trỡnh thụ tinh.
Cú nhiều nguyờn nhõn dẫn ủến rối loạn quỏ trỡnh thụ tinh ở bũ sữa.. Thiểu năng buồng trứng cú thể xảy ra do dinh dưỡng kộm làm cho một phần hoặc toàn bộ buồng trứng khụng phỏt triển mà teo lại.
Buồng trứng bị ủa nang là khi trứng chớn nhưng do tế bào thượng bỡ của noón nang khụng vỡ ra ủược nờn khụng cú hiện tượng rụng trứng từ ủú thể vàng khụng hỡnh thành, do vậy hàm lượng FSH, LH trong trường hợp này cũng rất thấp.
Buồng trứng cú u nang thể vàng do nội mạc tử cung khụng tiết ra ủược PGF2α nờn khụng phỏ vỡ ủược thể vàng ở chu kỳ trước ủú, thể vàng vẫn tồn tại và tiết ra FSH, LH làm ức chế sự phỏt triển của nang trứng nờn cũng khụng cú hiện tượng ủộng dục và rụng trứng. Trong trường hợp này hàm lượng FSH, LH trong sữa cao.
Rối loạn quỏ trỡnh thụ tinh mà nguyờn nhõn do buồng trứng là hiện tượng phổ biến trong chăn nuụi bũ sữa, nú làm ảnh hưởng khụng nhỏ ủến hiệu quả kinh tế cho người chăn nuụi. Hiện nay việc chẩn ủoỏn nguyờn nhõn do buồng trứng thường dựa vào phương phỏp khỏm qua trực tràng. Tuy nhiờn, phương phỏp này phụ thuộc rất nhiều vào trỡnh ủộ của người khỏm. ðối với kỹ thuật viờn cú tay nghề cao, khụng khú ủể phõn biệt trường hợp thiểu năng buồng trứng với trường hợp buồng trứng cú khối u nhưng ủể phõn biệt trường
hợp ủa nang buồng trứng với thể vàng tồn lưu thỡ lại là một ủiều rất khú.
Phương phỏp ELISA cho phộp phõn biệt hai trường hợp này ủược chớnh xỏc hơn.
Dựa vào kết quả ủiều tra trong sổ sỏch của phũng kỹ thuật, cỏc dẫn tinh viờn, ủặc biệt dựa vào phương phỏp khỏm buồng trứng qua trực tràng, chỳng tụi xỏc ủịnh ủược bũ cú buồng trứng bất thường và những bũ này ủược chọn làm thớ nghiệm và tiến hành lấy mẫu.
Cỏc mẫu ủược lấy vào cỏc ngày 0 (ngày bất kỳ), ngày 7, ngày 14 và ngày 21. Kết quả ủịnh lượng FSH, LH ủược trỡnh bày ở bảng 4.10 và bảng 4.11.
Bảng 4.10. Hàm lượng FSH trong cỏc trường hợp chậm sinh do buồng trứng ở bũ sữa
Hàm lượng FSH (mUI/ml)
Cỏc trường hợp n
(con) Ngày 0 Ngày 7 Ngày 14 Ngày 21
Biến ủộng 4,1 – 6,42 4,21-6,42 4,12-6,42 4,25-8,38 Hàm lượng FSH cao 9 Trung bỡnh 4,35±0,52 5,14 ± 0,75 6,31 ± 1,77 4,37 ± 0,68 Biến ủộng 3,1 – 5,42 2,2-3,42 3,23-5,42 2,27-5,38 Hàm lượng FSH thấp 14 Trung bỡnh 2,15±0,41 2,14 ± 0,24 2,18 ± 0,97 2,57 ± 0,64 Hàm lượng FSH tăng dần 4 Trung bỡnh 3,35±0,24 3,64 ± 0,45 4,31 ± 1,07 4,59 ± 0,59 Hàm lượng FSH biến ủộng 1 5,24 2,14 3,16 4,15
Hàm lượng FSH theo chu kỳ 1 2,26 3,48 6,24 2,14
Bảng 4.11. Hàm lượng LH trong cỏc trường hợp chậm sinh do buồng trứng ở bũ cỏi
Hàm lượng LH (mUI/ml)
Cỏc trường hợp n
(con) Ngày 0 Ngày 7 Ngày 14 Ngày 21
Biến ủộng 7,4 – 10,26 7,9 – 14,76 7,9 – 16,96 7,9 – 11,04 Hàm lượng LH cao 11 Trung bỡnh 9,15 ± 0,27 9,7 ± 0,6 10,12 ± 0,77 9,5 ± 0,31 Biến ủộng 5,4 – 8,26 5,05 – 9,26 5,0 – 7,96 4,51– 9,15 Hàm lượng LH thấp 13 Trung bỡnh 6,55 ± 0,17 6,72 ± 0,4 6,12 ± 0,47 6,78 ± 0,25 Hàm lượng LH tăng dần 2 Trung bỡnh 7,45 ± 0,53 5,16 ± 0,15 6,59 ± 0,40 7,78 ± 0,45 Hàm lượng LH biến ủộng 1 6,24 5,14 5,76 5,13
Hàm lượng LH theo chu
Từ bảng 4.10 và bảng 4.11, chỳng tụi thiết lập ủồ thị về ủộng thỏi FSH và LH trong từng trường hợp trờn và minh họa ở ủồ thị 4.2 và ủồ thị 4.3.
0 2 4 6 8 10 12 0 7 14 21 Hàm lượng LH cao Hàm lượng LH thấp Hàm lượng LH tăng dần Hàm lượng LH biến ủộng Hàm lượng LH theo chu kỳ
ðồ thị 4.2. Hàm lượng LH trong cỏc trường hợp chậm sinh do
buồng trứng ở bũ sữa 0 1 2 3 4 5 6 7 0 7 14 21 Hàm lượng FSH cao Hàm lượng FSH thấp Hàm lượng FSH tăng dần Hàm lượng FSH biến ủộng Hàm lượng FSH theo chu kỳ
ðồ thị 4.3. Hàm lượng FSH trong cỏc trường hợp chậm sinh do
Qua bảng 4.10, bảng 4.11 và ủồ thị 4.2 , ủồ thị 4.3 chỳng tụi xỏc ủịnh ủược 5 nhúm bũ. Nhúm thứ nhất cú hàm lượng FSH (>4mIU/ml) và LH (>7mUI/ml) luụn cao ở tất cả cỏc ngày lấy mẫu. Nhúm thứ hai cú hàm lượng FSH (<3mUI/ml) và LH (<6,8mUI/ml) luụn thấp. Nhúm thứ ba cú hàm lượng FSH tăng dần (từ 3,35±0,24 - 4,59 ± 0,59mUI/ml) và LH là (7,45 ± 0,53 - 7,78 ± 0,45mUI/ml). Nhúm thứ tư cú hàm lượng FSH giảm dần (từ 5,24 - 4,15mUI/ml) và LH giảm dần (từ 6,24 - 5,13mUI/ml) và nhúm thứ năm cú hàm lượng FSH và LH biến ủộng theo chu kỳ bỡnh thường, tương ứng ở cỏc thời ủiểm lấy mẫu.
Theo Nguyễn Tấn Anh và cs (1995) [3], nồng ủộ FSH và LH trong sữa
bị ảnh hưởng trực tiếp của sự hỡnh thành và phỏt triển của thể vàng. Theo
Isobe, Nakao (2002) [45], giới hạn > 1 mUI/ml về nồng ủộ FSH và LH ủỏnh dấu sự tồn tại của thể vàng. Những nghiờn cứu của Phan Văn Kiểm (1998) [17] về kết quả nghiờn cứu về ủộng thỏi LH ở bũ rối loạn sinh sản tại Trung tõm nghiờn cứu bũ và ủồng cỏ Ba Vỡ, Trung tõm giống bũ sữa Cầu Diễn và xó Phự ðổng – Huyện Gia Lõm – Hà Nội cho biết hàm lượng LH ở bũ rối loạn sinh sản chia làm hai nhúm: nhúm cú hàm lượng LH cao (>4 mUI/ml) tương
ứng ở cỏc ngày lấy mẫu 0, 7, 14, 21 là: 4,48 ± 0,33 mUI/ml; 4,62 ± 0,45
mUI/ml; 5,58 ± 0,35 mUI/ml; 5,51 ± 0,43 mUI/ml. Nhúm bũ cú hàm lượng LH thấp (<4 mUI/ml) tương ứng ở cỏc ngày lấy mẫu là: 3,08 ± 0,05 mUI/ml; 2,12 ± 0,06 mUI/ml; 3,16 ± 0,05 mUI/ml; 3,19 ± 0,01 mUI/ml. Từ ủú, chỳng tụi kết luận ủược rằng nhúm bũ cú hàm lượng FSH (n=9), LH (n=11) cao cú thể vàng hoạt ủộng trong tất cả cỏc thời ủiểm lấy mẫu hay núi cỏch khỏc là buồng trứng ở những bũ này cú thể vàng tồn lưu. 14 con cú hàm lượng LH (n=13), FSH (n=14) thấp nghĩa là khụng cú sự tồn tại của thể vàng, trường hợp này cú thể do thiểu năng buồng trứng hoặc do ủa nang buồng trứng, 6 bũ (FSH), 4 bũ (LH) cú buồng trứng hoạt ủộng (hàm lượng LH, FSH tăng dần,
biến ủộng và theo chu kỳ). Nhúm bũ này cú thể do ủộng dục thầm lặng, ủộng dục vào ban ủờm hay do kỹ thuật phỏt hiện ủộng dục chưa chớnh xỏc nờn chưa ủược phối giống. Cũng cú thể những con này cú buồng trứng hoạt ủộng trở lại.
Nếu chỉ với phương phỏp ủịnh lượng ELISA trong cỏc trường hợp chậm sinh thỡ chỳng tụi chỉ phõn biệt ủược hai nhúm bũ: Nhúm bũ cú hàm lượng LH (>7mUI/ml), FSH (>4mUI/ml) cao và nhúm bũ cú hàm lượng LH (<7,3mUI/ml), FSH <3mUI/ml) thấp. Nhúm bũ cú hàm lượng LH, FSH cao cú thể khẳng ủịnh do thể vàng tồn lưu nhưng nhúm bũ cú hàm lượng LH, FSH thấp cú thể là do ủa nang hoặc do thiểu năng buồng trứng. Sau khi ủó ủịnh lượng LH, FSH, việc phõn biệt hai trường hợp này trở nờn dễ dàng dựa vào cỏch khỏm buồng trứng qua trực tràng, do cấu trỳc buồng trứng hoàn toàn trỏi ngược nhau. Trường hợp thiểu năng buồng trứng thỡ sờ thấy buồng trứng nhỏ, nhẵn nhụi, ớt sần sựi và ủộ ủàn hồi kộm. Buồng trứng cú ủa nang thỡ sần sựi, cú nhiều u nổi lờn trờn bề mặt.
ðể kết quả ủược chớnh xỏc hơn cần phải cú sự kết hợp giữa hai phương phỏp trờn ủể xỏc ủịnh ủược nguyờn nhõn gõy rối loạn quỏ trỡnh thụ tinh do nguyờn nhõn bệnh lý buồng trứng một cỏch nhanh chúng và chớnh xỏc.
4.2.3. Kết quả chẩn ủoỏn nguyờn nhõn gõy rối loạn quỏ trỡnh thụ tinh bằng
ủịnh lượng FSH, LH kết hợp khỏm buồng trứng qua trực tràng Kết quả ủược thể hiện ở bảng 4.12 và bảng 4.13
Bảng 4.12. Kết quả chẩn ủoỏn nguyờn nhõn gõy rối loạn quỏ trỡnh thụ tinh ở bũ sữa bằng ủịnh lượng FSH kết hợp khỏm buồng trứng qua trực tràng
Nhúm bũ
ðịnh lượng
FSH (con) n Khỏm qua trực tràng (con) n
Kết luận T(%) ỷ lệ Cao 9 Cú u 9 Thể vàng tồn lưu 31,03 Cú u 8 ða nang buồng trứng 27,58 Thấp 14 Khụng cú u 6 Thiểu năng buồng trứng 20,69 Tăng dần 4 Biến ủộng 1 Theo chu kỳ 1 Bỡnh thường 6 Buth ồng trứng hoạt ủộng bỡnh ường 20,69 Tổng 29 100
Bảng 4.13. Kết quả chẩn ủoỏn nguyờn nhõn gõy rối loạn quỏ trỡnh thụ tinh ở bũ sữa bằng ủịnh lượng LH kết hợp khỏm buồng trứng qua trực tràng
Nhúm bũ ðịnh lượng LH n (con) Khỏm qua trực tràng n (con) Kết luận Tỷ lệ (%) Cao 11 Cú u 11 Thể vàng tồn lưu 39,28 Cú u 8 ða nang buồng trứng 28,57 Thấp 13 Khụng cú u 5 Thiểu năng buồng trứng 17,86 Tăng dần 2 Biến ủộng 1 Theo chu kỳ 1 Bỡnh thường 4 Buồng trứng hoạt ủộng bỡnh thường 14,29 Tổng 28 100
ở tất cả cỏc thời ủiểm lấy mẫu, kết hợp với khỏm trực tràng cú u, chỳng tụi ủi ủến kết luận số bũ này bị thể vàng tồn lưu chiếm tỷ lệ tương ứng là 31,03 và 39,28% ; số bũ cỏi cú hàm lượng FSH, LH thấp, cú u nang ủược khẳng ủịnh
là ủa nang buồng trứng chiếm tỷ lệ tương ứng là 27,58 và 28,57%; số bũ cú
hàm lượng FSH, LH thấp, khụng cú u do thiểu năng buồng trứng chiếm tỷ lệ là 20,69 và 17,85%; số bũ cú buồng trứng hoạt ủộng bỡnh thường chiếm là 20,69% và 14,29%, những con này chỳng tụi khụng tiếp tục nghiờn cứu mà khuyến cỏo người chăn nuụi nờn theo dừi chặt chẽ hơn.
Qua ủõy, chỳng tụi cú thể khẳng ủịnh: việc kết hợp giữa phương phỏp ELISA ủịnh lượng FSH, LH và khỏm buồng trứng qua trực tràng làm cho việc chẩn ủoỏn nguyờn nhõn gõy rối loạn quỏ trỡnh thụ tinh ở bũ sữa trở nờn dễ dàng, nhanh chúng và chớnh xỏc hơn nhiều so với trước ủõy. Việc chẩn
ủoỏn chớnh xỏc giỳp ta cú những biện phỏp can thiệp kịp thời và ủõy là một
chẩn ủoỏn rất cú ý nghĩa bởi tỡnh trạng rối loạn quỏ trỡnh thụ tinh ở bũ sữa trong chăn nuụi bũ ở nước ta diễn ra với tỷ lệ khỏ cao, theo Tăng Xuõn Lưu và Cs (2003) [22] là 25 – 30% gõy thiệt hại lớn cho người chăn nuụi. Chẩn ủoỏn chớnh xỏc nguyờn nhõn gõy rối loạn sinh sản cú thể coi là chỡa khoỏ ủể nõng cao năng suất sinh sản trong chăn nuụi bũ sữa.