3. NỘI DUNG, NGHUYÊN LIỆU, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊU CỨU 29-
3.1.6. xuất giải pháp phòng chống dịch trong thời gian tới 30-
3.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.2.1. Nghiên cứu tình hình Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản
Trên cơ sở tài liệu lưu trữ tại Chi cục thú y tỉnh Nghệ An (Báo cáo về diễn biến tình hình dịch hàng ngày của Trạm thú y các huyện trong quá trình xảy ra Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở lợn), bằng các phương pháp nghiên cứu dịch tễ học (Nguyễn Như Thanh và cs, năm 2001 [16, 17]), tiến hành phân tắch ựể làm rõ:
- Tỷ lệ ốm, chết chung của toàn tỉnh, của từng huyện và của từng ựối tượng nghiên cứu (lợn nái, lợn thịt, lợn con theo mẹ).
Công thức tắnh toán:
Số lợn ốm Tỷ lệ ốm (%) =
Tổng ựàn lợn trong thời gian xảy ra dịch x 100
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... - 31 -
Tổng ựàn lợn trong thời gian xảy ra dịch Số lợn chết
Tỷ lệ tử vong (%) =
Tổng số lợn ốm trong thời gian xảy ra dịch x 100
3.2.2. Tìm hiểu một số chỉ tiêu sinh sản ở ựàn lợn nái sau dịch
Lập phiếu ựiều tra (theo Nguyễn Như Thành và cs, 2001 [16, 17]) và phỏng vấn trực tiếp chủ cơ sở chăn nuôi; thu nhận thông tin từ sổ sách ghi chép về kết quả phối giống, tình trạng sinh sản của từng nái, của từng trại ựể thu nhận thông tin và phân tắch ựể làm rõ ảnh hưởng của Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ựến một số chỉ tiêu sinh sản của nái hậu bị, nái mang thai, nái nuôi con và nái chờ phối trong ựàn xảy ra Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ựược giữ lại nuôi ựể sản xuất con giống.
3.2.3. Giám ựịnh virut gây Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản bằng phưong pháp RT-PCR (Quy trình chẩn ựoán Hội chứng rối loạn hô hấp và phưong pháp RT-PCR (Quy trình chẩn ựoán Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản, Trung tâm chẩn ựoán thú y TW, 2008).
- Phạm vi áp dụng: Quy trình ựược áp dụng ựể xét nghiệm phát hiện virut PRRS tại các phòng xét nghiệm chẩn ựoán bệnh ựộng vật thuộc Cục thú y.
Bệnh phẩm: huyễn dịch bệnh phẩm, huyết thanh hoặc dịch nổi tế bào sau khi phân lập virut.
Máy móc và nguyên liệu: - Hệ thống chiết tách ARN - Máy Realtime PCR - Bộ Micropipet các cỡ
- Kit chiết tách ARN (Qiagen hoặc Ambion Magmax)
- Kit RT-PCR: Qiagen one step RT-PCR kit (Cat No.210210) hoặc Invitrogen supercript III qRT-PCR kit (Cat No.12574-026).
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... - 32 -
* Cách tiến hành
- Chiết tách ARN: áp dụng theo quy trình của nhà sản xuất + Chuẩn bị master mix
Qiagen one-step Reagent RT-PCR kit Lượng (ộộộộl) Invitrogen SS3 Reagent qRT-PCR kit Lượng (ộộộộl) DW 10.5 DW 4.5
5x Reaction Mix 5.0 5x Reaction Mix 12.5
MgCl2 (25mM) 1.2 MgCl2 (25mM) 1.0
dNTP 0.8
PPP 1.5 PPP 1.5
Enzyme Mix 1.0 Enzyme Mix 0.5
- Cho 20 ộl master mix vào ống PCR
- Cho 5 ộl mẫu ARN vào ống PCR
- đặt ống PCR vào máy Realtime PCR - Chạy chương trình
- Chọn ựọc màu ở bước kéo dài + Chạy phản ứng.
Qiagen one-step Reagent Invitrogen SS3 Reagent
RT PCR RT PCR 500CỜ30m 500CỜ30m 950CỜ15m 40 x (95 0CỜ10s + 600CỜ50s) 950CỜ2m 40 x (95 0CỜ10s + 600CỜ50s)
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... - 33 -
*) đọc kết quả:
Xét nghiệm ựược công nhận khi:
- đối chứng dương tắnh cho giá trị Ct ựã biết (ổ2) - đối chứng âm tắnh không có Ct
- Mẫu ựược coi là dương tắnh khi có Ct ≤ 35 - Mẫu ựược coi là âm tắnh nếu không có Ct - Mẫu ựược coi là nghi ngờ nếu Ct ≥ 35
Danh mục và trình tự primer và probe
Modification Tên Primer/probe Sequence (5Ỗ-3Ỗ)
5Ỗ 3Ỗ
Probe TGT GGT GAA TGG CAC TGA TTG ACA FAM BHQ1
Forward ATG ATG RGC TGG CAT TCT None None
PRRS-1 (NA)
Reverse ACA CGG TGG CCC TAA TTG None None
Probe CCT CTG CTT GCA ATC GAT CCA GAC FAM BHQ1
Forward GCA CCA CCT CAC CCA GAC None None
PRRS-2 (EU)
Reverse CAG TTC CTG CGC CTT GAT None None
Probe CGCGTAGAACTGTGACAACAACGCTGA HEX BHQ1
Forward CCCAAGCTGATGACACCTTTG None None
PRRS- China (JVM)
Reverse AATCCAGAGGCTCATCCTGGT None None
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... - 34 -
Sau khi thu thập số liệu, tổng hợp sơ bộ ựược xử lý bằng phương pháp thống kê sinh học thông qua phần mềm Excel trên máy vi tắnh.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... - 35 -
4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.1. TÌNH HÌNH CHĂN NUÔI VÀ DỊCH BỆNH Ở đÀN LỢN NUÔI TRÊN đỊA BÀN TỈNH NGHỆ AN NĂM 2008 TRÊN đỊA BÀN TỈNH NGHỆ AN NĂM 2008
4.1.1. Tình hình chăn nuôi
đến tháng 3 năm 2008, tháng trước khi xảy ra Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản, tình hình chăn nuôi lợn của Nghệ An khá phát triển ở tất cả các huyện, thị xã và thành phố Vinh.
Số liệu thống kê tại bảng 4.1 cho thấy: Ở Nghệ An, người dân ựặc biệt chú trọng ựến việc chăn nuôi lợn nái, nhất là lợn nái ngoại ựể chủ ựộng nguồn cung cấp con giống tại chỗ. Vì thế ở tất cả các huyện, thị xã và thành phố Vinh, số lượng lợn nái chiếm tỷ lệ khá lớn. Tổng hợp chung toàn tỉnh là 17,86%. Thị xã Cửa Lò, tỷ lệ lợn nái so với tổng ựàn (7,59%) và thành phố Vinh (5,28%). Các huyện còn lại, tỷ lệ này rất cao: Yên Thành (22,23%), Nghi Lộc (21,20%), Nam đàn (20,38%), Diễn Châu (18,98%), Thanh Chương (17,34%), Hưng Nguyên (16,67%). Chắnh các ựịa phương nuôi lợn nái nhiều thì tỷ lệ lợn con theo mẹ trong tổng ựàn của từng huyện cũng rất lớn: Diễn Châu (52,60%), Yên Thành (48,76%), Nam đàn (30,65%), Nghi Lộc (33,15%), Thanh Chương (25,75%), Hưng Nguyên (25,18%), Quỳnh Lưu (16,80%). Tắnh chung toàn tỉnh tỷ lệ lợn con theo mẹ chiếm 26,90% tổng ựàn.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... - 36 -
Bảng 4.1. Tình hình ựàn lợn tắnh ựến cuối tháng 3 năm 2008 tại 9 huyện, thị xã và TP Vinh tỉnh Nghệ An
(Trước khi xảy ra Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản)
Trong ựó
Lợn nái Lợn con theo mẹ Lợn thịt
TT địa phương
Tổng ựàn lợn (Con)
Số con Tỷ lệ (%) Số con Tỷ lệ (%) Số con Tỷ lệ (%)
1 Diễn Châu 202.289 38.385 18,98 57.491 28,42 106.413 52,60 2 Yên Thành 241.509 53.698 22,23 79.715 33,01 108.096 44,76 3 Thanh Chương 130.414 22.615 17,37 33.598 25,76 74.201 55,89 4 Nam đàn 77.321 15.757 26,38 23.698 30,65 37.866 48,97 5 TP. Vinh 27.831 1469 5,28 2175 7,82 24.187 86,90 6 Hưng Nguyên 50.435 8411 16,67 12.699 25,18 29.325 58,14 7 Quỳnh Lưu 185.083 20.177 19,90 31.093 16,80 133.813 72,30 8 Nghi Lộc 100.829 21.379 21,20 33.424 33,15 46.026 45,65 9 TX. Cửa Lò 4938 375 7,59 3995 11,50 3995 80,90 Tổng hợp 1.020.649 182.266 17,86 274.461 26,90 563.922 55,25
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... - 37 -
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... - 38 -
4.1.2. Tình hình dịch bệnh chung ở ựàn lợn trên ựịa bàn tỉnh Nghệ An 6 tháng ựầu năm 2008
Chi cục thú y Nghệ An là một trong những chi cục chỉ ựạo tốt việc tiêm vacxin phòng bệnh truyền nhiễm nguy hiểm cho ựàn lợn của tỉnh. Tuy nhiên 6 tháng ựầu năm 2008, một số bệnh truyền nhiễm vẫn lẻ tẻ xảy ra ở ựàn lợn của từng huyện. Kết quả ựược tổng hợp trong bảng 4.2.
Từ số liệu trong bảng 4.2 cho thấy 6 tháng ựầu năm 2008, dịch bệnh làm cho lợn ốm, chết khá nhiều.
Toàn tỉnh có 4511 lợn ốm, chết 203 con (4,5%). Trong ựó ựàn lợn bị Hội chứng tiêu chảy chiếm tỷ lệ cao nhất (70,01%); bệnh tụ huyết trùng lợn (13,50%); bệnh phó thương hàn lợn (7,71%); Leptospirosis (3,62%).
Trong 6 tháng ựầu năm 2008, do ảnh hưởng của ựợt rét ựậm, rét hại từ cuối năm 2007 làm cho sức ựề kháng của lợn bị giảm, cơ hội cho nhiều loại vi sinh vật gây bệnh. Vì thế số lượng lợn của tỉnh Nghệ An bị ốm ở 3 tháng quý I năm 2008 chiếm tỷ lệ lớn trong tổng số lợn bị ốm của 6 tháng ựầu năm: tháng 1 (26,78%), tháng 2 (26,71%), tháng 3 (26,93%).
điều ựặc biệt quan tâm ở ựây là ngoài những bệnh ựã thống kê trong bảng 4.2, ựàn lợn của tỉnh Nghệ An còn bị Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản khá nghiêm trọng gây thiệt hại lớn cho người chăn nuôi.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... - 40 -
Bảng 4.2. Tổng hợp tình hình dịch bệnh ở ựàn lợn trên ựịa bàn tỉnh Nghệ An 6 tháng ựầu năm 2008
Tháng 1 Tháng 2 Tháng 3 Tháng 4 Tháng 5 Tháng 6 Tổng hợp TT Loại bệnh Số ốm (con) Số chết (con) Số ốm (con) Số chết (con) Số ốm (con) Số chết (con) Số ốm (con) Số chết (con) Số ốm (con) Số chết (con) Số ốm (con) Số chết (con) Số ốm (con) Tỷ lệ chết/∑ số ốm (%) 1 LMLM 8 - - - 1 - - - 23 - - - 32 0,71 2 Tụ huyết trùng 162 8 137 16 143 6 25 3 71 4 71 9 609 13,50 3 Phù ựầu lợn con - - - 8 2 - - 8 0,18 4 Phó thương hàn 136 5 85 12 92 1 - - 15 3 20 4 348 7,71 5 đóng dấu - - - - 67 - - - 67 1,48 6 Leptospirosis 31 11 19 1 21 3 19 8 36 5 19 4 145 3,62 7 Tiêu chảy 842 20 945 38 796 4 217 7 208 11 151 10 3159 70,13 8 Viêm phổi 29 3 14 1 37 1 - - - 80 1,77 9 Sốt chưa rõ nguyên nhân - - 5 1 58 2 - - - - - - 63 1,40
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... - 41 -
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... - 42 -
4.2. TÌNH HÌNH HỘI CHỨNG RỐI LOẠN HÔ HẤP VÀ SINH SẢN Ở đÀN LỢN NUÔI TRÊN đỊA BÀN TỈNH NGHỆ AN NĂM 2008
4.2.1. Nguyên nhân Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở lợn trên ựịa bàn tỉnh Nghệ An, ổ dịch ựầu tiên và diễn biến dịch
4.2.1.1. Nguyên nhân
Theo nhận ựịnh của Cục thú y và Cơ quan thú y vùng III: Dịch xảy ra ựầu tiên ở các tỉnh trong khu vực Bắc Trung Bộ (Hà Tĩnh và Thanh Hoá) từ giữa tháng 3/2008 nhưng do thú y cơ sở và UBND các xã không báo cáo kịp thời cho UBND huyện và ngành thú y mà ựể ựiều trị nên làm cho dịch phát tán ra nhiều nơi, lây lan rộng mới báo cáo cho thú y huyện và tỉnh.
Mặt khác trong giai ựoạn này giá lợn hơi tăng cao, giá thịt lợn chênh lệch lớn giữa vùng có dịch và vùng không có dịch, từ ựó lái buôn bằng nhiều cách ựã ựưa lợn và sản phẩm của lợn từ vùng dịch ra ngoài tiêu thụ. Lực lượng thú y không thể kiểm soát hết, do ựó làm dịch lây lan từ vùng này qua vùng khác, ựây là nguyên nhân cơ bản làm cho mầm bệnh phát tán, lây lan ra diện rộng.
Người chăn nuôi chưa hiểu hết về tắnh chất nguy hại của Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở lợn nên còn chủ quan trong công tác phòng, chống dịch, không khai báo khi lợn bị bệnh làm cho mầm bệnh tồn tại và phát tán.
đây là một bệnh mới nên cán bộ thú y cơ sở và người chăn nuôi còn nhầm lẫn với một số bệnh truyền nhiễm khác, nên ựã ựể ựiều trị làm mầm bệnh phát tán, lây lan.
Nghệ An là ựịa phương nằm giữa 2 tỉnh có dịch (Hà Tĩnh và Thanh Hoá) nên sự lây lan dịch vào ựịa phương là ựiều khó tránh khỏi.
4.2.1.2. Ổ dịch ựầu tiên và diễn biến
Ổ dịch ựầu tiên xảy ra tại xã Diễn Nguyên, huyện Diễn Châu từ ngày 04/04/2008, ựến 22/04/2008 ựã lây lan ra 81 phường, xã, thuộc 7 huyện, thành: Diễn Châu, Yên Thành, Thanh Chương, Nam đàn, Thành phố Vinh, Quỳnh Lưu và Hưng Nguyên.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... - 43 -
Riêng tại huyện Nghi Lộc: ngày 11 và 19/04/2008 phát hiện lợn ốm tại 2 xã Nghi Quang và Nghi Trường có các triệu chứng nghi Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản, BCđ PCD huyện ựã tổ chức tiêu huỷ 9 con lợn ựồng thời lấy mẫu bệnh phẩm gửi Cơ quan thú y vùng III và Trung tâm chẩn ựoán thú y TW xét nghiệm tìm căn bệnh. Tuy nhiên, theo trả lời kết quả xét nghiệm tại phiếu số: 32/CđXN-Cđ, ngày 12/04/2008 và số 48/CđCN-Cđ, ngày 20/04/2008 của Cơ quan thú y vùng III: Không phát hiện thấy virus gây PRRS trong 3 mẫu bệnh phẩm ựã kiểm tra. Sau ựó Chi cục thú y tỉnh ựã tiếp tục lấy mẫu bệnh phẩm ở lợn từ những ựàn có dấu hiệu của Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản gửi xét nghiệm. Kết quả xét nghiệm khẳng ựịnh sự có mặt của virut (Bảng 4.7).
Tình hình Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở ựàn lợn trên ựịa bàn tỉnh Nghệ An ựược trình bày chi tiết qua bản ựồ dịch tễ.
4.2.2. Tổng hợp chung tình hình Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở ựàn lợn nuôi trên ựịa bàn tỉnh Nghệ An, năm 2008
Từ số liệu tổng hợp trong bảng 4.3 cho thấy, tình hình Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản ở ựàn lợn nuôi trên ựịa bàn tỉnh Nghệ An năm 2008 khá phức tạp và lan rộng. Dịch ựã xảy ra ở 9/12 huyện, thị xã, thành phố (trừ đô Lương, Con Cuông, Quế Phong). Dịch phát sinh và lây lan trong ựàn lợn của 2541 gia ựình ở 371 thuôn thộc 127 xã trong tổng số 257 xã của 9 huyện, thị xã và thành phố với 8739 con lợn bị bệnh chiếm 0,86% tổng ựàn lợn hiện có trong thời gian xảy ra dịch; trong ựó so với tổng ựàn: lợn nái chiếm 0,1% (1067 con), lợn con theo mẹ chiếm 0,32% (3285 con); lợn thịt chiếm 0,43% (4387 con).
Xét riêng từng huyện, thị xã:
Tuỳ vào mật ựộ dân cư, ựiều kiện chăm sóc nuôi dưỡng, ựiều kiện vệ sinh thú y, phong tục tập quán và vai trò của chắnh quyền ựịa phương, hoạt ựộng của trạm thú y huyện và thú y cơ sở trong việc phòng chống dịch bệnh, quản lý tình hình dịch và hoạt ựộng giết mổ trong khi dịch xảy ra mà ựàn lợn của từng huyện,
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... - 44 -
thị xã, thành phố bị bệnh với các mức ựộ khác nhau. Bốn huyệnYên Thành, Diễn Châu, Thanh Chương và Quỳnh Lưu có phong trào chăn nuôi mạnh nhất, số lượng lợn nhiều nhất trong toàn tỉnh lại chắnh là những huyện có lợn bị Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản nặng nhất. Tỷ lệ lợn bị bệnh so với tổng ựàn lợn của 4 huyện này lần lượt là: 0,92%; 2,23%; 0,22% và 0,97%. Tỷ lệ lợn của từng huyện bị chết tương ứng là: 0,21%; 0,23%; 0,02% và 0,01%.
Nghi Lộc và thị xã Cửa Lò là 2 ựịa phương bị thiệt hại ắt nhất, chỉ có 7-9 con lợn thịt bị bệnh. Thành phố Vinh nơi chăn nuôi không nhiều nên chỉ có 3 lợn nái và 36 lợn thịt bị bệnh.
Nam đàn, Hưng Nguyên chăn nuôi ở mức trung bình nên thiệt hại do Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản không nặng nề, mặc dù có cả lợn nái, lợn con theo mẹ và lợn thịt bị bệnh nhưng tỷ lệ so với tổng ựàn của từng huyện không cao (0,19% và 0,11%).
Xét riêng từng ựối tượng lợn: - đàn lợn nái:
Lợn nái bị bệnh là thiệt hại nhất vì ựây là tài sản cố ựịnh. Tuy nhiên, tại Nghệ An, Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản xảy ra ựối với ựàn lợn nái giống không quá nghiêm trọng (0,1% tổng ựàn lợn nái nói chung). Trong các huyện có