3. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.5.3.Cách thức bổ sung vi khuẩn vào các nghiệm thức
Có hai phương pháp bổ sung vi khuẩn vào bể ương ấu trùng cá chẽm: - Phương pháp 1:Bổ sung vi khuẩn trực tiếp vào môi trường nước trong bể ương:
+ Mật độ vi khuẩn trong bình nuôi cấy được xác định bằng cách đo quang (OD) bằng máy quang phổ ở bước sóng 600nm. Công thức tính như sau:
Ngày
2 10 15 30
Ăn luân trùng giàu hóa 2 lần/ngày, mật độ 10-20ct/ml, thay 20-30% nước
0
Bổ sung tảo (105 tb/lít), 500 lít/12 bể
Ăn Artemia giàu hóa 2 lần/ngày, mật độ 4 – 5ct/ml, thay 50-60% nước
Mật độ vi khuẩn = 1,02 x 109 x OD600 (CFU/ml)
+ Mật độ mỗi chủng vi khuẩn cần bổ sung vào bể ương : 5 x 104 CFU/ml. Bổ sung vào bể trước khi cho trứng vào ấp. Sau đó bổ sung 2 ngày 1 lần.
+ Công thức tính thể tích dịch vi khuẩn cần thiết bổ sung vào mỗi bể: Thể tích vi khuẩn bổ sung (ml) = Thể tích bể nuôi (ml) x 5 x 104 CFU/ml
Mật độ vi khuẩn (CFU/ml)
- Phương pháp 2: Bổ sung vi khuẩn gián tiếp vào bể ương thông qua giàu hóa thức ăn tự nhiên:
* Giàu hóa vi khuẩn cho luân trùng (Rotifer):
+ Tính toán số lượng luân trùng cần thiết của mỗi nghiệm thức của 1 lần cho ăn để tiến hành thu luân trùng và làm giàu vi khuẩn trong 10 lít/nghiệm thức.
+ Mật độ vi khuẩn làm giàu thông qua luân trùng là: 5 x 107 CFU/ml (tính trên thể tích luân trùng sau khi thu).
+ Thể tích vi khuẩn cần thiết để làm giàu đối với mỗi nghiệm thức là V (ml)
V (ml) = 5 x 107 x thể tích luân trùng sau khi thu x 103/ Mật độ vi khuẩn.
+ Thời gian giàu hóa Rotifer: trong 2 giờ (có sục khí). * Giàu hóa vi khuẩn cho Artemia:
+ Artemia sau khi nở khoảng 6 - 8 giờ thì tiến hành giàu hóa vi khuẩn (lúc này ấu trùng Artemia đã mở miệng).
+ Tính toán số lượng Artemia cho ăn cần thiết của mỗi nghiệm thức. Thu và cho vào 3 bình khác nhau tương ứng với 3 nghiệm thức. Thể tích giàu hóa Artemia trong mỗi bể làm giàu là 30 lít/nghiệm thức.
+ Mật độ vi khuẩn làm giàu thông qua Artemia là: 5 x 107 CFU/ml (tính trên thể tích Artemia trong bể làm giàu).
+ Thể tích cần thiểt để làm giàu đối với mỗi nghiệm thức: Tương tự như làm giàu thông qua luân trùng.
+ Thời gian giàu hóa Artemia: Trong 2 giờ (có sục khí).
Chú ý: Thời gian giàu hóa A1 – DHA Selco cho luân trùng và Artemia dài hơn thời giàu hóa vi khuẩn cho chúng, nên trong thí nghiệm chúng tôi tiến hành giàu hóa song song theo sơ đồ sau:
Hình 3: Sơ đồ làm giàu luân trùng và Artemia