3.1 ðịa ủiểm và thời gian nghiờn cứu
ðề tài ủược tiến hành nghiờn cứu từ 7/2010 – 8/2011 tại một số ủịa ủiểm sau: Thu thập thành phần cụn trựng trờn ngụ và thiờn ủịch của chỳng tại cỏc kho, hộ kinh doanh ngụ tại cỏc chợ ủầu mối trờn ủịa bàn tỉnh Hưng Yờn. Một số nhà mỏy, cụng ty chế biến thức ăn chăn nuụi gia sỳc: Cụng ty cổ phần sản xuất và thương mại Hà Lan, Cụng ty TNHH thức ăn chăn nuụi Kiờn Hà, Cụng ty TNHH Hưng Phỏt, Nhà mỏy chế biến thức ăn chăn nuụi và thuỷ sản Thăng Long.
Thu thập mẫu ngụ bắp ở giai ủoạn cận thu hoạch ủược tiến hành tại Kim ðộng, Khoỏi Chõu – Hưng Yờn.
Những nghiờn cứu thực nghiệm và giỏm ủịnh liờn quan ủến nội dung của luận văn ủược tiến hành tại:
Chi Cục Bảo vệ thực vật tỉnh Hưng Yờn.
Phũng thớ nghiệm bộ mụn Cụn trựng - Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội.
3.2 Vật liệu, ủối tượng và dụng cụ nghiờn cứu
3.2.1 Vật liệu nghiờn cứu
- Ngụ hạt giống NK4300, NK66; ngụ bắp giống NK66 ủó ủược xử lý ở 60oC trong 2 giờ.
- Lỏ của cõy xoan, cõy ngải cứu, cõy bưởi ủược phơi khụ. - Tro bếp
3.2.2 ðối tượng nghiờn cứu
- Mọt ngụ Sitophilus zeamais Motschulsky - Thiờn ủịch của mọt ngụ
3.2.3 Dụng cụ, thiết bị, húa chất nghiờn cứu
- Bộ rõy sàng cụn trựng, tỳi nilon ủựng mẫu mọt, panh, chổi lụng nhỏ, hộp nhựa, ống nghiệm, ủốn pin, cồn, KOH, xylen...
- Kớnh lỳp soi nổi, kớnh hiển vi - Tủ sinh thỏi cụn trựng
- Tủ sấy, tủ ủịnh ụn, mỏy ủo ủộ ẩm hạt
- Khay, panh, ống nghiệm, bỳt lụng, chổi, ủốn pin, tỳi nilon, cồn, KOH, xylen…
3.3 Nội dung và phương phỏp nghiờn cứu
3.3.1 ðiều tra tỡnh hỡnh sõu mọt trong kho bảo quản ngụ tại Hưng Yờn
Chỳng tụi ủó tiến hành ủiều tra thành phần cụn trựng gõy hại và thiờn ủịch của chỳng tại 10 huyện, thành phố trong tỉnh Hưng Yờn
Phương phỏp lấy mẫu theo tiờu chuẩn Việt Nam (TCVN), kiểm dịch thực vật phương phỏp lẫy mẫu mó số TCVN 4731-89
+ Phương phỏp thu thập mẫu: ðiều tra theo nguyờn tắc 5 ủiểm chộo gúc, ủiều tra ủịnh kỳ 7ngày/lần. Mẫu ngụ ủược thu thập trực tiếp tại cỏc ủịa ủiểm ủiều tra, ủược ủựng bằng tỳi nilon và ghi nhón cỏc thụng tin cần thiết cú liờn quan. Sau ủú ủược mang về phũng thớ nghiệm cho riờng rẽ từng loại vào cỏc hộp nhựa cú nắp lưới ủể tiếp tục theo dừi cho ủến khi trưởng thành của sõu mọt hoặc thiờn ủịch vũ húa. Thu bắt trưởng thành ủể giỏm ủịnh và bảo quản. ðồng thời tại ủiểm ủiều tra, quan sỏt bằng mắt nơi sõu mọt thường tập trung như nền kho, gúc kho, kẽ nứt chõn tường, cỏc vật liệu kờ, lút hàng, bao bỡ và những nơi ẩm thấp, nơi cú nhiều hàng tồn ủọng lõu, mục nỏt. Dựng cỏc dụng cụ như ống hỳt cụn trựng, bỳt lụng, kẹp hoặc rõy sàng nhiều tầng, vợt ủể thu bắt cụn trựng.
- Thu bắt mọt cỏnh cứng: Dựng ống hỳt cụn trựng, bỳt lụng, kẹp gạt cụn trựng rơi vào miệng ống nghiệm rồi dựng bụng bịt ống nghiệm lại. Nơi cú nhiều ngụ bị hại dựng rõy nhiều cỡ ủể rõy, tỏch cụn trựng.
- Riờng ủối với ngài (Lepidoptera) khi thu bắt do chỳng cú tớnh bay ngược lờn phớa trờn. Do vậy chỳng tụi ủó ủặt ống nghiệm ủún ủầu rồi dựng bỳt lụng gạt nhẹ vào ống nghiệm. Ngoài ra, dựng vợt ủể thu bắt trưởng thành khi chỳng ủang bay hoặc ở vị trớ cao.
Cỏc mẫu sõu mọt trưởng thành ủược ủịnh loại căn cứ vào cỏc tài liệu sau: - Cụn trựng hại kho - Bựi Cụng Hiển (1995) [8]
Bộ mụn Cụn trựng - Trường ðại học Nụng nghiệp – Hà Nội Chỉ tiờu theo dừi:
+ ðối với cụn trựng cỏnh cứng mật ủộ từng loài ủược tớnh theo cụng thức sau: N1
X (con/kg) =
G x1000 Trong ủú: - X là mật ủộ loài mọt (con/kg)
- N1 là mọt cũn sống ủếm ủược (con) - G là khối lượng mẫu (gam)
+ ðỏnh giỏ ủộ thường gặp của ủối tượng nghiờn cứu (ủiều tra thực ủịa) Na
C =
N x100 Trong ủú: C: ðộ thường gặp loài a
Na: Số lượng mẫu thu cú loài a N: Tổng số mẫu thu
ðỏnh giỏ ủộ thường gặp theo phõn cấp của Vũ Quang Mạnh (2004) C >75% : Gặp rất nhiều (+ + + +)
C = 50 - 75% : Thường gặp (+ + + ) C = 25 - 50% : Gặp ớt (+ +)
C < 25% : Gặp rất ớt (+)
3.3.2 ðặc ủiểm hỡnh thỏi của mọt ngụ Sitophilus zeamais Motschulsky
Mọt Sitophilus zeamais ủược nuụi bằng ngụ cú thủy phần 13,5%, ủộ ẩm khụng khớ tương ủối 75%, nhiệt ủộ 300C . Ngụ hạt ủược dựng làm giỏ thể ủẻ trứng cho mọt trưởng thành cỏi, ngụ bột mịn ủược dựng làm giỏ thể cho ấu trựng của mọt ngụ. Quan sỏt, mụ tả màu sắc và ủo ủếm kớch thước của từng pha phỏt dục: trứng, sõu non, nhộng, trưởng thành (n = 30). ðo kớch thước (mm).
- Pha trứng: ủo chiều dài từ mộp trờn ủến mộp dưới theo hướng nhất ủịnh, chiều rộng phần rộng nhất.
- Pha sõu non ủẫy sức: ủo chiều dài và ủộ rộng ủo ở nơi rộng nhất của cơ thể. - Pha nhộng: ủo chiều dài, chiều rộng ở phần rộng nhất của cơ thể
- Dựng cụng thức thống kờ sinh học ủể tớnh trung bỡnh cỏc giỏ trị ủo ủược X = ∑ X i
n
Trong ủú: Xi: giỏ trị kớch thước cỏ thể thứ i n: Số cỏ thể ủo
X: kớch thước trung bỡnh kớch thước của từng pha phỏt dục
3.3.3 ðặc ủiểm sinh vật hoc của mọt ngụ Sitophilus zeamais
3.3.3.1 Thời gian phỏt dục của mọt ngụ Sitophilus zeamais
Nuụi mọt Sitophilus zeamais trờn thức ăn là ngụ cú thủy phần 13,5%, ủộ
ẩm khụng khớ tương ủối 75%. Ngụ hạt ủược dựng làm giỏ thể ủẻ trứng cho mọt
trưởng thành cỏi, ngụ bột mịn ủược dựng làm giỏ thể cho ấu trựng của mọt ngụ
ở ủiều kiện nhiệt ủộ 250C, 300C trong tủ sinh thỏi. Bố trớ thớ nghiệm theo
phương phỏp nuụi cỏ thể n =30. Theo dừi thời gian phỏt dục của từng pha: trứng, sõu non, nhộng, trưởng thành .
- Thời gian phỏt dục pha trứng: Quan sỏt hàng ngày ủến khi trứng nở. Thời gian phỏt dục pha này tớnh từ khi trứng ủược ủẻ ra cho ủến khi trứng nở.
- Thời gian phỏt dục pha sõu non: ủược tớnh từ khi trứng nở ra ủến tuổi sõu non húa nhộng.
- Thời gian phỏt dục pha nhộng: Pha nhộng ủược tớnh từ khi sõu non húa nhộng ủến lỳc nhộng húa trưởng thành.
- Thời gian phỏt dục của trưởng thành trước ủẻ: ủược tớnh từ lỳc nhộng húa trưởng thành, tiến hành ghộp ủụi thả và thả trong hộp nuụi. Quan sỏt hàng ngày cho ủến khi mọt ngụ ủẻ quả trứng ủầu tiờn thỡ ghi lại ủể ủỏnh dấu và kết thỳc vũng ủời.
Chỉ tiờu theo dừi:
Thời gian phỏt dục trung bỡnh cỏc pha tớnh theo cụng thức _ Σ Xi ni
X = N Trong ủú:
_
X: Thời gian phỏt dục trung bỡnh của từng pha Xi: Thời gian phỏt dục trung bỡnh của cỏ thể thứ i
ni: Số cỏ thể phỏt dục vào ngày thứ i N: Số cỏ thể theo dừi
Tớnh sai số theo cụng thức: X = X ± δ.t
n
3.3.3.2 Sức ủẻ trứng của mọt ngụ Sitophilus zeamais
* Ảnh hưởng của nhiệt ủộ ủến sức ủẻ trứngcủa mọt ngụ Sitophilus zeamais
Nuụi mọt theo phương phỏp nuụi cỏ thể ở ủiều kiện nhiệt ủộ phũng và ở 2 mức nhiệt ủộ 25 và 30oC, ẩm ủộ 70% trờn ký chủ là ngụ hạt. Hạt ngụ ủược xử lý nhiệt, sau ủú ủể thụng thoỏng 1 tuần rồi cho vào cỏc hộp nuụi mọt (mỗi hộp 50 gram). Bắt trưởng thành ủực và cỏi của mọt ng ụ mới vũ húa trong vũng 24 giờ, sau ủú thả vào trong hộp cú ngụ cho ghộp ủụi và nuụi riờng rẽ từng cặp theo
cỏc ủiều kiện nhiệt ủộ thớ nghiệm. Hàng ngày kiểm tra, thu và ủếm số lượng
trứng ủẻ ủược trờn mỗi cụng thức. Bố trớ thớ nghiệm với 15 cặp trưởng thành.
*Ảnh hưởng của thuỷ phần hạt ủến sức ủẻ trứng của mọt ngụ
Thớ nghiệm ủược tiến hành với 3 cụng thức: CT1: Ẩm ủộ hạt 11,5%
CT2: Ẩm ủộ hạt 13,5% CT3: Ẩm ủộ hạt 15,5%
Hạt ngụ ủược xử lý nhiệt, sau ủú ủược ủể ẩm trong lồng nuụi sõu. Hàng ngày tiến hành ủo thủy phần hạt, khi ủến ủộ ẩm thớ nghiệm thỡ cho vào hộp nuụi mọt. Mỗi hộp 50gram ngụ. Bắt trưởng thành ủực và cỏi của Mọt ngụ mới vũ húa trong vũng 24 giờ, sau ủú thả vào cỏc cụng thức thớ nghiệm cho ghộp ủụi và nuụi riờng rẽ từng cặp. Hàng ngày kiểm tra, thu và ủếm số lượng trứng ủẻ ủược trờn mỗi cụng thức. Bố trớ thớ nghiệm với 15 cặp trưởng thành.
*Ảnh hưởng của số cặp trưởng thành ủến sức ủẻ trứng của Mọt ngụ
Sitophilus zeamais
Thớ nghiệm ủược bố trớ theo cỏc cụng thức: 1 cặp; 3 cặp; 5 cặp; 7 cặp. Hạt ngụ ủược xử lý, sau ủú cho vào hộp nuụi mọt. Mỗi cụng thức 200 gram ngụ.
Thả vào trong mỗi hộp số cặp trưởng thành mới vũ hoỏ 1 ngày tuổi theo cỏc cụng thức thớ nghiệm. Hàng ngày kiểm tra, thu và ủếm số lượng trứng theo từng cụng thức. Thớ nghiệm nhắc lại 7 lần.
Chỉ tiờu theo dừi: