Rút đầy mẫu vào chai BOD cú dung tớch 300 ml, trỏnh bọt bỏm trờn thành chai, đậy nỳt loại bỏ
mẫu thừa. ủ 5 ngày, tưới nước cất lờn nắp bỡnh vào mỗi buổi sỏng để trỏnh bọt khớ, sau đú phủ lờn bỡnh bằng giấy bỏo. Buồng ủ cú nhiệt độ 200C.
* Xỏc định DO5:
- Cho 2 ml dung dịch Mix I và 2 ml dung dịch Mix II vào mẫu sau khi ủ 5 ngày rồi đậy nỳt và lắc mạnh để phản ứng xảy ra hoàn toàn.
- Đợi kết tủa lắng yờn, cho thờm 2 ml H2SO4 98% rồi lắc mạnh để hũa tan hết kết tủa. - Dựng ống đong lấy 203 ml mẫu sau khi cho húa chất.
- Chuẩn độ bằng dung dịch Na2S2O3 0,025N tới lỳc mẫu chuyển sang màu vàng chanh thỡ cho thờm 1 - 3 giọt hồ tinh bột, sau đú lắc nhẹ và chuẩn độ tiếp cho đến khi mẫu bắt đầu mất màu.
- Ghi lại thể tớch Na2S2O3 (ml) đó dựng, thể tớch này đỳng bằng nồng độ DO5 (mg/l). - Tiến hành song song với một mẫu nước cất cú sục khớ bóo hũa.
* Xỏc định DO0:
Xỏc định giống DO5 nhưng làm trờn mẫu vừa lấy về khụng ủ (xỏc định ngay sau khi chuẩn bị
mẫu xong). Cụng thức tớnh:
D00– DO5
BOD5(mg/l) =
P
Chỳ ý: cứ 1 ml dung dịch Na2S2O3.H2O 0,025N tương ứng 0,2 mg DO nờn mỗi ml chuẩn độ tương ứng 1 mg DO/l khi mẫu nước ban đầu là 203 ml (1ml O2 = 0,7*1mg O2/l).
Trong đú:
DO0: nồng độ DO của hỗn hợp mẫu và dung dịch cấy trước khi ủ. DO5: nồng độ DO của hỗn hợp mẫu và dung dịch cấy sau khi ủ 5 ngày. P: V1/V2.
V1: thể tớch mẫu.
V2: thể tớch mẫu và dung dịch cấy.
2.4.3 Phương phỏp vi sinh
2.4.3.1 Phương phỏp định lượng vi sinh vật bằng phương phỏp đếm số khuẩn lạc trờn thạch đĩa [6, 19, 20, 21, 28] 19, 20, 21, 28]