- Thermonuclease cụa S aureus: cũng như tât cạ các vi sinh vaơt khác S aureus đeău có theơ toơng hợp DNAse ngối bào, như có đieơm khác bieơt so với tât cạ các loài vi sinh vaơt khác,
14. Thử nghieơm tính di đoơng trong mođi trường thách meăm
Nguyeđn taĩc: Nhaỉm xác định vi sinh vaơt có di đoơng hay di đoơng. Vi sinh vaơt di đoơng thường là các vi sinh vaơt có tieđn mao. Tieđn mao thường được tìm thây tái các vi sinh vaơt hình que. Tuy nhieđn có moơt sô vi sinh vaơt hình caău cũng có khạ naíng di đoơng. Vi sinh vaơt di đoơng có theơ có 1 hay nhieău tieđn mao có theơ phađn bô tái các vi trí khác nhau tređn tê bào vi sinh vaơt. Moơt sô vi sinh vaơt có theơ chuyeơn từ tráng thái di đoơng sang tráng thái khođng di đoơng nhưng đa sô khođng có khạ naíng chuyeơn từ tráng thái khođng di đoơng sang tráng thái di đoơng. Thođng thường các vi sinh vaơt từ di đoơng thành khođng di đoơng là do mât tieđn mao.
35 Cây đađm sau vi sinh vaơt vào trong mođi trường thách meăm chứa 0,5 % agar. Uû qua đeđm ở nhieơt đoơ thích hợp với tính di đoơng cụa từng vi sinh vaơt. Quan sát hieơn tượng sau nuođi cây. Nêu vi sinh vaơt di đoơng sẽ làm đúc mođi trường, vi sinh phát trieơn lan ra khỏi vêt cây. Ngược lái vi sinh vaơt khođng di đoơng sẽ phát trieơn sinh khôi xung quanh đường cây, mođi trường khođng vị đúc bởi sinh khôi vi khuaơn.
15. Thử nghieơm khử nitrate
Nguyeđn taĩc: Nhaỉm thử nghieơm khạ naíng vi sinh vaơt khử nitrat thành nitrite hay thành nitơ tự do. Tât cạ các quạ trình dieơn ra trong tê bào vi sinh vaơt dưới sự xúc tác cụa enzym nitratase.
Cơ sở sinh hoá: Sự khử nitrate thành nitrite hay nito tự do thường dieơn ra trong đieău kieơn kỵ khí. Oxy từ nitrate được coi như là nhađn tô nhaơn dieơn tử và proton cuôi cùng. Haău hêt các vi sinh vaơt hiêu khí khử nitrate là những vi sinh vaơt hieơu khí tuỳ nghi, chúng chư thực hieơn quá trình khử nitrate khi sông trong đieău kieơn kỵ khí, khođng có sự hieơn dieơn cụa oxy phađn tử. Trong chuoêi chuyeơn đieơn tử, nitrate đóng vai trò như moơt chaăt oxy hoá.
Sự khử nitrate thành nitrite: quá trình này dieơn ra như phạn ứng sau đađy: NO3- + 2e- + 2H+ NO2- + H2O
Nitrate Nitrite
Sự khử các sạn phaơm nitrate thành oxy phađn tử theo phạn ứng như sau: NO3- + 10e- + 12H+ N2 + 6H2O
Nitrate Nitơ
Sạn phạn cuôi cùng cụa sự khử này có theơ là các chât như sau: nitrite (NO2-); ammonia (NH3); nitơ phađn tử (N2), moơt hydroxylamine hay nitric oxyde (NO). Sự hình thành các sạn phaơm cuôi cùng này phú thuoơc vào từng loài vi sinh vaơt. Thođng thường các sạn phaơm cuôi cùng là khí N2 do sự khử tiêp túc các sạn phaơm nitrite táo thành. Sự hình thành sạn phaơm cuôi cùng còn phú thuoơc vào đieău kieơn mođi trường.
Phương pháp thực hieơn: Có theơ phát hieơn sự có maịt cụa nitratase trong mođi trường baỉng các cách như sau:
Cách 1: Cây vi sinh vaơt vào trong mođi trường nitrate broth và ụ qua đeđm.
Cách 2: Khuêch tán dày đaịc vi sinh vaơt thử nghieơm vào trong dung dịch sodium nitrate 0,01mol/l trong dung dịch đeơm phosphate pH 7,0, ụ 37oC trong 24 giờ.
Cách 3: Nhỏ vài giĩt dung dịch sodium nitrat 1% vào mođi trường canh khuaơn dày đã được nuođi cây trước đó. Uû ở nhieơt đoơ 37oC trong 4 giờ.
Acid hoá các dung dịch thử nghieơm tređn baỉng vài giĩt HCl 1N, theđm vào moêi thử nghieơm 0,5ml dung dịch sulphanilamide 0,2% và 0,5ml N-napthylethylenediamine hydrochloride, tât cạ các thuôc thử này phại được bạo quạn trong tụ lánh. Nêu có xuât hieơn màu hoăng là dâu hieơu cụa nitratase dương tính. Nêu khođng có màu hoăng xuât hieơn có theơ có moơt trong hai trường hợp như sau:
Khođng có nitatase trong mođi trường, nitrate văn còn dieơn dieơn. Theđm vào moơt lượng rât nhỏ búi kẽm vào các thử nghieơm đeơ chuyeơn nitrate thành nitite, khi đó màu hoăng sẽ xuât hieơn.
Nitrate khođng còn trong mođi trường: theđm búi kẽm vào mođi trường văn khođng xuât hieơn màu hoăng.