vộ ph−ểng phịp nghiến cụu
3.1. ậèi t−ĩng, ệỡa ệiÓm vộ thêi gian nghiến cụụ
3.1.1 ậèi t−ĩng nghiến cụu:
ậèi t−ĩng nghiến cụu cựa ệÒ tội lộ 10 bư ệùc gièng Brahman, cã nguăn
gèc tõ australia Ờ nhẺp thịng 6 nẽm 2009 vộ cã ệé tuữi tõ 20 thịng ệạn 22
thịng, khèi l−ĩng cể thÓ tõ 350kg ệạn 400kg.
3.1.2 ậỡa ệiÓm nghiến cụụ
TrỰm nghiến cụu vộ sờn xuÊt tinh ệềng lỰnh Moncada (Tờn Lỵnh- Ba Vừ - Hộ Néi).
3.1.3 Thêi gian nghiến cụu:
Tõ thịng 10 nẽm 2009 ệạn hạt thịng 10 nẽm 2010.
3.2 Néi dung nghiến cụu
3.2.1. ậịnh giị mét sè chử tiếu sè l−ĩng, chÊt l−ĩng tinh dỡch cựa bư ệùc gièng brahman óc. gièng brahman óc.
- ThÓ tÝch tinh dỡch (ml/lẵn) (V) - Năng ệé tinh trỉng (tũ/ml) (C) - HoỰt lùc cựa tinh trỉng (A) (%) - Chử tiếu tững hĩp (VAC)
- Mộu sớc tinh dỡch - pH tinh dỡch
- Tũ lỷ tinh trỉng kú hừnh (K) (%) - Tũ lỷ tinh trỉng sèng (%)
3.2.2. Khờ nẽng sờn xuÊt tinh ệềng lỰnh cựa bư ệùc gièng brahman óc
- Tử lỷ cịc lẵn khai thịc tinh ệỰt tiếu chuÈn (%)
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 32 chuÈn (liÒu/lẵn khai thịc)
- Sè l−ĩng tinh cảng ra sờn xuÊt/nẽm vộ tũ lỷ tinh cảng rỰ ệỰt tiếu chuÈn sau ệềng lỰnh(%)
3.2.3. ChÊt l−ĩng tinh sau giời ệềng vộ bờo quờn
3.3. Ph−ểng phịp nghiến cụu
3.3.1. Sể ệă nghiến cụu
Các bước nghiên cứu ựược thực hiện theo sơ ựồ sau:
3.3.2. Ph−ểng phịp ệịnh giị mét sè chử tiếu sè l−ĩng, chÊt l−ĩng tinh trỉng bư Brahman óc trỉng bư Brahman óc
+ ThÓ tÝch tinh dỡch: kiÓm tra bỪng quan sịt trến èng ệong cã chia vỰch khớc ml.
Bư ệùc gièng Brahman óc
Khai thịc tinh vộ nghiến cụu sè l−ĩng, chÊt l−ĩng tinh
Sờn xuÊt tinh ệềng lỰnh
Phẹn tÝch kạt quờ
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 33 + Mộu sớc tinh dỡch xịc ệỡnh bỪng quan sịt sau mẫi lẵn khai thịc tinh. + pH tinh dỡch ệo bỪng giÊy ệo pH cựa hgng Merck.
+ Năng ệé tinh trỉng ệịnh giị bỪng mịy so mộu Photometer SDM5 cựa hgng Minitub (ậục) (tũ/ml).
+ HoỰt lùc cựa tinh trỉng: KiÓm tra bỪng kÝnh hiÓn vi cã kạt nèi vắi mộn hừnh theo ph−ểng phịp cựa NhẺt Bờn.
+ Tũ lỷ tinh trỉng kú hừnh: KiÓm tra bỪng ph−ểng phịp nhuém mộu vộ ệạm trến kÝnh hiÓn vi khoờng 500 tinh trỉng, răi tÝnh theo phĐp tÝnh sè hảc thềng dông
Sè l−ĩng tinh trỉng kú hừnh
Tũ lỷ tinh trỉng kú hừnh(%) = x 100
500
+ Tũ lỷ tinh trỉng sèng, chạt (%) ệ−ĩc xịc ệỡnh bỪng cịch nhuém eosin 5%, tinh trỉng chạt lộ nhọng tinh trỉng bớt mộu, ệạm tững sè khoờng 500 tinh trỉng, răi tÝnh tũ lỷ % bỪng phĐp tÝnh sè hảc thềng dông.
Sè l−ĩng tinh trỉng sèng
Tũ lỷ tinh trỉng sèng(%) = x 100
500
+ Tững sè tinh trỉng sèng vộ tiạn thỬng trong mét lẵn lÊy tinh ệ−ĩc xịc ệỡnh bỪng tÝch cựa cịc chử tiếu VAC.
3.3.3. Khờ nẽng sờn xuÊt tinh ệềng lỰnh cựa bư ệùc gièng Brahman óc
- Tử lỷ cịc lẵn khai thịc tinh ệỰt tiếu chuÈn ệ−ĩc xịc ệỡnh bỪng cịch ghi chĐp vộ ệịnh giị tÊt cờ cịc chử tiếu vắi tinh t−ểi cựa tõng lẵn lÊy tinh răi tÝnh theo ph−ểng phịp sè hảc.
Sè lẵn khai thịc tinh
ệỰt tiếu chuÈn
Tũ lỷ cịc lẵn khai thịc tinh ệỰt tiếu chuÈn = x 100 Tững sè lẵn khai thịc tinh
- Sè l−ĩng tinh cảng rỰ sờn xuÊt ệ−ĩc trong mét lẵn khai thịc tinh ệỰt tiếu chuÈn (liÒu/lẵn khai thịc), lộ tững sè tinh cảng rỰ ệềng lỰnh ệ−ĩc sờn
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 34 xuÊt ra trong mét lẵn khai thịc tinh, ệ−ĩc xịc ệỡnh bỪng ph−ểng phịp ghi chĐp vộ thèng kế thềng dông.
- Tũ lỷ tinh cảng rỰ ệỰt tiếu chuÈn sau ệềng lỰnh (%)
Tũ lỷ tinh cảng rỰ ệỰt Tững sè tinh cảng rỰ ệỰt tiếu chuÈn sau ệềng lỰnh
tiếu chuÈn sau ệềng lỰnh = ừ 100
Tững sè tinh cảng rỰ sờn xuÊt
3.3.4. ChÊt l−ĩng tinh sau giời ệềng vộ bờo quờn
ChÊt l−ĩng tinh sau giời ệềng vộ bờo quờn ệ−ĩc ệịnh giị thềng qua hoỰt lùc tinh trỉng.
HoỰt lùc tinh trỉng sau giời ệềng, sau 6 vộ 12 thịng bờo quờn. Tinh cảng rỰ
ệ−ĩc lÊy ngÉu nhiến tõ 1 ệạn 2 cảng rỰ giời ệềng ẻ nhiỷt ệé 36oC ệạn 37oC,
thêi gian 30 giẹy theo tõng ngộy sờn xuÊt cựa tõng bư ệùc gièng vộ ệ−ĩc ệịnh giị bỪng kÝnh hiÓn vi cã kạt nèi vắi mộn hừnh.
3.3.5. Sờn xuÊt tinh bư ệềng lỰnh dỰng cảng rỰ
- ChuÈn bỡ ẹm ệỰo giờ: Cịc bé phẺn cựa ẹm ệỰo giờ ệ−ĩc khỏ trỉng, lớp
rịp vộ bờo quờn trong tự Êm 42oC tr−ắc khi khai thịc tinh.
- ChuÈt bỡ bư ệùc gièng Brahman khai thịc tinh: Bư ệùc gièng Brahman ệạn lỡch khai thịc tinh, ệẵu giê sịng ệ−ĩc ệ−a ra khu vùc chê khai thịc tinh, tớm chời sỰch sỳ bỪng n−ắc sỰch vộ thôt rỏa bao d−ểng vẺt bỪng n−ắc muèi sinh lý 0,9% tr−ắc khi lÊy tinh 30 phót.
- ChuÈn bỡ bư lộm giị vộ giị nhờy nhẹn tỰo: Chản bư lộm giị hoẳc giị nhờy thÝch hĩp vắi tõng bư ệùc gièng vộ vỷ sinh sỰch sỳ.
- Khai thịc tinh bỪng ẹm ệỰo giờ: KÝch thÝch tÝnh dôc cho bư ệùc gièng thẺt hẽng, răi cho nhờy giị vộ khai thịc tinh bỪng ẹm ệỰo giờ (chử khai thịc tinh mét l−ĩt). Sau khi thu nhẺn ệ−ĩc tinh dỡch tõ bư ệùc gièng trong lẵn xuÊt tinh, ng−êi lÊy tinh chuyÓn ngay vộo phưng sờn xuÊt ệÓ ệịnh giị cịc chử tiếụ
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 35 Mềi tr−êng pha logng tinh dỡch ệg ệ−ĩc pha chạ sơn theo cềng thục mềi tr−êng cựa NhẺt Bờn găm:
+ Mềi tr−êng A khềng cã glycerol (Tris, Citric axit, Lactose, Fructose,
Raffinose, n−ắc cÊt 2 lẵn, lưng ệá trụng gộ, Peniciline, Steptomycine) + Mềi tr−êng B (mềi tr−êng A + Glycerol).
Mềi tr−êng ệ−ĩc bờo quờn trong tự bờo quờn cã nhiỷt ệé 5oC. Tr−ắc khi
sỏ dông, mềi tr−êng ệ−ĩc lÊy ra vộ ệẳt vộo trong Autobath cã nhiỷt ệé 35oC
ệÓ cẹn bỪng nhiỷt ệé vắi nhiỷt ệé tinh dỡch. - Pha logng tinh dỡch.
+ Pha logng mềi tr−êng A vắi l−ĩng bỪng 50% tững l−ĩng mềi tr−êng
cẵn dỉng vộ bờo quờn ẻ nhiỷt ệé 5oC trong 1 ệạn 2 giê.
+ Pha logng vắi mềi tr−êng B bỪng ph−ểng phịp nhá giảt trong 3 giê. - In nhgn mịc lến vá cảng rỰ bỪng mịy in chuyến dỉng.
- NỰp tinh vộ hộn ệẵu cảng rỰ bỪng mịy tù ệéng.
- Cẹn bỪng glycerol ẻ 5oC, cịc cảng rỰ ệ−ĩc rời ệÒu mét lắp trến giị
chuyến dông vộ ệẳt trong buăng cã nhiỷt ệé 5oC trong 3 giê.
- ậềng lỰnh bỪng mịy ệềng lỰnh chuyến dông, tù ệéng ệiÒu khiÓn hỰ
nhiỷt ệé xuèng -196oC.
3.4. Ph−ểng phịp xỏ lý sè liỷu
Cịc sè liỷu thu ệ−ĩc xỏ lý trến Microsoft Excel vộ ph−ểng phịp so sịnh Turky trong phẵn mÒm Minitab 14.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 36