, Mg2+ Cu2+, Zn2+ PＸo"oぐe Rhizopus oryzae Fe2+, Cu2+, Hg2+, Aspergillus terreus Ca2+,Mg2+ Fe2+,Ni2+, Cu2+, Co2+