a. Môi trường nuôi và phân lập vi khuẩn
Môi trường TSB ( Trypticase Soy Broth) Thành phần môi trường Trypticase pepton : 17 g Phytone pepton : 3 g NaCl : 5 g K2HPO4 : 2,5 g Glucose : 2,5 g Nước cất : 1 lít
Cách pha: Môi trường tổng hợp pha theo chỉ dẫn của các nhà sản xuất: Pha 30 g trong 1000 ml nước, chỉnh pH về 7,3 ± 0,2. Phân bố trong các bình tam giác, đậy nút bông giấy bạc rồi hấp khử trùng 121oC trong 15 phút (Trần Linh Thước, 2008).
Môi trường TSA(Trypticase Soy Agar)
Cách pha: Cân 15 g agar trong 1 lít môi trường TSB. Phân phối trong các bình tam giác, đậy nút bông giấy bạc rồi hấp khử trùng 121oC trong 15 phút (Trần Linh Thước, 2008).
Nước muối sinh lý
Hoà tan 8,5 g NaCl trong 1 lít nước cất. Phân phối vào ống nghiệm, đậy nút bông giấy bạc rồi hấp khử trùng ở nhiệt độ 121oC trong 15 phút rồi để nguội (Trần Linh Thước, 2008).
b. Thuốc thử
Thuốc nhuộm Tím Violet
Tím violet : 1 g Rượu ethylic : 1 g Phenol tinh thể : 2g Nước cất : 100 ml Cách pha :
Hòa tan 1 g tím violet vào trong 10 ml cồn (dung dịch 1) Hòa tan 2 g phenol tinh thể vào 10 ml nước cất (dung dịch 2)
Trộn chung dung dịch 1 và dung dịch 2 lại với nhau ta có thuốc nhuộm tím violet
Thuốc nhuộm Liugol
Iod tinh thể : 1 g KI : 2 g Nước cất : 200 ml
Cách pha: Hòa tan iod vào nước cất, sau đó cho KI vào, ta có thuốc nhuộm Liugol, bảo quản trong lọ tối màu.
Thuốc nhuộm Fuschin
Fuschin kiềm : 1g Rượu ethylic 95% : 10 ml Phenol tinh thể : 5g Nước cất : 100 ml Cách pha:
Hòa tan Fuschin vào trong 10 ml cồn 95% (dung dịch 1). Hòa tan phenol tinh thể vào 100 ml nước cất (dung dịch 2).
Trộn đều dung dịch 1 và dung dịch 2, đem lọc, ta có thuốc nhuộm Fuschin.