2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIấN CỨ U
3.2.3.Phương phỏp nghiờn cứu trong nhà lưới
3.2.3.1. Phương phỏp nhõn sinh khối nấm sử dụng trong thớ nghiệm lõy bệnh nhõn tạo.
Dựng hỗn hợp 10g trấu, 10g cỏm, 20ml nước cất cho vào tỳi nilon hấp khử trựng 2 lần. Sau ủú ủể nguội, mỗi tỳi cấy từ 2-3 miếng thạch cú kớch thước khoảng 1x1cm. Sau 14 ngày cú thể sử dụng ủể lõy bệnh.
3.2.3.2 Phương phỏp lõy bệnh nhõn tạo.
Nấm sau khi ủược nhõn sinh khối trong mụi trường trấu, cỏm ủược trộn
ủều trờn lớp ủất mặt. Tuyến trựng tuỳ theo từng cụng thức ủược ủưa vào trong ủất, vị trớ lõy nhiễm là sõu 2,5cm cỏch gốc 1cm. Tuyến trựng (số lượng con/kg ủất) và nấm (g sinh khối) ủược ủưa vào cựng một thời ủiểm.
Cỏc thớ nghiệm tiến hành:
Thớ nghiệm 4: Xỏc ủịnh mối tương quan giữa tuyến trựng nốt sưng Meloidogyne incognita và nấm Sclerotium rolfsii trờn giống cà chua DV 1234.
CT1: ðối chứng (khụng lõy nhiễm).
CT2: 3000 tuyến trựng tuổi 2, trứng+0g nấm S.rolfsi
CT3: 10g sinh khối nấm S. rolfsii+ 0 tuyến trựng
CT4: 1000 tuyến trựng tuổi 2, trứng+15g sinh khối nấm S. rolfsii
CT5: 2000 tuyến trựng tuổi 2, trứng+15g sinh khối nấm S. rolfsi
CT6: 3000 tuyến trựng tuổi 2, trứng+15g sinh khối nấm S. rolfsi CT7: 3000 tuyến trựng tuổi 2, trứng+5g sinh khối nấm S. rolfsii
CT8: 3000 tuyến trựng tuổi 2, trứng+10g sinh khối nấm S. rolfsii
Cỏc giống cà chua ủược trồng trong chậu, sau 5 - 7 tuần khi cõy sinh trưởng phỏt triển tốt thỡ tiến hành lõy bệnh nhõn tạo.
Chỉ tiờu theo dừi : tỷ lệ bệnh riờng lẻ, hỗn hợp (%) Mỗi cụng thức thớ nghiệm nhắc lại 5 lần.
Thớ nghiệm 5: Khảo sỏt mức ủộ nhiễm bệnh hỗn hợp của một số giống cà chua thường và cà chua chuyển gen
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...32
Cỏc giống cà chua : DV987, DV1234, Physilk 17T1, Physilk 23T1, Hypsys #78, trồng trong ủất sạch sau 5-7 tuần khi cõy sinh trưởng phỏt triển tốt thỡ tiến hành lõy nhiễm bệnh nhõn tạo theo ngưỡng : 3000TTNS + 10g sinh khối nấm S. rolfsii
Chỉ tiờu theo dừi : Tỷ lệ bệnh hỗn hợp (%), thời kỳ tiềm dục (ngày), số
lượng u sưng, số tỳi trứng.
Mỗi cụng thức thớ nghiệm nhắc lại 5 lần.
Thớ nghiệm 6: ðỏnh giỏ khả năng phũng trừ bệnh hỗn hợp giữa TTNS và nấm Sclerotium rolfsii bằng Chitosan ở cỏc nồng ủộ khỏc nhau.
CT1: ðối chứng, khụng xử lớ chitosan CT2: Xử lớ chitosan 0,1%
CT3: Xử lớ chitosan 0,01% CT4: Xử lớ chitosan 0,001%
Cỏc giống cà chua DV1234, Physilk 23T1 trồng trong ủất sau 5-7 tuần khi cõy sinh trưởng phỏt triển tốt thỡ tiến hành lõy nhiễm bệnh nhõn tạo theo ngưỡng : 3000TTNS + 10g sinh khối nấm S. rolfsii, cỏc cụng thức phun chitosan ở cỏc nồng ủộ khỏc nhau.
Chỉ tiờu theo dừi: tỉ lệ bệnh hại, số lượng u sưng, số tỳi trứng. Mỗi cụng thức nhắc lại 5 lần.
Thớ nghiệm 7: ðỏnh giỏ khả năng chống chịu bệnh hại của một số giống cà chua chuyển gen và giống khụng chuyển gen trong ủiều kiện nhà lưới
Cỏc giống cà chua DV1234, Physilk 23T1, TFL #6 ủược trồng trong chậu, theo dừi tỡnh hỡnh bệnh trờn cỏc giống.
Chỉ tiờu theo dừi: Mức ủộ phổ biến của cỏc bệnh (%) Mỗi cụng thức nhắc lại 5 lần.
Thớ nghiệm 8: Thử nghiệm khả năng phũng trừ bệnh hỗn hợp giữa TTNS và HRGMT của một số chế phẩm sinh học (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...33
CT2: S. rolfsii, M. incognita + Trichoderma viride CT3: S. rolfsii, M. incognita+Bacillus filaris CT4: S. rolfsii, M. incognita +dung dịch Chitosan 0,1% CT5: S. rolfsii, M. incognita + dung dịch LEC 0,2%.
Cõy cà chua ủược trồng trong chậu, sau 5 - 7 tuần khi cõy sinh trưởng phỏt triển tốt thỡ tiến hành lõy bệnh nhõn tạo. Mỗi CT lõy với lượng 3000 TT tuổi 2, trứng và 10g sinh khối nấm S. rolfsii, xử lớ 10g sinh khối nấm ủối khỏng hoặc vi khuẩn ủối khỏng với lượng 106 bào tử/ml. Cỏc CT 4, 5 ngõm hạt giống trong 2h, khi cõy cú 2-3 lỏ thật phun dung dịch 1 lần, phun 2-3 ủợt, mỗi ủợt cỏch nhau 7-10 ngày.
Chỉ tiờu theo dừi: tỉ lệ cõy bị nhiễm bệnh, số lượng u sưng, số tỳi trứng so với cụng thức ủối chứng.
Mỗi cụng thức nhắc lại 5 lần.
Thớ nghiệm 9: Nghiờn cứu khả năng gõy hại của bọ phấn Bemissia tabaci
Genadius trờn giống cà chua chuyển gen và khụng chuyển gen.
Thớ nghiệm tiến hành trờn cỏc giống cà chua DV1234, Physilk 17T1, Physilk 23T1, Hypsys #78. Cỏc giống cà chua ủược trồng trong chậu, sau 5 - 7 tuần khi cõy sinh trưởng phỏt triển tốt thỡ tiến hành thớ nghiệm.
Cõy cà chua ủược ủưa vào lồng nuụi bọ phấn ủể tiến hành theo dừi sự
gõy hại của bọ phấn Bemissia tabaci.
Bọ phấn ủược thả với mật ủộ 30 bọ phấn trưởng thành/lồng nuụi.
Chỉ tiờu theo dừi: triệu chứng gõy hại, diễn biến mật ủộ bọ phấn
Bemissia tabaci sau 2, 5, 10, 20 và 30 ngày thả.
Thớ nghiệm 10. Khả năng phũng trừ bệnh và ủỏnh giỏ năng suất cà chua khi sử dụng chế phẩm sinh học LEC
Thớ nghiệm thực hiện trờn diện tớch 360 m2 với 3 lần nhắc lại, ụ thớ nghiệm 10m2. Cỏc giống cà chua Hybrid, DV018, DV 987, DV 1234, DVS95.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...34 Sơủồ ruộng thớ nghiệm: DV 018 DV 1234 Lai số 2 DV 1234 ðC DVS 95 DV 987 DV 987 ðC DV 018 DV 1234 DVS 95 ðC DVS 95 DV 018 ðC DV 987 DV 018 Lai số 2 ðC DV 1234 Lai số 2 DV 987 DVS 95 Lai số 2
Xử lý hạt giống bằng chế phẩm LEC 0,2% trong 2h, phun trước khi trồng cõy con 3 ngày, phun trước giai ủoạn ra hoa 1 tuần.
Chỉ tiờu theo dừi: tỡnh hỡnh phỏt sinh phỏt triển bệnh riờng lẻ và bệnh hỗn hợp (nấm, vi khuẩn, virus và tuyến trựng), TLB (%); xỏc ủịnh khả năng khỏng nhiễm của giống và tỏc dụng của cỏc chế phẩm sinh học ủối với việc hạn chế bệnh hại; năng suất của cà chua.