gam chất xúc tác (1 gam CuSO4 + 4 gam K2SO4 ) . Đun trên bếp điện cho sơi từ từ , khơng để trào bọt , cho đến khi dung dịch trong suốt khơng màu hoặc cĩ màu xanh lơ của CuSO4, để nguội . Thời kỳ này mất khoảng 6 h - 8h .
Chuyển dung dịch đã vơ cơ hĩa vào bình định mức , rữa bình Kendan 2 lần với nước cất , nước rữa cũng chuyển vào bình định mức và thêm nước cất cho đủ 50 ml . Lấy dung dịch vừa chuẩn bị trên cho vào bình chưng cất đạm cùng với 5 giọt chỉ thị màu Tarshiro . Dùng bình tam giác 250 ml để hứng , dùng buret cho thật chính xác vào bình hứng 20 ml H2SO4 0,1 N , cho thêm vào bình hứng 5 giọt chỉ thị màu Tarshiro . Đưa bình hứng tam giác cĩ chứa H2SO4 0,1 N vào máy cất đạm , nhúng đầu ống sinh hàn vào bình .
Dùng NaOH 50% để trung hịa dung dịch đạm ở bình cất , sau khi chỉ thị màu Tarshiro chuyển màu , thêm 50 ml NaOH 50% nữa . Cho NaOH 50% vào bình cất qua phểu cĩ khĩa và khi NaOH 50% vào thì lập tức NH3
được giải phĩng, bay sang bình hứng tam giác .
Đun để cất kéo hơi nước , đun cho đến khi thấy trong lịng ống sinh hàn bắt đầu cĩ những giọt nước thì ta cĩ thể hạ bình hứng . Dùng bình tia rữa đầu ống sinh hàn . Lấy bình hứng ra thêm vào 3 giọt chỉ thị màu Tarshiro và dùng buret chứa NaOH 0,1 N để chuẩn độ lượng H2SO4 0,1 N thừa trong bình hứng khơng tác dụng với NH3 . Cho xuống từng giọt NaOH 0,1 N cho đến khi trong bình hứng chuyển từ màu tím sang màu tím bẩn rồi sang màu xanh lục . Ghi lại lượng NaOH 0,1 N đã dùng để chuẩn độ .
Tính kết quả : Hàm lượng nitơ tồn phần theo % được tính bằng cơng thức :
0,0014 ( N - n ) . 100 N% =
P
N :Số ml H2SO4 0,1 N đưa vào bình hứng tam giác (20 ml)
n :Số ml NaOH 0,1N dùng để trung hịa lượng H2SO4 0,1N thừa.
P : Trọng lượng mẩu tính bằng gam (1 gam ) Sau khi tính được % prơtêin trong 100gam mẩu ở điều kiện bình thường , ta qui về % prơtêin trong 100 gam mẩu khơ tuyệt đối . Muốn vậy phải xác định độ ẩm tương đối W% của mẩu .
W% = Trọng lượng nước trong mẩu / Trọng lượng ban đầu của mẫu.
Hàm lượng prơtêin trong 100 gam mẫu khơ = (X .
100)/(100 - W%).
Mỗi cơng thức nhắc lại 3 lần .
2 0) Hà m lượng prơtêin tinh :
Theo phương pháp của Green Wald , dùng axít tricloaxêtic ( ATC)
- Nguyên t ắc : Chiết prơtêin từ nguyên liệu bằng cách kết tủa prơtit bởi ATC . Tách kết tủa , rữa sạch