4. Kết quả nghiên cứu và thảo luận
4.5. Kết quả kiểm tra chất l−ợng sữa ở sữa bò bị viêm vú cấp
Khi sữa trở thành thực phẩm thiết yếu hàng ngày thì vấn đề chất l−ợng sữa càng đ−ợc ng−ời tiêu dùng quan tâm. Nếu sữa t−ơi và các sản phẩm chế biến từ sữa không đảm bảo yêu cầu về chất l−ợng và vệ sinh an toàn thì sẽ ảnh h−ởng không nhỏ đến sức khoẻ của ng−ời tiêu dùng. Ngoài ra, vấn đề chất
l−ợng sữa còn là điều kiện thiết yếu để thúc đẩy ngành sản xuất sữa phát triển ở thị tr−ờng trong n−ớc và xuất khẩu, góp phần phát triển kinh tế quốc gia và quốc tế. Do vậy, việc kiểm tra chất l−ợng sữa ở bò mắc bệnh viêm vú là hết sức cấp thiết trong vệ sinh an toàn thực phẩm cho ng−ời tiêu dùng.
Các chỉ tiêu dùng để đánh giá về vệ sinh của sữa rất đa dạng: sữa có chất l−ợng là sữa giàu chất dinh d−ỡng: chất đ−ờng, chất béo khoáng đa vi l−ợng và vitamin, ít các chất có hại nh− vi khuẩn, nấm mốc và độc tố do chúng sản sinh ra.
Với mục đích đánh giá sự ảnh h−ởng của bệnh viêm vú ở bò sữa đến chất l−ợng sữa để từ đó đ−a ra khuyến cáo cho các nông hộ chăn nuôi bò sữa trong việc xử lí sữa của bò bị viêm vú và đảm bảo an toàn thực phẩm cho ng−ời tiêu dùng. Chúng tôi tiến hành kiểm tra chất l−ợng sữa ở 36 bò sữa bị viêm vú với các chỉ tiêu:
- Kiểm tra thành phần hoá học của sữa bò bị viêm vú cấp.
- Kiểm tra thành phần sinh học của sữa (kiểm tra sự có mặt của vi khuẩn trong sữa của bò bị viêm vú cấp).
- Kiểm tra tính chất hoá học của sữa (kiểm tra độ axit chung của sữa ở bò bị viêm vú cấp).
Kết quả thu đ−ợc chúng tôi trình bày ở bảng 4.7, 4.8, 4.9, 4.10, 4.11. 4.5.1. Thành phần hoá học của sữa
Ngày nay khoa học khẳng định, sữa nh− một huyễn dịch chất béo trong một dung dịch lokng chứa nhiều nguyên tố hoà tan d−ới dạng keo. Thành phần sữa bao gồm: n−ớc chiếm khoảng 87%, mỡ chiếm 3,80% chất khô không mỡ chiếm 8,8%, khoáng chiến 0,56%, lactoza chiếm 4,6%, các axit chiếm 0,18%.
Kiểm tra thành phần hoá học trong sữa của 36 bò sữa bị viêm vú cấp tính chúng tôi thu đ−ợc kết quả ở bảng 4.7.
Bảng 4.7. Thành phần hoá học trong sữa của bò sữa bị viêm vú cấp Bò sữa khoẻ (n=36) Bò sữa viêm vú (n=36) Đối t−ợng Chỉ tiêu X± mx X± mx Mỡ sữa (%) 3,80 ± 0,80 1,51 ± 0,58 Protein (%) 3,28 ± 0,01 2,58 ± 0.03 Lactoza (%) 4,71 ± 0,03 4,07 ± 0,25 Khoáng (%) 0,51 ± 0,01 0,43 ± 0,03 Vật chất khô (%) 8,62 ± 0,02 7,43 ± 0,08
Qua kết quả bảng 4.7 cho thấy:
Các thành phần hoá học trong sữa của bò sữa bị viêm vú giảm nhiều so với thành phần hoá học trong sữa của bò sữa khoẻ. Tuy nhiên mỗi thành phần có mức độ giảm khác nhau.
- Hàm l−ợng mỡ sữa trung bình trong sữa bò khoẻ là 3,80±0,80%. Khi
bò bị viêm vú hàm l−ợng mỡ sữa giảm nhiều so với bình th−ờng (từ
3,80±0,80% ở bò khoẻ giảm xuống còn 1,51±0,58% ở bò bị viêm vú cấp tính).
- Hàm l−ợng protein trong sữa trung bình ở sữa bò khoẻ là 3,28±0,01%
và giảm xuống còn 2,58±0,03% ở sữa bò bị viêm vú.
- Hàm l−ợng đ−ờng lactoza trung bình trong sữa giảm (từ 4,71±0,03% ở
bò khoẻ mạnh xuống còn 4,07±0,25% ở bò bị viêm vú).
- Hàm l−ợng khoáng trung bình trong sữa bò bị viêm vú là 4,07±0,25%,
giảm 0,08% so với sữa bò khoẻ (0,51±0,01%).
- Hàm l−ợng vật chất khô trung bình trong sữa bò khoẻ mạnh là
Theo chúng tôi, hiện t−ợng giảm các thành phần hoá học trong sữa ở bò bị viêm vú là do: quá trình viêm xuất hiện tại tuyến vú làm cho tuần hoàn tuyến vú bị rối loạn, các hoạt động trao đổi chất ở tuyến vú bị ảnh h−ởng, việc đ−a nguyên liệu từ huyết t−ơng vào tuyến vú để tổng hợp nên các thành phần trong sữa gặp cản trở, hoạt động tiết sữa tại tuyến vú trở nên khó khăn. Bên cạnh đó hiện t−ợng xâm nhập của vi khuẩn gây bệnh tại tuyến vú cũng ảnh h−ởng rất lớn đến các thành phần trong sữa, khi đó chính sự tồn tại của vi sinh vật gây bệnh trong tuyến vú sẽ sản sinh ra nhiều chất có tác dụng làm thay đổi thành phần của sữa.
Theo Viện Thú y (2002) [19], bò sữa bị viêm vú cận lâm sàng sẽ dẫn tới sự giảm các thành phần và chất l−ợng của sữa nh−: lactose giảm 5 - 20%, casein giảm 6 - 18%.
Nh− vậy, kết quả nghiên cứu của chúng tôi cũng cho thấy khi bò sữa bị viêm vú thì các thành phần hoá học trong sữa có sự thay đổi, sữa lokng hơn so với sữa th−ờng.
4.5.2. Kiểm tra tính chất hoá học của sữa
Tính chất hoá học quan trọng của sữa là độ chua hay độ axit. Độ axit gồm độ axit tổng số và độ axit hoạt động. Mỗi một độ axit có ý nghĩa khác nhau trong việc đánh giá chất l−ợng sữa.
Độ axit tổng số do protein và các muối phốt phát, axit cacbonic tạo ra,
đ−ợc sử dụng để đánh giá độ t−ơi của sữa, biểu diễn bằng độ Terne (0T), tính
bằng số ml dung dịch NaOH hay KOH 0,1N cần thiết để trung hoà 100ml sữa.
ở sữa bò t−ơi độ axit tổng số th−ờng là 18-220T. Ngoài ra, còn có thể xác định
độ axit của sữa bằng độ Dornic hoặc độ Soclet- Henken.
Với mục đích xác định mức độ thay đổi độ t−ơi của sữa, chúng tôi tiến hành lấy mẫu kiểm tra độ axit chung của sữa ở 36 bò bị viêm vú cấp tính. Thu đ−ợc kết quả trình bày bảng 4.8.
Bảng 4.8. Kết quả kiểm tra độ axit chung của sữa bò bị viêm vú cấp Độ axit chung <180T Độ axit chung 180T-22 0T Độ axit chung >220T
Đợt lấy mẫu Số mẫu (n)
Số mẫu Tỉ lệ (%) Số mẫu Tỉ lệ (%) Số mẫu Tỉ lệ (%)
I 30 6 20,00 0 0 24 80,00 II 18 0 0 0 0 18 100,00 III 30 12 40,00 0 0 18 60,00 IV 36 6 16,66 0 0 30 83,33 V 36 6 16,66 0 0 30 83,33 ∑ 150 30 20,00 0 0 120 80,00
Qua bảng 4.8 cho thấy:
Trong 150 mẫu sữa ở bò sữa bị viêm vú mà chúng tôi kiểm tra đều
không đạt yêu cầu về độ axit chung (18ữ220T), trong đó:
Có 30 mẫu có độ axit chung < 180T, chiếm 20,00% tổng số mẫu của 5
lần lấy mẫu sữa.
Có 120 mẫu có độ axit chung > 220T, chiếm 80,00% tổng số mẫu của 5
lần lấy mẫu.
So với kết quả kiểm tra độ axit chung của Lê Thị Thịnh (1998) [16], số
mẫu sữa có độ axit chung < 180T là 6,66% và số mẫu sữa có độ axit chung >
220T chiếm 26,66% thì kết quả kiểm tra ở 150 mẫu sữa trên là cao hơn.
Theo giáo trình kiểm tra vệ sinh thú y thì giá trị 0T tăng hoặc giảm so
li của muối và axit có trong sữa. Nếu 0T thay đổi về phía lớn hơn 220T thì mẫu
sữa kiểm tra đó có hàm l−ợng axit cao, nếu 0T thay đổi về phía nhỏ hơn 180T
thì mẫu sữa kiểm tra có hàm l−ợng axit chung thấp.
Nh− vậy, trong kết quả kiểm tra ở 150 mẫu sữa bò viêm vú chúng tôi thực hiện thì có 80,00% mẫu sữa có hàm l−ợng axit chung cao và 20,00% mẫu
sữa có hàm l−ợng axit chung thấp (<180T).
Qua đây, cho thấy khi bò bị viêm vú thì chất l−ợng sữa bị thay đổi rõ rệt, độ t−ơi của sữa bị biến đổi một cách rõ ràng, tất cả 150 mẫu sữa kiểm tra ch−a đạt yêu cầu tiêu chuẩn về độ axit cho phép.
4.5.3. Thành phần sinh học
Sữa cũng chứa những thành phần sinh học, đó là các tế bào có nguồn gốc từ máu, từ tuyến vú và các vi sinh vật. Ngay cả khi tuân thủ nghiêm ngặt tất cả các biện pháp vệ sinh, sữa vẫn chứa một l−ợng tế bào (khoảng 100.000- 200.000 tế bào trong 1ml sữa) và có chứa các vi sinh vật (chủ yếu là các vi sinh vật trong ống núm vú).
Khi gia súc bị bệnh viêm vú số l−ợng tế bào và số l−ợng vi sinh vật trong sữa tăng lên rất nhanh, có tới hàng trăm triệu tế bào trong 1ml sữa. Ngoài các tế bào biểu mô tuyến sữa, còn có các loại tế bào từ máu, dịch lâm ba vào sữa nh− bạch cầu đơn nhân, lâm ba cầu, bạch cầu đa nhân. Số l−ợng các bạch cầu này trong sữa cho phép ta đánh gía đ−ợc tình trạng vệ sinh và chất l−ợng của sữa .
Do vậy, bên cạnh việc kiểm tra độ axit của sữa thì kiểm tra số l−ợng tế bào trong sữa cũng là một chỉ tiêu quan trọng trong việc đánh giá vệ sinh và chất l−ợng của sữa.
- Kết quả kiểm tra số l−ợng tế bào trong sữa ở bò sữa bị viêm vú:
+ Kết quả kiểm tra số l−ợng tế bào trong sữa ở bò sữa bị viêm vú bằng ph−ơng pháp CMT (California Mastitis Test)
Tổng số tế bào thân trong sữa tr−ờng ít hơn 200.000/ml. Trong quá trình viêm nhiễm, tế bào somatic của tuyến vú sẽ tăng lên tới hàng triệu tế bào trong 1ml sữa. Mức độ cao hơn 400.000 tế bào cho thấy sự không bình th−ờng của bầu vú. Hầu hết sự tăng lên này là tế bào trung tính di chuyển từ máu đến tuyến vú để đáp ứng lại sự xâm nhiễm của vi khuẩn.
Những phản ứng CMT liên quan nhiều đến số l−ợng tế bào thân. Các
phản ứng d−ơng tính đánh giá mức độ viêm vú ở bò. L−ợng tế bào thân có xu h−ớng tăng trong thời gian tiết sữa và vẫn giữ số l−ợng cao trong vài giờ sau đó, kể cả những núm vú không bị bệnh, do đó chúng tôi tiến hành lấy mẫu ngay khi bắt đầu vắt sữa và chỉ bỏ vài giọt sữa đầu. Bằng ph−ơng pháp dùng thuốc thử CMT chúng tôi kiểm tra số l−ợng tế bào trong sữa ở 150 mẫu sữa lấy từ những bò sữa bị viêm vú. Kết quả đ−ợc trình bày ở bảng 4.9.
Bảng 4.9. Kết quả kiểm tra tế bào trong sữa ở bò sữa bị viêm vú cấp bằng ph−ơng pháp dùng thuốc thử CMT (California Mastitis Test)
Âm tính D−ơng tính Đợt lấy mẫu Số mẫu (n) n Tỉ lệ (%) + ++ +++ ++++ n Tỉ lệ (%) I 30 0 0 6 12 12 0 30 100 II 18 0 0 0 12 6 0 18 100 III 30 0 0 12 12 6 0 30 100 IV 36 0 0 12 6 12 6 36 100 V 36 0 0 0 0 24 12 36 100 ∑ ∑ ∑ ∑ 150 0 0 30 42 60 18 150 100
Kết quả bảng 4.9 cho thấy: trong 150 mẫu lấy từ những bò sữa bị viêm vú thì 100% số mẫu đem kiểm tra bằng thuốc thử CMT đều cho kết quả d−ơng tính, tuy nhiên mức độ d−ơng tính lại khác nhau ở mỗi mẫu.
Với tổng số 150 mẫu sữa kiểm tra, trong đó có:
- 30 mẫu sữa cho kết quả d−ơng tính mức + chiếm 20,00%. - 42 mẫu cho kết quả d−ơng tính mức ++ chiếm 28,00%. - 60 mẫu cho kết quả d−ơng tính mức +++ chiếm 40,00%. - 18 mẫu cho kết quả d−ơng tính mức ++++ chiếm 12,00%.
ảnh 4.3. Phản ứng CMT ở các mức độ khác nhau
Theo kết quả nghiên cứu của chúng tôi thì phần lớn các mẫu sữa đều cho kết quả d−ơng tính ++ và +++. Nguyên nhân là do các mẫu sữa mà chúng tôi tiến hành dùng thuốc thử CMT đ−ợc lấy từ những bò sữa đk có biểu hiện bị viêm vú.
Kết quả nghiên cứu của Lê Thị Thịnh (1998) [16] cho thấy có 33,00% mẫu sữa đem kiểm tra cho kết quả d−ơng tính, trong đó mức độ d−ơng tính mạnh chiếm 11,50%. So với kết quả nghiên cứu của Lê Thị Thịnh thì kết quả nghiên cứu chúng tôi cao hơn.
chẩn đoán bệnh viêm vú bằng ph−ơng pháp CMT ở một số cơ sở chăn nuôi bò sữa thấy tỉ lệ viêm vú phi lâm sàng là 24,8%.
Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú và cộng sự (2000) [13], khi tiến hành kiểm tra 53 mẫu sữa lấy từ 17 bò sữa có biểu hiện triệu chứng viêm vú lâm sàng, thì có 51 mẫu cho phản ứng d−ơng tính, chiếm tỉ lệ 96,23%. Kết quả này phù hợp với kết quả nghiên cứu của chúng tôi, vì đối t−ợng bò sữa chúng tôi tiến hành kiểm tra là những bò đk có biểu hiện bị viêm vú.
+ Kết quả kiểm tra số l−ợng tế bào trong sữa ở bò sữa bị viêm vú bằng ph−ơng pháp của Hopkirk
Để xác định mức độ viêm vú và mức độ ảnh h−ởng của bệnh đến số l−ợng tế bào ở trong sữa ngoài việc sử dụng ph−ơng pháp bằng thuốc thử CMT, chúng tôi còn tiến hành đếm số l−ợng tế bào trong sữa theo ph−ơng pháp Hopkirk.
Kiểm tra số l−ợng tế bào trong sữa ở 150 mẫu sữa bò viêm vú theo ph−ơng pháp của Hopkirk. Kết quả thu đ−ợc ở bảng 4.10:
Bảng 4.10. Kết quả đếm tế bào trong sữa ở bò sữa bị viêm vú cấp theo ph−ơng pháp Hopkirk Âm tính D−ơng tính Đợt lấy mẫu số mẫu (n) n Tỉ lệ (%) + ++ +++ ++++ n Tỉ lệ (%) I 30 0 0 6 12 12 0 30 100 II 18 0 0 6 6 6 0 18 100 III 30 0 0 6 18 6 0 30 100 IV 36 0 0 6 12 12 6 36 100 V 36 0 0 0 0 24 12 36 100 ∑ 150 0 0 24 48 60 18 150 100
Kết quả bảng 4.10 cho thấy trong 5 đợt lấy mẫu với tổng số 150 mẫu thì các mẫu đều cho kết quả d−ơng tính, trong đó: 24 mẫu sữa có kết quả d−ơng tính ở mức độ mức (+) chiếm 16,00%, có 48 mẫu có kết quả d−ơng tính ở mức độ mức (++) chiếm 32,00%, 60 mẫu có kết quả d−ơng tính ở mức độ mức (+++) chiếm 40,00% và 6 mẫu có kết quả d−ơng tính ở mức độ mức (++++) chiếm 12,00%.
Theo kết quả đếm tế bào thì ở mức độ d−ơng tính mức (++), mức (+++) chiếm tỉ lệ cao trong các mẫu, trong khi đó ở mức độ d−ơng tính mức (++++) chiếm tỉ lệ nhỏ hơn ( 12,00%).
So sánh với kết quả ph−ơng pháp dùng thuốc thử CMT thì có sự chênh lệch giữa các mẫu cho kết quả d−ơng tính mức (+) và mức (++), nếu nh− khi dùng thuốc thử CMT số mẫu cho kết quả d−ơng tính mức (+) là 20,00% và mức (++) là 28,00% thì ở ph−ơng pháp đếm tế bào mức d−ơng tính (+) giảm xuống còn 16,00% ở mức độ d−ơng tính mức (++) tăng lên 32,00%. Điều này chứng tỏ ph−ơng pháp đếm tế bào cho kết quả chính xác hơn (vì ta có thể đếm đ−ợc chính xác số l−ợng tế bào có trong 1ml sữa, ngoài ra còn cho chúng ta biết đ−ợc các tế bào có mặt trong sữa là những tế bào nào).
Qua kết quả kiểm tra số l−ợng tế bào trong sữa ở bò sữa bị viêm vú bằng ph−ơng pháp (CMT và Hopkirk) chúng tôi có nhận xét: kết quả d−ơng tính ở mức độ khác nhau biểu thị số l−ợng tế bào có mặt trong sữa tăng lên cùng với mức độ viêm vú.
+ Kiểm tra vi sinh vật có mặt trong sữa ở bò bị viêm vú
Các mẫu sữa sau khi đk đ−ợc tiến hành xác định bằng ph−ơng pháp chẩn đoán CMT, đ−ợc li tâm và cặn sữa đ−ợc tiến hành nuôi cấy phân lập vi khuẩn gây bệnh trên các môi tr−ờng phân lập. Kết quả thu đ−ợc trình bày ở bảng 4.11.
Bảng 4.11. Kết quả phân lập vi khuẩn ở sữa bò bị viêm vú cấp
Staphylococcus Streptococcus E.coli Vi khuẩn khác
Đợt lấy
mẫu số mẫu (n) Số
mẫu Tỉ lệ (%) mẫu Số Tỉ lệ (%) mẫu Số Tỉ lệ (%) mẫu Số Tỉ lệ (%)
I 10 3 30,00 3 30,00 5 50,00 1 10,00 II 6 3 50,00 4 66,66 4 66,66 0 0,00 III 10 6 60,00 3 60,00 4 40,00 1 10,00 IV 12 7 58,33 4 33,33 2 16,66 2 16,66 V 12 5 41,66 3 25,00 6 50,00 1 8,33 Tổng 50 24 48,00 17 34,00 21 42,00 5 10,00
Phân lập vi khuẩn ở 50 mẫu sữa ở bò bị viêm vú, chúng tôi thu đ−ợc kết quả ở bảng 4.11. Qua kết quả bảng 4.11 chúng tôi thấy cả 50 mẫu đều có mặt vi khuẩn. Trong đó: vi khuẩn Staphylococcus chiếm tỉ lệ cao nhất (48%).
Adams D.S. và cộng sự (1992) [21] khi tiến hành phản ứng Coagulase ở
các chủng vi khuẩn Staphylococcus phân lập từ vú bò bị viêm cho thấy
Staphylococcus aureus đk phân lập đ−ợc 60-97% trong tổng số
Staphylococcus.
Theo kết quả nghiên cứu của Nguyễn Ngọc Nhiên và cộng sự (2000)
[13], tỉ lệ những vi khuẩn gây bệnh viêm vú ở bò sữa là: Staphylococcus
- Sau vi khuẩn Staphylococcus là vi khuẩn E. Coli, chiếm tỉ lệ 42%.