3. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của ựề tài
3.3. đánh giá tỷ lệ sống và một số chỉ tiêu sinh trưởng của Lan Hồ ựiệp Phát
Phát quang và Lan Phượng vĩ sau nuôi cấy mô ở giai ựoạn vườn ươm
Giai ựoạn ựưa cây ra vườm ươm là giai ựoạn có ý nghĩa quan trọng và quyết ựịnh khả năng ứng dụng của toàn bộ quá trình vi nhân giống vào thực tiễn sản xuất của bất kỳ một loại cây trồng nàọ Quá trình chuyển cây từ môi trường sống nhân tạo hoàn toàn thuận lợi ra môi trường tự nhiên yêu cầu cây có thể sống trong ựiều kiện tự dưỡng hoàn toàn với nhiều yếu tố biến ựộng ảnh hưởng ựến sự sinh trưởng của cây như thời tiết khắ hậu, các loại giá thể. Chắnh sự thay ựổi ựột ngột về ựiều kiện sống như vậy mà việc ựưa cây ra ngoài (giai ựoạn sau ống nghiệm) gặp không ắt khó khăn trên lan Hồ ựiệp và Lan Phượng vĩ.
Do ựó ựề tài tiến hành xác ựịnh tỷ lệ sống và một số chỉ tiêu sinh trưởng của hai giống Lan Hồ ựiệp Phát quang và Lan Phượng vĩ sau 12 tuần ựưa cây ra vườn ươm. Kết quả ựược trình bày ở bảng 3.17
Qua bảng 3.17 cho thấy tỷ lệ sống của cả hai giống Lan là rất cao, thể hiện ựối với Lan Hồ ựiệp Phát quang tỷ lệ sống ựạt 86 % và Lan Phượng vĩ ựạt 80 %
Khả năng sinh trưởng của cả hai giống nghiên cứu ựược thể hiện rõ ở các chỉ tiêu số lá, chiều cao cây, số rễ và ựộ dài rễ. đối với Lan Hồ ựiệp Phát quang chiều cao cây ựạt 4,43 cm, ựộ dài rễ ựạt 5,60 cm và số rễ trung bình là 4,56. điều này cho thấy loại Lan này rất hợp khi nuôi trồng trong giá thể rong biển.
Với Lan Phượng vĩ chiều cao cây của thắ nghiệm ựạt 12,02 cm thể hiện là ựối tượng thân cao và sinh trưởng mạnh, tuy nhiên số rễ 4,50 rễ và ựộ dài rễ 3,45 cm và tỷ lệ sống là 80% - thấp hơn Lan Hồ ựiệp Phát quang trong ựiều kiện tương tự. Kết quả này cho thấy Lan Phượng vĩ và Lan Hồ ựiệp Phát quang khi ra ngôi trên nền giá thể rong biển có bổ sung Growmore (20:20:20) tuần / 1 lần là rất phù hợp.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 86 Sau thời gian 12 tuần ựối với Lan Phượng vĩ nên chuyển từ giá thể rong biển sang nền giá thể than củi, vỏ cây thông, hoặc bó vào thân cây ựể thoáng bộ rễ cho Lan Phượng vĩ phát triển, Lan Hồ ựiệp Phát quang cây khỏe rễ nhiều chùm cả chậu nên thêm rong biển và chuyển ra chậu to hơn.
Qua quá trình nghiên cứu trên chúng tôi cho rằng Lan Hồ ựiệp Phát quang và Lan Phượng vĩ khi nuôi cấy trong ống nghiệm ựưa ra ựiều kiện vườn ươm cho tỷ lệ sống cao, khả năng sinh trưởng tốt.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 87
Bảng 3.17 Tỷ lệ sống và một số chỉ tiêu sinh trưởng của cây Lan Hồ điệp Phát Quang và Lan Phượng Vĩ sau 12 tuần theo dõi
Lan Hồ điệp Phát Quang Lan Phượng Vĩ
Thời gian Tỷ lệ sống (%) Số lá (lá/cây) Chiều cao cây (cm) Số rễ (rễ/ cây) độ dài rễ (cm) Tỷ lệ sống (%) Số lá (lá/cây) Chiều cao cây (cm) Số rễ (rễ/ cây) độ dài rễ (cm) Tuần 1 100 400 2,50 4,04 3,34 100 6,02 5,01 5,17 4,04 Tuần 4 97,5 4,05 3,05 3,40 3,01 98,0 6,40 5,46 3,42 2,30 Tuần 8 95,0 5,60 3,98 4,50 4,78 84,0 6,02 7,89 3,78 3,03 Tuần 12 86,0 5,87 4,43 4,57 5,66 80,0 5,05 12,02 4,50 3,45 CV(%) 0,40 1,50 0,60 0,40 0,30 0,30 0,40 0,60 LSD(0,05) 037 0,60 0,45 0,29 0,33 0,43 0,31 0,36
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 88
Ảnh 3.7. Lan Phượng vĩ cây nuôi cấy mô sau giai ựoạn ống nghiệm
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 89
Ảnh 3.9. Lan Hồ ựiệp Phát quang cây nuôi cấy mô sau giai ựoạn ống nghiệm
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 90 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 Chiều cao cây(cm)
Tuần 1 Tuần 4 Tuần 8 Tuần12
Thời gian
Chiều cao cây (PQ) Chiều cao cây (PV)
Biểu ựồ 3.13. Tốc ựộ sinh trưởng của cây sau 12 tuần theo dõi
0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 Số lá/cây
Tuần 1 Tuần 4 Tuần 8 Tuần12
Thời gian
Số lá /cây (PQ) Số lá /cây (PV)
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 91 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 Số rễ/cây
Tuần 1 Tuần4 Tuần 8 Tuần 12
Thời gian
Số rễ (rễ/cây) Số rễ (rễ/cây)
Biểu ựồ 3.15. Số rễ trung bình / cây sau 12 tuần theo dõi
0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 độ dài rễ(cm )
Tuần 1 Tuần 4 Tuần 8 Tuần 12
Thời gian
độ dài rễ (PQ) độ dài rễ (PV)
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 92
KẾT LUẬN VÀ đỀ NGHỊ
1. Kết luận
Trên cơ sở các kết qủa nghiên cứu, chúng tôi rút ra một số kết luận sau ựây: - Thành phần môi trường cho hệ số nhân tối ưu ựối với Lan Hồ ựiệp Phát quang là : VW +20g đường +7 Agar + 0,2g Than hoạt tắnh + 50g Khoai Tây + 40 ml Cà Chua cho hệ số nhân ựạt cao nhất là 3,03 lần.
đối với Lan Phượng vĩ trên nền môi trường: VW + 20g đường +7g Agar + 0,2g Than hoạt tắnh + 0,5mg BAP +0,03mg α- NAA, tạo sự kắch chồi và cho hệ số nhân cao nhất là 6.46 lần.
- Thành phần môi trường cho Lan Hồ ựiệp Phát quang ra rễ tạo cây hoàn chỉnh là: VW +20g đường +7 Agar + 0,2 g Than hoạt tắnh + 0,07 mg α- NAA +50 g Khoai Tây + 20g Chuối Xanh, ựạt tỷ lệ ra rễ là 85,5%, số rễ/cây lớn nhất 4,58 với ựộ dài rễ là 3,49cm. đối với Lan Phượng Vĩ ra rễ tạo cây hoàn chỉnh là: VW + 20g đường +7g Agar + 0,2 g Than hoạt tắnh + 0,05 mg α - NAA + 50 g Khoai Tây + 20 g Cà Rốt, ựạt tỷ lệ ra rễ cao nhất là 96,2%, số rễ/ cây lớn nhất là 5,17, ựộ dài rễ là 4,05 cm.
- Giai ựoạn sau nuôi cấy mô ựưa ra trồng ở vườn ươm trên nền giá thể rong biển và phân bón Growmore (20:20:20) 7 ngày/lần. Với Lan Hồ ựiệp Phát quang cho tỷ lệ sống ựạt 95,0%, cây sinh trưởng tốt, chiều cao cây 4,43cm, ựộ dài rễ ựạt 5,60 cm và số rễ trung bình là 4,50. Lan Phượng vĩ có chiều cao cây ựạt 12,02 cm, số rễ 4,50 rễ, ựộ dài rễ 3,45 cm và tỷ lệ sống là 80% .
2. đề nghị
Tiếp tục nghiên cứu chế ựộ chăm sóc bón phân và các biện pháp kỹ thuật khác cho Lan Hồ ựiệp Phát quang và Lan Phượng vĩ ở giai ựoạn vườn ươm, nhằm hoàn thiện quy trình nhân nhanh hai giống lan này phục vụ sản xuất và tiêu dùng.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 93
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt
1. Lê Văn Chi (1992). Cách sử dụng chất ựiều hoà sinh trưởng và vi
lượng ựạt hiệu quả caọ Nhà xuất bản KHKT. Tr. 13 Ờ 14
2. đinh Xuân Dực (2003). Nghiên cứu ựặc ựiểm sinh trưởng phát triển và kỹ thuật nhân giống. gây trồng một số giống phong lan Hồ điệp tại Hà Tây. luận văn thạc sỹ Nông Nghiệp
3. Trần Hợp (1990). Phong lan Việt Nam. Tập 1.2. Nhà xuất bản Khoa học và Kỹ thuật. Tr. 68 Ờ 92
4. Trần Hợp (2001). Phong lan Việt Nam. NXB nhà xuất bản khoa hoc kỹ thuật. 5. Hoàng Xuân Lam (2006). Nghiên cứu một số biện pháp kỹ thuật nhằm
tăng năng suất. phẩm chất một số giống hoa phong lan Hồ ựiệp nhập nội. luận văn thạc sỹ nông nghiệp. đại học Nông Nghiệp Hà Nộị
6. Phan Thúc Huân (1989). Hoạ lan. cây cảnh và vấn ựề phát triển sản xuất.
kinh doanh. xuất khẩụ Nhà xuất bản thành phố Hồ Chắ Minh. Tr. 38 -46
7. đồng Văn Khiêm (1995). ỘTiếp thị sinh vật cảnh. hoa cây cảnh Việt
Nam và thị trường thế giớiỢ. Việt Nam hương sắc. Số 25.Tr. 22
8. Nguyễn Thị Kim Lý (2009) Hoa và cây cảnh. Nhà xuất bản Nông nghiệp. Hà Nộị 28 -47
9. Nguyễn Thị Kim Lý và CS (2009) Kết quả nghiên cứu chọn tạo giống
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 94 10. Phạm Thị Liên (2001). Nghiên cứu ựánh giá và phát triển một số giống
ựịa lan ở Miền Bắc Việt Nam. luận án tiến sỹ nông nghiệp. Viện khoa
học Nông Nghiệp Việt Nam
11. Hoàng Thị Nga (2000). Nghiên cứu ứng dụng phương pháp nuôi cấy lát
mỏng tế bào trong nhân nhanh một số giống hoa lan. luận văn thạc sỹ
Nông Nghiệp
12.Dương Tấn Nhựt và CS (2008) Kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào lớp mỏng ựể nhân nhanh một số giống hoa Lan. Báo cáo hội nghị CNSH toàn quốc 2008 13. Nguyễn Công Nghiệp (2000). Trồng hoa lan. NXB trẻ
14. Lê Minh Nguyệt (2009). Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường và chất ựiều hòa sinh trưởng ựến khả năng tái sinh và nhân nhanh giống Hoàng Lan thuộc chi Lan Kiếm Cymbidium
15. Vũ Thị Phượng (2005). Nghiên cứu hiện trạng sản xuất hoa Lan và một số biện pháp kỹ thuật nuôi trồng lan Hồ điệp ở Hà nội và một số vùng
phụ cận. luận văn thạc sỹ nông nghiệp. đại học Nông nghiệp Hà Nội
16. Trần Duy Quý (2005). Sổ tay người Hà Nội chơi lan. NXB Nông Nghiệp Hà Nộị 198 trang
17. Nguyễn Quang Thạch. Nguyễn Thị Lý Anh. Hoàng Thị Ngạ Nguyễn Xuân Trường. đỗ đăng Vịnh (2003). Nghiên cứu xây dựng Quy Trình
nhân giống và nuôi trồng phong lan Phalaenopsis. Báo cáo tại hội nghị
sinh học toàn quốc.
18.Nguyễn Quang Thạch. Nguyễn Thị Lý Anh. Nguyễn Lâm Hải; Kỹ thuật chọn tạọ nhân giống và nuôi trồng Lan Hồ điệp. NXB Nông Nghiệp 2005. 96 trang
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 95 19.Nguyễn Hạc Thúy (2001). Cẩm nang sử dụng chất dinh dưỡng cho cây
trồng và phân bón cho năng suất cao. NXB Nông Nghiệp Hà Nội
20. Nguyễn Minh Trực (1996). Sâu bệnh hại hoa lan. Nhà xuất bản Nông nghiệp. Tr. 62.
21.Nguyễn Văn Uyển (1993). Nuôi cấy mô thực vật phục vụ công tác giống
cây trồng. NXB Nông nghiệp. Tr. 19.
22. đỗ Năng Vịnh (2005). Công nghệ tế bào thực vật ứng dụng. NXB Nông Nghiệp. Hà Nội
23.đỗ Năng Vịnh. Hà Thị Thúỵ Nguyễn Thị Hồng Vân; Ứng dụng nuôi cấy mô tế bào lớp mỏng và Biorector ựể nhân nhanh một số giống hoạ cây dược liệu có giá trị. Báo cáo hội nghị CNSH toàn quốc 2008.
Tiếng Anh
24.Anderson W.C (1980). Culture initiation and shoot multiplication in
plant tissue culturẹ Theory and Practicẹ p. 69 Ờ72.
25.Duan. -J. X.; Chen. -H.; Yazawạ -S. (1996). ỘIn vitro propagation of Phalaenopsis culture of cytokinin-induced nodesỢ. Journal-of-plant-
growth-regulation (USA): 133-137.
26.Griesbach. -RJ (1984). ỘThe in vivo propagation of Phalaenopsis orchidsỢ. American-Orchid-Society-Bulletin: 1303-1305.
27.Họ -KK; Yeoh. -H-H; Hew. -CS (1983). ỘThe presence of phytosynthetic machinery in aerial roots of leafy orchidsỢ Plant-and-
Cell-Physiology: 1317-1321.
28. Hụ-KK; Yeoh.-H-H; Hew.-cs (1983). ỘThe presence of photosynthetic machinery in aerial roots of leafy orchidsỢ Plant Ờ and cell physiologỵ
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 96
29. Kukulczankạ-K (1985). ỘEffect of Biostimin on growth of meristematic tissue and protocorm formation of some orchids in in vitro cultureỢ. American Ờ Orchid Ờ Society Ờ Bulltin 55:
30.Murashige T. (1974). ỘPlant propagation through tissuses culturẹ AnnỢ
Rev Phisiol 5. p.166 Ờ 733.
31.Waes. -J-Van; Geest. -S-De (1983). Disa uniflora Berg Ộa terrestrial orchid propagated in vitroỢ Revue-de-lỖAgriculture: 1415-1432.
32. Wang. -Ỵ T. (1995). ỘPhalaenopsis orchid light requirement during the induction of spikingỢ. HortScience-: -a-publilication-of-the-American-
Society-for-Horticultural-Science (USA): p.59-61.
33. Waes.-JM-Van; Debergh.-PC (1986). ỘIn vitro germination of some Westesn European orchidsỢ Physiologia Ờ Plantarum. 67:2. p.253 Ờ 261.
Tài liệu trên internet
34. http://www.chononghiep.com.forum.aspx?g=posts&t=218 35. http://www.congnghemoịcom.vn 36.http://www.dalat.gov.vn/rauhoadl/DesktopDefault.aspx?tabid=73&Mid =673&ItemID=14 37. http://www.hochiminhcitỵgov.vn 38.http://www.rauquavietnam.vn/default.aspx?tabID=5&ID=7&LangID=1 &NewID=28
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 97
PHỤ LỤC
Thành phần môi trường Vacin and Went
Các khoáng chất mg/l môi trường
Ca3(PO4)2 200 KH2PO4 250 (NH4)2SO4 500 MgSO4.7H2O 250 MnSO4.H2O 5.7 KNO3 525 Na2EDTA 37,3 FeSO4.7H2O 27.8 PH : 5 Ờ 5.3
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 98
Sơ ựồ nhân nhanh Lan Hồ ựiệp Phát quang
Thể chồi Protocorm
Giai ựoạn nhân nhanh
VW + 0,6mgBAP + 0,05mg α Ờ NAA - Sau 8 tuần hệ số nhân ựạt
2,73 chồi
VW + 50g KT+ 40ml CC - Sau 8 tuần hệ số nhân ựạt 3,03 chồi
Chất đTST Hợp chất hữu cơ
Giai ựoạn tái tạo cây hoàn chỉnh
VW+50KT+20 CX+0,07 α- NAA - Tỷ lệ ra rễ ựạt 85,5%, số rễ 4,58chiếc và
ựộ dài rễ là 3,49cm sau 8 tuần
Giai ựoạn vườn ươm, giá thể rong biển, phân bón Growmore (20:20:20)
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 99
Sơ ựồ nhân nhanh lan Phượng vĩ
Thể chồi Protocorm
Giai ựoạn nhân nhanh
VW + 0,5mg BAP + 0,03 mg α - NAA, hệ số nhân ựạt 6,46 lần sau 8 tuần VW + 30g KT+ 30 ml ND,hệ số nhân ựạt 5,56 lần sau 8 tuần Chất đTST Hợp chất hữu cơ
Giai ựoạn tái tạo cây hoàn chỉnh
Giai ựoạn vườn ươm, giá thể rong biển, phân bón Growmore
(20:20:20) tuần / 1lần
VW+30g KT+20gCR+0,05mg α -NAẠ Tỷ lệ ra rễ ựạt 96,2%, số rễ
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 100
BALANCED ANOVA FOR VARIATE PQHSN(BA FILE XLYNHAN1 30/ 9/** 11:37
--- PAGE 1 VARIATE V003 PQHSN(BA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= 1 CT$ 7 8.26766 1.18109 13.96 0.000 3 2 LN 2 .523300 .261650 3.09 0.076 3 * RESIDUAL 14 1.18430 .845928E-01 --- * TOTAL (CORRECTED) 23 9.97526 .433707 --- BALANCED ANOVA FOR VARIATE PVHSN(BA FILE XLYNHAN1 30/ 9/** 11:37
--- PAGE 2 VARIATE V004 PVHSN(BA LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= 1 CT$ 7 43.2863 6.18375 35.82 0.000 3 2 LN 2 .752500 .376250 2.18 0.149 3 * RESIDUAL 14 2.41710 .172650 ---