- PBS * Tiến hành:
4.4So sánh sử dụng một số phản ứng miễn dịch học ựể ựánh giá hiệu giá kháng thể trên gà sau khi tiêm vắc-xin
4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.4So sánh sử dụng một số phản ứng miễn dịch học ựể ựánh giá hiệu giá kháng thể trên gà sau khi tiêm vắc-xin
giá kháng thể trên gà sau khi tiêm vắc-xin
Ở ựây, chúng tôi sử dụng hai phương pháp huyết thanh miễn dịch ựể ựánh giá hiệu giá kháng thể trên gà sau khi tiêm vắc-xin là phản ứng ELISA gián tiếp và HI ựể so sánh hiệu quả xác ựịnh hiệu lực của vắc-xin và hiệu quả chẩn ựoán.
Kháng nguyên virus sử dụng cho phản ứng HI là virus ựược tăng sinh trong túi nhung niệu phôi gà 9 ngày tuổi.
Kháng nguyên sử dụng cho phản ứng ELISA gián tiếp là kháng nguyên hòa tan. Hàm lượng kháng nguyên hòa tan của virus cúm A/H5N1 thu ựược là 5,8 mg/ml, kháng nguyên có ựộ tinh khiết cao, ựảm bảo ựể phản ứng ELISA hoạt ựộng tốt (hình 4.6).
Hình 4.6. Hình ảnh ựiện di kháng nguyên hòa tan của virus cúm A/H5N1 trên gel SDS-PAGE
Huyết thanh sử dụng ựể so sánh hiệu quả ựánh giá hiệu giá kháng thể là huyết thanh của gà thu vào các tuần thứ nhất, thứ ba, thứ sáu và hai mươi
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 68
sau khi tiêm vắc-xin. Sở dĩ chúng tôi lựa chọn mẫu huyết thanh thu tại thời ựiểm này là vì hiệu giá kháng thể các lô gà ổn ựịnh trong tất cả các tuần trong tháng và ựều ựạt trên 7,1log2.
Với phản ứng ELISA, chúng tôi xác ựịnh ựược giá trị OD cut-off là 0,2 tại ựộ pha loãng kháng nguyên là 1/3.200.
Kết quả thể hiện trong ( Bảng 4.12.)
Bảng 4.12: Kết quả so sánh hiệu quả ựánh giá hiệu giá kháng thể của gà ựược tiêm vắc-xin (HI log2, ELISA ựộ pha loãng kháng thể)
Tuần 1 Tuần 2 Tuần 3 Tuần 4
Lô vắc-xin Giống gà