Thỏ sau khi vận chuyển từ trại chăn nuơi Suối Dầu, được cách ly và cho nghỉ
trong thời gian 3 ngày. Cân theo dõi trọng lượng trước khi gây miễn dịch, trọng lượng thỏ 2,5 kg là đạt yêu cầu.
Quá trình gây miễn dịch thỏ thu kháng thể kháng ovalbumin gồm 4 mũi tiêm, mỗi mũi cách nhau 10 ngày. Kháng nguyên ovalbumin hồ tan trong nước muối sinh lí, trộn thêm tá chất, lắc trên máy lắc trong thời gian 30 phút đến khi dung dịch đồng nhất. Sau đĩ đem tiêm cho thỏ. Nồng độ ovalbumin tăng dần theo thứ tự các mũi tiêm (từ mũi 1 đến mũi 4).
Sơđồ gây miễn dịch thỏđược miêu tảở hình 2.1.
Hình 2.1. Sơđồ miễn dịch
Sau khi tiêm mũi thứ hai và ba 7 ngày, lấy máu tĩnh mạch tai thỏ kiểm tra hiệu giá kháng thể bằng phương pháp khuyếch tán kép trên thạch (Ouchterlony). Nếu hiệu giá đạt yêu cầu sẽ lấy máu tồn bộ thu huyết thanh miễn dịch, nếu khơng
đạt phải tiêm nhắc lại để cho đáp ứng kháng thể đạt yêu cầu. Sơ đồ lấy máu thỏ được miêu tảở hình 2.2. Hình 2.2. Sơđồ lấy máu T1 T2 T3 T4 M27 M37 M40 M17 Mũi 3 (Ngày +20) Ovalbumin 0,75 mg/ml Pha với tá chất FIA (1:1) Vị trí tiêm: 1ml đùi phải, 1ml tiêm dưới da lưng chia thành 5 điểm tiêm
Mũi 1 (Ngày 0)
Ovalbumin 0,25 mg/ml Pha với tá chất FCA (1:1) Vị trí tiêm: 1ml đùi phải, 1ml tiêm dưới da lưng chia thành 5 điểm tiêm
Mũi 4 (Ngày +30)
Ovalbumin 0,1g/ml Pha với tá chất FIA (1:1) Vị trí tiêm: 1ml đùi trái, 1ml tiêm dưới da lưng chia thành 5 điểm tiêm
Mũi 2 (Ngày +10)
Ovalbumin 0,5mg/ml Pha với tá chất FIA (1:1) Vị trí tiêm: 1 ml đùi trái, 1 ml tiêm dưới da lưng chia thành 5
điểm tiêm
Ngày -3 cách ly thỏ, ổn
Chú thích hình 2.2:
Ti :Mũitiêm kháng nguyên ovalbumin thứ i Mj : Mẫu máu lấy vào ngày thứ j
M17 : Lấy máu sau khi tiêm mũi thứ hai 7 ngày (ngày thứ 17) M27 : Lấy máu sau khi tiêm mũi thứ ba 7 ngày (ngày thứ 27) M37 : Lấy máu sau khi tiêm mũi thứ tư 7 ngày (ngày thứ 37) M40 : Lấy máu tồn bộ sau khi tiêm mũi thứ tư