Xác định nitơ ammonium bằng phương pháp indophenol.
3.3.5.1 Nguyên tắc
Indophenol là hợp chất có màu xanh, được tạo thành bằng phản ứng giữa ammonia, hypochlorite và phenol. Phản ứng này được xúc tác bởi sodium nitroprusside.
3.3.5.2 Hoá chất
Dung dịch phenol: trộn 11mL phenol lỏng ( 89%) và định mức thành 100mL bằng ethanol 95%. Dung dịch này chỉ dùng trong 1 tuần.
Sodium nitroprusside 0,5%w/v: hoà tan 0,5g sodium nitroprusside vào trong 100mL nước. Dung dịch này dùng trong 1 tháng.
Alkaline citrate: hòa tan 200g trisodium citrate và 10g NaOH trong nước cất định mức thành 1L.
Sodium hypochlorite 5%: đây là dung dịch có bán sẵn trên thị trường. Dung dịch này dùng trong 2 tháng.
Dung dịch oxy hóa: trộn 100mL dung dịch alkaline citrate với 25mL sodium hypochlorite. Dung dịch này chỉ dùng trong 1 ngày.
Dung dịch chuẩn N 1g/L: hòa tan 4,7143g (NH4)2HPO4 trong nước cất và định mức thành 1L.
Dung dịch chuẩn N 10mg/L: hút 10mL dung dịch chuẩn N 1g/L và định mức thành 1L.
Từ dung dịch chuẩn N 10mg/L pha loãng thành 5 dung dịch chuẩn: 0,1mg/L; 0,2mg/L; 0,3mg/L; 0,4mg/L và 0,5mg/L.
3.3.5.3 Cách tiến hành
Cho 25mL mẫu vào erlen 50mL, thêm vào đó: 1mL dung dịch phenol
1mL dung dịch sodium nitroprusside 2,5mL dung dịch oxy hóa
Bao erlen bằng màng plastic, để ở nhiệt độ phòng (22 - 27oC) ở nơi có ánh sáng nhẹ trong vòng ít nhất là 1h. Dung dịch bền màu trong vòng 24h.
Dựng đường chuẩn: tiến hành tương tự như trên với các dung dịch chuẩn 0,1mg/L; 0,2mg/L; 0,3mg/L; 0,4mg/L và 0,5mg/L.
Cũng tiến hành tương tự với mẫu nước cất để hiệu chỉnh máy về 0.