3. VẬT LIỆU, ðỊ Að IỂM, NỘI DUNG
3.1.Vật liệu nghiờn cứu
3.1.1. Nguồn nấm Pyricularia oryzae Cav.
Trong vụ xuõn năm 2008, chỳng tụi ủó tiến hành thu thập cỏc mẫu bệnh
ủạo ụn ngoài ủồng ruộng, trờn cỏc giống lỳa và ở cỏc ủịa ủiểm khỏc nhau của tỉnh Hải Dương. Cỏc mẫu thu thập ủược bảo quản tươi ủem về phũng thớ nghiệm tiến hành phõn lập bằng phương phỏp cấy ủơn bào tử. Cỏc mẫu sau khi phõn lập
ủược sử dụng ủể làm nguồn nghiờn cứu.
Nguồn mẫu phõn lập nấm Pyricularia oryzae Cav.
TT Kớ hiệu mẫu
phõn lập Từ giống lỳa ðịa ủiểm lấy mẫu
1 HD1 Q5 Thanh Cường - Thanh Hà - Hải Dương
2 HD2 Bắc Thơm số 7 Thanh Cường - Thanh Hà - Hải Dương
3 HD3 Khang Dõn 18 Thanh Cường - Thanh Hà - Hải Dương
4 HD4 Nếp 415 Quang Phục - Tứ kỳ - Hải Dương
5 HD5 Nếp 352 Hồng Phong - Ninh Giang - Hải Dương
3.1.2. Cỏc giống lỳa dựng ủể nghiờn cứu trong nhà lưới
- Cỏc giống lỳa của Nhật Bản (12 giống) cú chứa gen khỏng bệnh ủạo ụn
ủược dựng ủể xỏc ủịnh mó số của cỏc chủng sinh lý nấm Pyricularia oryzae bao gồm: K59, Shin 2, Aichi-asahi, Ishikari-Shrroke, Kanto 51, K60, Tsuyuate, Fukunishiki, Yashiromichi, PiNo. 4, Toride 1, BL1; do GS. Hiroshi Yaegashi Trường ủại học Saga của Nhật Bản cung cấp cho TS. Nguyễn Văn Viờn hiện ủang
ủược lưu giữ tại phũng thớ nghiệm JICA - Trường ủại học Nụng nghiệp Hà Nội. - Cỏc giống lỳa do Viện cõy lương thực và cõy thực phẩm (Viện CLT &
CTP) cung cấp (13 giống) gồm: P376, P6, PD211, 88 - 2 (HH2) - 6, BM206,
BM122, BM216, BM214, 6-8/Xi12, CH07, CH208, 94-11-1, Nếp 98.
- Cỏc giống lỳa do Cụng ty giống cõy trồng Hải Dương (C.ty GCT - HD) cung cấp (18 giống) gồm: X21, Xi23, ðột biến số 5, ðột biến số 6, VL45, VL50, HYT83, Q5, Bắc thơm số 7, Khang dõn 18, ð.ưu 527, Kim ưu 725, Bỏc ưu 903, Nhịưu 838, Nếp 97, Nếp DT22, Nếp 352, Nếp 415
3.1.3. Cỏc hoỏ chất và cỏc nguyờn vật liệu khỏc dựng trong thớ nghiệm
- Cồn 960, Tween 20, Khoai tõy, ủường saccaroza, ủường Gluco, bột mỡ, cỏm gạo, bột lỳa mạch , agar...
3.1.4. Thuốc trừ nấm
- Fillia 525 EC do cụng ty Syngenta cung cấp.
- Lilacter 0,3SL do cụng ty TNHH vật tư nụng nghiệp Phương ðụng cung cấp.
3.1.5. Mụi trường nhõn tạo ủể nuụi cấy nấm
Một số mụi trường dựng ủể phõn lập và nuụi cấy nấm Pyricularia oryzea Cav.
- Mụi trường WA (Water Agar)
Thành phần gồm: Agar: 20 gam nước cất: 1000 ml
- Mụi trường PSA (Potato Sugar Agar)
Thành phần gồm: Khoai tõy: 200 gam
Agar: 20 gam nước cất: 1.000 ml - Mụi trường cỏm agar (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Thành phần gồm: Cỏm gạo: 20 gam
ðường Saccaroza: 5 gam
Agar: 20 gam Nước cất: 1.000 ml
- Mụi trường OMA (Oatmeal Agar)
Thành phần gồm: Bột lỳa mạch: 50 gam
ðường Saccaroza: 20 gam Agar: 20 gam Nước cất khụng ion:1.000 ml
- Mụi trường PGA (Potato Glucoza Agar)
Thành phần gồm: Khoai tõy: 200 gam
ðường Glucoza: 20 gam
Agar: 20 gam nước cất: 1.000 ml
3.1.6. Cỏc dụng cụ dựng trong thớ nghiệm
- Cỏc dụng cụ thớ nghiệm: Khay nhụm, cốc, ủĩa petri, bỡnh tam giỏc, ống nghiệm, panh, thước ủo, ủũa thuỷ tinh, lamen, bỡnh tia, lam kớnh, chổi lụng, nồi hấp, bỡnh phun thuốc bơm tay ủeo vai, bỡnh cầm tay...
- Buồng cấy nấm, buồng lõy bệnh nhõn tạo...