3. ðỐ IT ƯỢNG, THỜI GIAN, ðỊ Að IỂM, NỘI DUNG VÀ PH ƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.5.1 Phương pháp nghiên cứu ngoài ñồ ng
3.5.1.1 Bố trí thí nghiệm
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………31 Công thức: gồm 15 dòng lưỡng dục
Kiểu bố trí: tuần tự không nhắc lại; khoảng cách gieo 0,9m x 0,2m x 1cây/hốc; diện tích 60m2/dòng (10 hàng/dòng).
* Thí nghiệm 2 - Khảo sát thời gian sinh trưởng và tình trạng phân ly cây bất dục của dòng lưỡng dục BD1:
Công thức: gồm 5 thời vụ gieo, vụ 1 gieo ngày 15/10/2007, thời vụ sau cách thời vụ trước 15 ngày. Tổng số hạt gieo 300 hạt/vụ với 100 hạt/ô. Tổng lượng hạt gieo cho 5 vụ: 1.500 hạt.
Kiểu bố trí: khối ñầy ñủ ngẫu nhiên, nhắc lại 3 lần. Diện tích ô: 20m2. Khoảng cách gieo 0,9m x 0,2m x 1cây/hốc.
* Thí nghiệm 3 - Nghiên cứu xác ñịnh mật ñộ gieo thích hợp trong nhân duy trì dòng lưỡng dục BD1:
Công thức: gồm 6 mật ñộ với 6 phương thức gieo như sau:
TT Ký hiệu Phương thức gieo Mật ñộ lý thuyết (cây/m2) 1 CT1 Hàng kép, (1m+0.3m) x 0,1m x 1 hạt/hốc 15,4 2 CT2 Hàng ñơn, 0,9m x 0,1m x 1 hạt/hốc 11,1 3 CT3 Hàng ñơn, 0,9m x 0,15m x 1 hạt/hốc 7,4 4 CT4 Hàng ñơn, 0,9m x 0,20m x 1 hạt/hốc 5,6 5 CT5 Hàng ñơn, 0,9m x 0,25m x 2 hạt/hốc 8,9 6 CT6 Hàng ñơn, 0,9m x 0,25m x 1 hạt/hốc (ð/C) 4,4 Kiểu bố trí: khối ñầy ñủ ngẫu nhiên (RCBD) nhắc lại 5 lần; Diện tích ô: 20m2.
* Thí nghiệm 4 - Nghiên cứu xác ñịnh tỷ lệ bố mẹ thích hợp trên ruộng sản xuất thử hạt giống bông lai cho tổ hợp lai BD1/D20-9:
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………32 Công thức: gồm dòng bố D20-9 và dòng mẹ lưỡng dục BD1 với công
thức tỷ lệ hàng bố : hàng mẹ tương ứng là 1:3; 1:4; 1:6 và 1:8.
Kiểu bố trí: khối ñầy ñủ ngẫu nhiên, nhắc lại 3 lần. Diện tích ô: 100m2. Khoảng cách gieo mẹ: 0,9m x 0,1m x 1cây/hốc (mật ñộ lý thuyết 11,1 cây/m2); khoảng cách gieo bố: 0,9m x 0,2m x 1cây/hốc (mật ñộ lý thuyết 5,5 cây/m2).
* Thí nghiệm 5 - ðánh giá hiệu quả của các phương thức thụ phấn khác nhau trong sản xuất thử hạt giống bông lai cho tổ hợp lai BD1/D20-9
Gồm 2 khu thí nghiệm cách nhau 1km theo ñường chim bay. Mỗi khu thí nghiệm gồm 2 công thức thụ phấn. Vật liệu giống là dòng mẹ lưỡng dục BD1 và dòng bố hữu dục D20-9 (tổ hợp BD1/D20-9). Tỷ lệ gieo bố mẹ chung là 1 hàng bố : 4 hàng mẹ. Khoảng cách gieo chung là 0,9m x 0,1m x 1 hạt/hốc. Tất cả các biện pháp kỹ thuật canh tác thực hiện như nhau. Quy mô và kiểu bố trí ñồng ruộng như sau:
Khu thí nghiệm 1:
Công thức: 2 công thức thụ phấn thủ công (0,2 ha) và thụ phấn nhờ ong và côn trùng (0,7ha).
Bố trí: ô lớn, chọn ô ñiều tra theo 5 ñiểm chéo góc/1 công thức. Riêng 3 ñiểm theo dõi lượt côn trùng vào hoa thuộc ô giữa và 2 ô ở góc xa (sơñồ dưới). Diện tích 1 ô: 100m2.
Sơñồ bố trí khu thí nghiệm 1:
Ô thụ phấn thủ công Ô thụ phấn nhờ ong và côn trùng
x x x x x x x x x 75m 40m 75m x
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………33
12 ñàn ong
(Ghi chú: 50m, 75m - khoảng cách từ ñàn ong ñến ñiểm theo dõi ong và côn trùng)
Khu thí nghiệm 2:
Công thức: 2 công thức thụ phấn thủ công (0,2 ha) và thụ phấn nhờ côn trùng (0,7ha).
Bố trí: ô lớn, chọn ô ñiều tra theo 5 ñiểm chéo góc/1 công thức. Diện tích 1 ô: 100m2.
Sơñồ bố trí khu thí nghiệm 2:
Ô thụ phấn thủ công Ô thụ phấn nhờ côn trùng
* Thí nghiệm 6 - Nghiên cứu sử dụng dòng mẹ lưỡng dục với tính kháng sâu và chỉ thị hình thái hoa thích hợp trong sản xuất hạt giống lai thụ phấn nhờ côn trùng.
Công thức lai: gồm dòng bố cho phấn D20-9 và 9 dòng mẹ lưỡng dục thuộc 3 nhóm như sau:
Kháng rầy xanh - Không kháng sâu - không ñốm
cánh hoa
Kháng rầy xanh - kháng sâu xanh - không ñốm
cánh hoa Kháng rầy xanh - kháng sâu xanh- có ñốm cánh hoa 1. K.TM1.1 4. G.VN36P 7. G.1247.4-2 2. KLRA.5166 5. G.1247.3-4 8. G.1247.4-3 3. KVN36P 6. G.557.S2-1 9. G.1247.11-6
Kiểu bố trí: khối ñầy ñủ ngẫu nhiên, nhắc lại 3 lần. Khoảng cách gieo
x x x x x x x x x x
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………34
0,9m x 0,1m x 1 hạt/hốc. Diện tích ô: 12 hàng x 10m x 0,9m x = 108 m2. Tỷ lệ gieo bố mẹ là 1 hàng bố : 4 hàng mẹ chung cho tất cả các dòng mẹ. Thụ phấn hoàn toàn nhờ côn trùng.
3.5.1.2 Phương pháp khử cây hữu dục
Trên các dòng mẹ bất dục ñực, khi có hoa ñầu tiên nở, tiến hành khử bỏ cây bất dục trong vòng 7 ngày, buộc dây ñánh dấu toàn bộ cây bất dục ñể lại.
3.5.1.3 Phương pháp cách ly, khửñực và thụ phấn
•Trên dòng mẹ bất dục ñực: vào chiều hôm trước, chấm sơn trên những nụ sẽ nở vào ngày hôm sau; sáng hôm sau hái hoa bố thụ phấn cho các hoa mẹ ñã ñánh dấu, ñồng thời chụp cách ly bằng ống nhựa và buộc dây ñánh dấu.
•Trên dòng mẹ hữu dục: vào chiều hôm trước, khửñực cho những nụ sẽ nở vào ngày hôm sau và ñánh dấu; sáng hôm sau hái hoa bố thụ phấn cho các hoa mẹ ñã ñánh dấu, ñồng thời chụp cách ly bằng ống nhựa và buộc dây ñánh dấu.
3.5.1.4. Phương pháp ñiều tra thành phần côn trùng trên ruộng sản xuất hạt lai
• ðiều tra trên mặt ruộng bông: theo phương pháp vợt nhanh, dùng vợt côn trùng vợt bắt tất cả các loài côn trùng có mặt trên ruộng bông vào buổi sáng. Mỗi kỳñiều tra vợt ngẫu nhiên theo 10 ñiểm, mỗi ñiểm 10m2. Thu mẫu và ghi nhận số lượng.
• ðiều tra trên cây bông: ñiều tra trên 30 cây, chia thành 10 ñiểm ngẫu nhiên rải ñều trong ruộng, mỗi ñiểm 3 cây. Thu bắt tất cả các loài côn trùng có mặt và ghi nhận số lượng của từng loài. Riêng côn trùng chích hút thì ñiều tra trên 3 lá ngọn ở thân chính trên cây.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………35
một công thức, mỗi ñiểm 10 hoa ñược ñánh dầu ngày hôm trước, dùng camera quan sát vào thời kỳ hoa rộ với thời gian quan sát 30 phút/lần, ghi loại côn trùng vào hoa.