Phần III đỐI TƯỢNG, đỊA đIỂM, NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.3.2.3.Phương pháp xác ựịnh số loại vi khuẩn.
- Các ựĩa thạch thường sau khi ựã ria cấy vi khuẩn, bồi dưỡng trong tủ ấm 37oC/24h, lấy ra quan sát hình thái, kắch thước và dạng khuẩn lạc. Từ ựó sơ bộ ựịnh loại vi khuẩn.
- Mỗi loại vi khuẩn, khi mọc trên môi trường có thể sẽ hình thành một loại khuẩn lạc có kắch thước, hình dáng và màu sắc riêng biệt như:
+ Staphylococcus: khuẩn lạc dạng S, rìa gọn, tròn, mặt lồi, láng bóng và có màu vàng rơm (nếu là Staphylococcus aureus).
+ Streptococcus: khuẩn lạc dạng S, nhỏ, màu hơi xám bóng.
+ Salmonella: khuẩn lạc dạng S, có thể khuẩn lạc dạng R, khuẩn lạc tròn trong sáng hoặc xám, nhẵn bóng, hơi lồi lên ở giữa.
+ E.coli: khuẩn lạc dạng S, có thể khuẩn lạc dạng R, khuẩn lạc tròn ướt, không trong suốt, màu tro, trắng nhạt hai ựầu.
Sau khi xác ựịnh ựược các loại khuẩn lạc khác nhau, mỗi loại khuẩn lạc lại tiến hành phiết kắnh, nhuộm Gram ựể xem hình thái, tắnh chất bắt màu và cấu trúc ựặc biệt của vi khuẩn như:
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ.. 37
+ Staphylococcus: bắt màu Gram (+), hình cầu, tụ lại hình chùm nho.
+ Streptococcus: bắt màu Gram (+), có hình cầu hoặc hình trứng, ựứng riêng lẻ hoặc thành chuỗi.
+ E.coli: bắt màu Gram (-), là trực khuẩn hình gậy ngắn 2 ựầu tròn.
+ Salmonella: bắt màu Gram (-), là trực khuẩn hình gậy ngắn, hai ựầu tròn.
Khuẩn lạc ựã ựược tách thuần khiết, cấy vào các môi trường phân lập ựể xác ựịnh tắnh chất mọc của chúng trong các môi trường này.
+ Môi trường Sapman : Staphylococcus khuẩn lạc to, rìa gọn. Nếu là tụ cầu gây bệnh thì môi trường biến thành màu vàng, tụ cầu không gây bệnh thì môi trường giữ nguyên màu ựỏ.
+ Môi trường Edwards medium: Streptococcus khuẩn lạc nhỏ, mặt hơi lồi, ướt mịn, rìa gọn.
+ Môi trường Brilliant green agar: E.coli làm môi trường biến màu vàng chanh. Salmonella làm môi trường có màu ựỏ.
- Cuối cùng cấy chuyển thạch máu giữ giống ựể giám ựịnh tiếp nếu có thể.
Toàn bộ quy trình thắ nghiệm: xác ựịnh số loại vi khuẩn có trong dịch tử cung lợn bình thường và bệnh lý rồi ựược kiểm tra tắnh mẫn cảm của vi khuẩn với kháng sinh và thuốc hóa học trị liệu từ ựó ựưa ra phác ựồ ựiều trị.