Antigen)
Nguyên tắc chung phản ứng của test chẩn đoán nhanh bệnh Carré trên chó. Dựa trên nguyên tắc có 2 kháng thể đơn dịng kết hợp với kháng nguyên cần phát hiện, gọi là kỹ thuật Sandwich trực tiếp. Kháng thể chuẩn đơn dòng thứ nhất được
gắn sẵn vào dưới đáy của bộ kít. Sau đó kháng ngun cần phát hiện được phủ lên, cuối cùng là phủ conjugate – kháng thể đặc hiệu cùng với loại kháng thể đơn dòng đầu tiên gắn ở đáy giếng có gắn enzyme và chất hiện màu.
Nếu kháng nguyên đặc hiệu kết hợp với kháng thể sẽ có sự kết hợp kháng nguyên – kháng thể và nhất định sẽ có bước tiếp theo là conjugate kết hợp với kháng nguyên – kháng thể tạo thành phức hợp kháng thể – kháng nguyên – kháng thể, trong giếng hỗn hợp có enzyme để giải phóng [O] từ H2O2 oxy hóa chất hiện màu làm thay đổi màu, kết quả trên test thử sẽ xuất hiện 2 vạch tại vị trí Control (C) và tại vị trí test (T), khi đó phản ứng là dương tính.
Nếu kháng ngun khơng đặc hiệu với kháng thể, sẽ khơng có sự kết hợp kháng nguyên – kháng thể và kháng nguyên bị rửa trơi, tiếp đó conjugate khơng kết hợp với phức hợp kháng nguyên – kháng thể cũng bị rửa trơi, hỗn dịch sẽ khơng có enzyme để giải phóng [O] từ H2O2 và chất hiện màu khơng bị oxy hóa, phản ứng âm tính với sự xuất hiện chỉ 1 vạch tại vị trí C.
Test chẩn đoán nhanh bệnh Carré (test CDV Antigen).
Đầu tiên làm ướt tăm bông với 5 giọt dung dịch nước muối sinh lý rồi dung tăm bông ướt thấm dịch mũi hoặc mắt, cho tăm bơng vừa lấy mẫu vào ống nghiệm có dung dịch pha lỗng. Dùng tăm bơng trộn đều mẫu trong ống nghiệm, để yên ít phút cho phần cặn lắng xuống đáy ống. Xé bao đựng đĩa thử, đặt lên mặt phẳng và khô rồi dùng ống hút hút dịch trong mẫu thử, nhỏ 4 giọt vào ô kiểm tra. Theo nhà sản xuất thì độ nhạy của test là 99,9 %. Đọc kết quả sau 5 – 10 phút.
CHƯƠNG 2 : PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Thời gian và địa điểm thực hiện đề tài
Đề tài được thực hiện từ ngày 29 tháng 9 đến 29 tháng 11 năm 2021 Địa điểm: phòng khám thú y và dịch vụ thú cưng Cần Thơ- Saigonpet
2.2 Đối tượng khảo sát
Tất cả những chó bệnh đem đến khám và điều trị tại phịng khám
2.3 Nội dung nghiên cứu
(1) Khảo sát tỷ lệ chó bệnh Carré và các yếu tố ảnh hưởng đến bệnh (2) Khảo sát một số dấu hiệu lâm sàng
(3) Ghi nhận pháp đồ và kết quả điều trị bệnh Carré tại phòng khám thú y
2.4 Phương pháp tiến hành và các chỉ tiêu khảo sát
2.4.1Khảo sát tỷ lệ chó nghi bệnh Carré và các yếu tố ảnh hưởng đến bệnh
2.4.1.1 Dụng cụ:
Cân, hồ sơ bệnh án, ống nghe, nhiệt kế, test CDV Antigen
2.4.1.2 Cách thực hiện
Lập hồ sơ bệnh án theo dõi đối với từng chó bệnh (phụ lục 1), đăng ký hỏi bệnh bằng việc tiến hành hỏi thăm và ghi nhận thông tin về họ tên chủ nuôi, địa chỉ liên lạc, tên, giới tính và tuổi của chó, tổng số chó ni, số con mắc bệnh, hỏi về cách chăm sóc ni dưỡng, tình trạng tiêm phịng, tình trạng sổ giun. Tiến hành điều tra bệnh sử thông qua chủ nuôi biết về tiền sử bệnh trước đây, các liệu pháp đã điều trị, triệu chứng bệnh. Sau đó chúng tơi tiến hành chẩn đốn lâm sàng bằng cách: quan sát thể trạng, cách đi đứng, tình trạng mất nước; đo thân nhiệt, sờ nắn, kiểm tra niêm mạc mắt, mũi, miệng, bàn chân; nghe nhịp tim, phổi, đếm tần số hô hấp và thử các phản xạ ở mắt, cơ...Quan sát trực tiếp và ghi nhận thơng tin chẩn đốn lâm sàng chúng tơi xếp các chó có 1 trong các nhóm triệu chứng sau là chó nghi bệnh Carré:
(1) Sốt, xáo trộn hơ hấp (ho, khó thở, chảy nhiều dịch tiết ở mắt mũi, âm rale phổi).
(2) Sốt, xáo trộn hô hấp kết hợp với xáo trộn tiêu hóa (phân sệt đen hay tiêu chảy máu lẫn chất nhày, tanh).
(3) Dấu hiệu thần kinh (co, bại liệt, đi loạng choạng) thường thấy trên những chó bị sừng hóa gương mũi, sừng hóa gan bàn chân, nổi mụn ở vùng da mỏng. Có thể có triệu chứng ở nhóm (2).
Đối với những chó có biểu hiện nghi bệnh Carré, kết hợp với sự chỉ định từ bác sĩ của phịng khám và sự đồng ý của chủ ni, chúng tơi tiến hành thử test nhanh bệnh Carré trên chó, do điều kiện hạn hẹp của đề tài và giá tiền thử test khá cao (một số chủ nuôi không đồng ý) nên chúng tôi chỉ tiến hành thử test trên các ca nghi bệnh Carré.
2.4.1.3 Chỉ tiêu theo dõi và công thức tính
(1) Tỷ lệ chó bệnh Carré (%) = (Số chó bệnh Carré / Tổng số chó khảo sát) × 100
(2) Tỷ lệ chó dương tính với test Witness (%) = (Số mẫu dương tính với test Witness / Số mẫu thử test Witness) × 100
(3) Tỷ lệ chó bệnh Carré theo giống, tuổi, giới tính (%) = (Số chó bệnh Carré theo giống, tuổi, giới tính / Tổng số chó khảo sát theo giống, tuổi, giới tính)×100
(4) Tỷ lệ chó bệnh Carré theo tình trạng tiêm phịng vaccine (%) = (Số chó bệnh Carré theo tình trạng tiêm phịng vaccine / Tổng số chó bệnh Carré)×100
(5) Tỷ lệ chó bệnh Carré theo phương thức chăn ni và thức ăn (%) = (Số chó bệnh Carré theo phương thức chăn nuôi và thức ăn / Tổng số chó bệnh Carré) × 100
2.4.2Khảo sát những dấu hiệu lâm sàng và một số chỉ tiêu sinh lý máu
2.4.2.1 Dụng cụ và hóa chất:
Cân trọng lượng, ống tiêm, dây cột mõm, kéo cắt lông, nhiệt kế, ống kháng đông, cồn.
2.4.2.2 Cách thực hiện
Chúng tơi tiến hành lấy mẫu trên chó bệnh Carré. Giữ chó ở trạng thái yên tĩnh, buộc mõm chó lại, dùng dây cố định chân trước, dùng ống tiêm lấy 0,5 ml máu
ở tĩnh mạch chân rồi cho vào ống kháng đơng có chứa EDTA và gởi về Trạm chẩn đoán xét nghiệm và Điều trị – Chi cục thú y Thành Phố Hồ Chí Minh để xét nghiệm một số chỉ tiêu sinh lý máu.
2.4.2.3 Chỉ tiêu theo dõi và cơng thức tính
(1) Tỷ lệ chó bệnh theo thể bệnh (%) = (Số chó bệnh theo thể bệnh / Tổng số chó bệnh Carré) × 100
(2) Tỷ lệ xuất hiện các triệu chứng lâm sàng trên chó bệnh Carré (%) = (Số chó bệnh Carré xuất hiện các triệu chứng / Số chó thử test Witness xuất hiện các triệu chứng) × 100
2.4.3Ghi nhận liệu pháp và kết quả điều trị bệnh Carré
2.4.3.1 Các loại thuốc:
Kháng sinh (gentamicin, lincomycin, Baytril, Septotryl), kháng viêm (dexamethasone), thuốc bổ trợ lực trợ sức (Lesthionine C, vitamine C và B – complex), cầm máu (vitamine K, Transamine), hạ sốt (Anazin), chống ói (atropin), dịch truyền (Lactate ringer, Glucose 5 %).
2.4.3.2 Cách thực hiện:
Chúng tôi đã ghi nhận liệu trình sử dụng kháng sinh,vitamine và các thuốc hỗ trợ điều trị mà Trạm đang dùng rồi ghi nhận tỷ lệ thú khỏi bệnh, thú chết trên những chó bệnh và nghi bệnh Carré. Đồng thời chúng tơi cịn ghi nhận thời gian điều trị trên các chó bệnh, nghi bệnh Carré.
2.4.3.3 Chỉ tiêu theo dõi và cơng thức tính
(1) Tỷ lệ chó bệnh Carré được chữa khỏi (%) = (Số chó bệnh Carré được chữa khỏi / Tổng số chó nghi bệnh Carré) × 100
(2) Thời gian điều trị trung bình (ngày) = Tổng thời gian điều trị của các chó khỏi bệnh Carré / Tổng số chó khỏi bệnh Carré
CHƯƠNG 3 : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN3.1 Khảo sát tỷ lệ chó bệnh Carré và các yếu tố ảnh hưởng đến bệnh 3.1 Khảo sát tỷ lệ chó bệnh Carré và các yếu tố ảnh hưởng đến bệnh
3.1.1Tỷ lệ chó bệnh Carré
Trong thời gian 2 tháng (từ ngày 29/11/2021 đến ngày 29/12/2021) tại Trạm thú y, chúng tơi đã khảo sát 256 con chó được mang tới khám và điều trị, qua chẩn đốn lâm sàng có 25 con chó bệnh Carré được trình bày qua Bảng 3.1.
Bảng 3.1 Tỷ lệ chó bệnh Carré
Tổng số chó khảo sát (con) Số chó bệnh Carré (con) Tỷ lệ (%) 256 con 25 con 9.7 %
Qua Bảng 3.1, chúng tơi ghi nhận tỷ lệ chó bệnh Carré trên tổng số chó khảo sát chó là 9.7 %, kết quả này thấp hơn so với kết quả của Dương Tấn Đạt.2018 Sự khác biệt này có thể do người dân ngày càng quan tâm hơn đến việc chăm sóc, tiêm phịng thú ni của mình nên tỷ lệ chó nghi bệnh Care trên tổng số chó khảo sát chúng tơi ghi nhận thấp hơn ghi nhận của các tác giả trước.
3.1.2Kết quả chẩn đoán bệnh Carré bằng test CDV Antigen (test Witness)
Trong thời gian 2 tháng (từ ngày 29/9/2021 đến ngày 29/11/2022) tại phòng khám và dịch vụ thú y Cần Thơ-Saigonpet chúng tôi đã khảo sát 256 con chó được mang tới khám và điều trị cũng như tại tận nhà, qua chẩn đốn lâm sàng có 29 con chó nghi bệnh Carré. Kết quả cho 25 test dương tính chiếm tỷ lệ 86 % và 4 test âm tính chiếm tỷ lệ 14 %. Kết quả ghi nhận được trình bày qua Bảng 3.2.
Bảng 3.2 Kết quả thử test CDV Antigen (test Witness)
Kết quả Số lượng (n = 29) Tỷ lệ (%) Số mẫu dương tính 25 86.2 % Số mẫu âm tính 4 13.8 %
Chúng tơi nhận thấy kết quả khảo sát của chúng tôi thấp hơn kết quả của Dương Tấn Đạt (2018) Sự khác biệt này có thể do sự khác nhau về khả năng chẩn đốn lâm sàng trên các chó nghi bệnh Carré để tiến hành thử test.
3.1.3Các yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ bệnh Carré trên chó
3.1.3.1 Tỷ lệ chó nghi bệnh Carré theo giống, tuổi, giới tính
Bảng 3.3.Tỷ lệ chó bệnh Carré theo giống, tuổi, giới tính
Chỉ tiêu khảo sát Số chó bệnh ( con ) Tỷ lệ ( % ) Giống Nội 7 28 % Ngoại 18 72 % Giới tính Đực 11 44 % Cái 14 56 % Tuổi < 2 tháng 8 32 % 2 – 6 tháng 12 48 % >6 – 12 tháng 3 12 % >12 tháng 2 8 %
3.1.3.2 Tỷ lệ chó bệnh, nghi bệnh Carré theo tình trạng tiêm phịng vaccine
Bệnh Carré là bệnh do virus nên việc tiêm phòng vaccine là hết sức cần thiết. Hiện tại, Phòng khám sử dụng loại vaccine hanvet để phòng bệnh Care. Vaccine được sử dụng với liệu trình: 2 tháng tuổi (mũi thứ nhất), 3 tháng tuổi (mũi thứ 2). Chúng tôi đã tiến hành khảo sát tỷ lệ chó bệnh và nghi bệnh Carré theo tình trạng tiêm phịng vaccine trên 3 nhóm chó:
(1) Nhóm chó khơng tiêm phịng vaccine là: những chó khơng tiêm phịng vaccine lần nào.
(2) Nhóm chó tiêm vaccine khơng đúng liệu trình là: những chó chỉ tiêm vào lần đầu lúc 2 tháng tuổi mà không tiêm nhắc lại vào lần 2 lúc 3 tháng tuổi và khơng tiêm lặp lại hằng năm đối với những chó trên 15 tháng tuổi.
(3) Nhóm chó tiêm vaccine đúng liệu trình là: những chó đã tiêm đầy đủ 2 mũi vaccine (2 tháng tuổi: mũi thứ nhất, 3 tháng tuổi: mũi thứ 2) và đều lặp lại định kỳ hằng năm. Kết quả ghi nhận được trình bày qua Bảng 3.4.
Qua Bảng 3.4, chúng tơi nhận thấy nhóm chó khơng được tiêm phịng có tỷ lệ nghi bệnh Carré cao nhất (62 %), trong khi đó nhóm chó được tiêm vaccine đúng liệu trình có tỷ lệ rất thấp ( 13.7 % )
Bảng 3.4 Ảnh hưởng của việc tiêm phịng đến tỷ lệ chó bệnh và nghi bệnh Carré
Chỉ tiêu Số chó mắc bệnh care ( con )
Tỷ lệ ( % )
Không tiêm vaccine 18 72 % Tiêm vaccine khơng
đúng liệu trình
7 28 %
Tiêm vaccine đúng liệu trình
0 0 %
Tổng 25 100 %
Đồng thời trên những chó đã xác định mắc bệnh Carré thì khuynh hướng bệnh xảy ra chủ yếu trên nhóm chó chưa tiêm phịng vaccine (72 %), nhóm chó tiêm vaccine khơng đúng liệu trình thì tỷ lệ bệnh thấp (28 %) và khơng có trường hợp nào trên nhóm chó tiêm vaccine đúng liệu trình. Mặc dù số ca khảo sát cịn ít nhưng đã cho thấy được ý nghĩa của việc tiêm phòng vaccine đầy đủ trong việc phịng bệnh Carré trên chó.
Những chó khơng tiêm phịng vaccine thì cơ thể chúng chưa tiếp xúc với kháng nguyên virus lần nào nên khi virus xâm nhập vào cơ thể các tế bào miễn dịch không nhận biết và gắn kết với kháng ngun nên khơng có khả năng đáp ứng để sản xuất kháng thể trung hịa kháng ngun nên virus khơng được loại bỏ và bắt đầu tấn cơng cơ thể thú bệnh. Những chó chỉ tiêm vaccine 1 lần duy nhất vào lúc 2 tháng tuổi mà không tiêm lặp lại lần 2 vào lúc 3 tháng tuổi thì những thú này chỉ có đáp ứng miễn dịch tiên phát nên độ dài miễn dịch ngắn, đáp ứng miễn dịch cao nhất chỉ ở mức trung bình. Vì vậy nên tiêm phịng vaccine đúng liệu trình để tạo miễn dịch thứ phát, có thời gian miễn dịch dài, đáp ứng miễn dịch cao nhất thì cơ thể chó có đủ hàm lượng kháng thể nhằm chống lại sự tấn cơng của virus. Do đó, những chó được tiêm phịng vaccine đúng liệu trình thì tỷ lệ nghi bệnh và mắc bệnh Carré thấp nhất.
Kết quả của chúng tôi đã chỉ ra rằng miễn dịch tự nhiên đối với CDV được xem là dài hạn, bền vững và là miễn dịch đồng nhất, đã thực hiện được sự ngăn chặn bệnh thơng qua tiêm phịng vaccine đúng liệu trình. Để đối phó với việc thiếu kháng thể từ mẹ truyền ta cần tiêm ít nhất 2 mũi vaccine phịng bệnh Carré trên chó thiếu sữa đầu lúc chó được 2 – 4 tuần tuổi.
3.1.3.3 Tỷ lệ bệnh Carré theo phương thức chăn ni và thức ăn
Chó mắc bệnh Carré bài virus qua dịch tiết ở mũi, nước mắt, nước bọt, nước tiểu, phân,..., những chó ni thả rất dễ tiếp xúc với mầm bệnh nên khả năng nhiễm bệnh rất cao. Trên thực tế, phương thức chăn nuôi và thức ăn có ảnh hưởng đến tỷ lệ bệnh và nghi bệnh Carré nên chúng tôi đã tiến hành khảo sát và ghi nhận theo 3 phương thức chăn nuôi và thức ăn:
(1) Nuôi thả, thức ăn tự chế biến. (2) Nuôi nhốt, thức ăn tự chế biến. (3) Nuôi nhốt, thức ăn cơng nghiệp.
Kết quả ghi nhận được trình bày qua Bảng 3.5
Bảng 3.5 Ảnh hưởng của phương thức chăn ni và thức ăn đến tỷ lệ chó bệnh Carré.
Phương thức chăn ni và thức ăn Số chó mắc bệnh care (con) Tỷ lệ (%) (1) Nuôi thả, thức ăn tự chế biến 18 72 % (2) Nuôi nhốt, thức ăn tự chế biến 3 12 % (3) Nuôi nhốt, thức ăn công nghiệp 4 16 % Tổng 25 100
Qua kết quả ghi nhận của chúng tơi ở Bảng 3.5 thì nhóm chó bệnh Carré được nuôi theo phương thức (1) chiếm tỷ lệ cao nhất (72 %) và nhóm chó được ni theo phương thức (3) chiếm tỷ lệ thấp nhất (16 %). Đồng thời nhóm chó mắc bệnh Carré cũng theo khuynh hướng trên. Kết quả cuả chúng tơi cho rằng chó ni thả rong, cho ăn thức ăn gia đình thì tỷ lệ nghi bệnh, mắc bệnh Carré là cao nhất.
Điều này có thể giải thích rằng những chó thả rong bên ngồi dễ tiếp xúc nhiều với mầm bệnh có trong nước tiểu, phân của những thú bệnh khác nên khả năng nhiễm bệnh là rất cao. Bên cạnh đó thức ăn tự chế biến có sẵn trong bữa ăn hằng ngày thường có khả năng nhiễm mầm bệnh cao hơn thức ăn cơng nghiệp được
đóng gói, sản xuất theo quy trình đảm bảo chất lượng. Tuy nhiên thức ăn công nghiệp khá đắt tiền, tùy điều kiện gia đình mà chọn nhóm thức ăn phù hợp nhưng phải đảm bảo vệ sinh và dinh dưỡng cho thú. Để giảm tỷ lệ bệnh, ngăn ngừa sự lây lan cần phải quan tâm đến việc tiêm phịng, vệ sinh mơi trường và vệ sinh thức ăn khi nuôi.
3.2 Khảo sát một số dấu hiệu lâm sàng và một số chỉ tiêu sinh lý máu
3.2.1 Tỷ lệ chó mắc bệnh Carré theo thể bệnh
Dựa vào những biểu hiện trên 19 con chó mắc bệnh Carré chúng tơi đã tiến hành khảo sát 2 thể bệnh: thể hơ hấp – tiêu hóa và thể thần kinh. Thể hơ hấp – tiêu hóa thường biểu hiện bằng sốt cao, đi kèm với các xáo trộn hơ hấp (ho, khó thở, âm ran ướt, chảy nhiều dịch mũi, mắt đổ ghèn), xáo trộn tiêu hóa (biếng ăn hoặc bỏ ăn, đi phân lỏng, tanh, có thể lẫn máu có chất nhày), có thể có nhiều mụn mủ ở vùng da bụng và mắt. Trong thể thần kinh chó bệnh Carré có biểu hiện thần kinh như: chảy nước bọt, co giật, bại liệt, đi đứng loạng choạng trên những chó bị sừng hóa gan bàn chân. Kết quả được trình bày qua Bảng 3.6. Đồng thời chúng tơi còn ghi nhận các triệu chứng lâm sàng thường gặp trên 25 chó mắc bệnh Carré. Kết quả được trình bày qua Bảng 3.7.
Bảng 3.6 Tỷ lệ chó mắc bệnh care theo thể bệnh
Thể bệnh Số chó bệnh (con) Tỷ lệ (%)
Thể hơ hấp-tiêu hóa 22 88 %
Thể thần kinh 3 12 %
Tổng 25 100 %
Qua Bảng 3.7 cho ta thấy những chó mắc bệnh Carré biểu hiện bệnh theo thể hô hấp – tiêu hóa chiếm tỷ lệ cao (88 %). Trong 2 trường hợp chó bệnh thể thần