- Thermonuclease cụa S aureus: cũng như tât cạ các vi sinh vaơt khác S aureus đeău có theơ toơng hợp DNAse ngối bào, như có đieơm khác bieơt so với tât cạ các loài vi sinh vaơt khác,
11. Thử nghieơm malonate
Nguyeđn taĩc: Thử nghieơm nhaỉm xác định khạ naíng cụa vi sinh vaơt sử dúng malonate như là nguoăn carbon duy nhât trong mođi trường.
Cơ sở hoá hĩc: Malonate là moơt tác nhađn ức chê enzym được phát hieơn laăn đaău tieđn khi nhaơn thây acid malonic ức chê sự chuyeơn hoá succinic thành fumaric bởi sự tân cođng vào tađm hốt đoơng cụa enzym succinic dehydrogenase. Acid malonic ức chê quá trình chuyeơn hoá
33 succinic baỉng phương thức ức chê cánh tranh do câu trúc phađn tử cụa malonic và succinic tương tự nhau.
COOH COOH
CH2 (CH2)2
COOH COOH
Khi bị malonate ức chê con đường thu hoăi naíng lượng trong chu trình Krebs, vi sinh vaơt chuyeơn sang moơt sô con đường chuyeơn hoá khác đeơ thu hoăi naíng lượng như quá trình chuyeơn từ chu trình Krebs sang chu trình Glyoxylic acid. Tuy vaơy đeơ đạm bạo cho sự phát phát trieơn bình thường khi trong mođi trường có malonate khi vi sinh vaơt đó sử dúng được cơ chât này như là moơt nguoăn cung câp naíng lượng hay nguoăn carbon. Nêu vi sinh vaơt khođng sử dúng malonate thì cơ chât này sẹ trở thành moơt chât dieơt khuaơn. Leifson cho raỉng vi sinh vaơt sử dúng malonate như là moơt cơ chê leđn men đeơ thu naíng naíng lượng. Khi vi sinh vaơt sử dúng malonate đeơ chuyeơn hoá như là nguoăn carbon thì đoăng thời chúng cũng sử dúng ammonium sulphate như là nguoăn cung câp nitơ. Kêt quạ cuôi cùng là làm mođi trường nuođi cây chuyeơn thành kieăm do có sự táo thành NaOH.
Phương pháp tiên hành: Cây vi sinh vaơt vào trong mođi trường malonate broth có chứa chât thị màu pH là bromothylmol blue nuođi ụ qua đeđm ở nhieơt đoơ 37oC. Phạn ứng dương tính khi mođi trường có dâu hieơu chuyeơn sang màu xanh dương. Phạn ưng ađm tính khi vi sinh vaơt khođng làm thay đoơi màu mođi trường.
12.Thử nghieơm làm tan gelatin
Nguyeđn taĩc: Thử nghieơm khạ naíng cụa vi sinh vaơt có theơ toơng hợp các enzym ngối bào làm thuỷ giại gelatin.
Cơ sở sinh hoá: Gelatin là moơt dáng protein có kích thước phađn tử lớn, vi sinh vaơt muôn sử dúng các protein này như moơt nguoăn cung câp naíng lượng hay vaơt lieơu xađy toơng hợp các thành phaăn khác cụa tê bào, chúng phại có khạ naíng sạn xuât các lối enzym ngối bào làm phađn giại các phađn tử gelatin thành các thành phaăn nhỏ hơn hay thành các monomer. Các enzym này thuoơc nhóm gelatinase được tiêt ra beđn ngoài tê bào.
Quá trình thuỷ phađn gelatin qua hai giai đốn như sau:
gelatinase
Protein + H2O polipeptide
gelatinase
Polipeptide + H2O aminoacidu1
Phương pháp thực hieơn: Đeơ nhaơn biêt khạ naíng làm tan gelatin cụa vi sinh vaơt, cơ chât này được theđm vào trong mođi trường nuođi cây, khi chưa cây vi sinh vaơt, mođi trường chứa gelatin sẽ ở dáng đođng đaịc. Sau khi nuođi cây, vi sinh vaơt có khạ naíng tiêt gelatinase sẽ làm mođi trường tan chạy thành dáng lỏng. Phương pháp tiên hành như sau: cây đađm sađu vi sinh vaơt vào trong mođi trường dinh dưỡng chứa gelatin, ụ ông sau khi cây ở nhieơt đoơ phòng cùng với moơt ông nghieơm chứa mođi trường ï nhưng khođng cây vi sinh vaơt vào trong khoạng 14 ngày. Cạ hai ông sau khi ụ được cho vào trong tụ lánh qua đeđm. Phạn ứng dương tính khi ông đôi chứng ở tráng
34 thái đođng đaịc và ông có vi sinh vaơt bị tan chạy. Phạn ứng ađm tính khi cạ hai ông ở tráng thái đođng đaịc.
Có theơ cây vi sinh vaơt leđn mođi trường chứa gelatine tređn đĩa đeơ tách được các khuaơn lác rieđng bieơt sau khi ụ 3 ngày ở nhieơt đoơ phòng. Nhỏ leđn tređn beă maịt đĩa 5-10ml dung dịch acid trichloacetic, các vi sinh vaơt cho khuaơn lác có quaăn trong rỏ tređn mođi trường là các vi sinh vaơt làm tan chạy gelatin.