Ảnh h−ởng của xử lý nhiệt đến kết quả làm sạch virus:

Một phần của tài liệu Nghiên cứu tẩy sạch Virut bằng kỹ thuật nuôi cấy Meristem nhằm phục tráng giống khoai tây kt2 (Trang 30 - 32)

Cùng với nuôi cấy meristem để loại trừ virus, xử lý nhiệt mô nuôi cấy cũng rất có hiệu quả. Tác dụng ức chế của nhiệt lên sự tổng hợp của virus đã đ−ợc Kunkel L. O.[35] phát hiện và đ−ợc các tác giả khác tiếp tục nghiên cứu.

Cơ sở lý luận của việc xử lý nhiệt mô nuôi cấy: theo Baker R. [25] mỗi cơ quan cần có một nhiệt độ thích hợp cho sự sinh tr−ởng, phát triển. Khi nhiệt độ tăng tới mức nào đó thì tốc độ sinh tr−ởng giảm. Điểm mà nhiệt độ đ−ợc coi là xử lý nhiệt là điểm bắt đầu có tác dụng làm giảm hoạt tính loại trừ tác nhân gây bệnh, tăng đến nhiệt độ nhất định nào đó sẽ có tác dụng loại trừ hoàn toàn. Từ điểm nhiệt độ xử lý trở lên hiệu quả xử lý nhiệt tăng lên, nh−ng đến một nhiệt độ nhất định thì cơ quan và tác nhân gây bệnh đều bị tiêu diệt gọi là điểm gây chết. Nh− vậy, cần phải xác định một ng−ỡng nhiệt độ vừa có tác dụng loại trừ bệnh vừa đảm bảo cho sự tồn tại của mô, cơ quan nuôi cấy.

Thí nghiệm trên cơ sở của Baker R., Kaiser W. J. (1984)[33] thấy rằng khi duy trì ở nhiệt độ 370c từ 4 - 5 tuần thì tất cả các củ khoai tây ở độ lớn 50 - 100g đều sạch virus V. Virus cuốn lá đ−ợc hoàn toàn làm sạch ở củ khoai tây sau 30 ngày giữ ở nhiệt độ 370c, nh−ng củ không bị hại. Còn ở nhiệt độ 360c (40 ngày), 370c (30 ngày), 400c (4giờ) không có hiệu lực lên bệnh khảm

rosette necrosis và pseudomanas solanacearum.

Kassanis (1957)[34] khi đ−a cây bị nhiễm vào nhiệt độ 35 - 39oC trong thời gian từ 2 - 5 tuần, một số loại virus không có khả năng phát triển trong điều kiện này sẽ bị tiêu huỷ, kết quả sẽ thu đ−ợc cây sạch virus đó.

Tuy nhiên, theo Bhojwani và CS (1983)[27] cho biết không phải tất cả các virus đều mẫn cảm với nhiệt độ, đa số các virus X đều t−ơng đối chịu đ−ợc nhiệt độ. Do vậy, nếu chỉ xử lý nhiệt độ không thôi thì cũng không đạt đ−ợc kết quả mong muốn. Vậy muốn đạt kết quả cao phải nuôi cấy meristem kết hợp với xử lý nhiệt độ. Thompson A. D. (1957)[48] đã nghiên cứu tổ hợp 2 ph−ơng pháp nuôi cấy meristem kết hợp với xử lý nhiệt độ để loại trừ virus A, X, Y trên cây khoai tây. ứng dụng kỹ thuật này Mc Donall (1973) đã thu đ−ợc cây khoai tây sạch virus X, S.; Tawantziz S. M.; Southord S. G. (1983) cũng thu đ−ợc kết quả t−ơng tự (Mai Thị Tân, 1998)[12].

Smith và Mellor (1967)[46] cũng thành công trong việc tẩy sạch virus X và S khi nuôi cấy Meristem ở kích th−ớc 1mm có kết hợp với ph−ơng pháp xử lý nhiệt.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu tẩy sạch Virut bằng kỹ thuật nuôi cấy Meristem nhằm phục tráng giống khoai tây kt2 (Trang 30 - 32)