tự khác: thực hiện đồng nhất mẫu trong môi trường tăng sinh đã được làm âm đến 40°C.
- Đối với sản phẩm chứa coca: đồng nhất mẫu trong môi trường Skim
Milk Broth được làm âm ở 40°C.
- Đối với đừa, các sản phẩm của dừa và các mẫu có hmà lượng chất
béo cao: đồng nhất mẫu với BPW, sau đó thêm vào 2 - 3 giọt Triton X-100
trước khi ủ tăng sinh.
b) Bước tăng sinh chọn lọc
Lắc để trộn đều dung dịch tăng sinh, và chuyên 0,Iml sang 10ml môi
trường tăng sinh RV đã được ủ ấm đến 42°C. Ủ ở 42°C trong 18 - 24 giờ. Khi cần thiết cần kéo đài thời gian ủ thêm 24 giờ. Khi cần thiết cần kéo đài thời gian ủ thêm 24 giờ.
Một số môi trường tăng sinh chọn lọc khác như Selenite Cysteine Broth, Tetrethionate Muller- Kauffman cũng được dùng. Mỗi loại môi trường chỉ có tác dụng chọn lọc trên một đặc điểm phát triỀn của
Salmonella, một số đòng Salmonella trăng trưởng được trong môi trường
này nhưng lại không tăng trưởng được trong môi trường khác.Do vậy, đề tăng khả năng phát hiện tất cả các dòng Saửmonella hiện diện trong mẫu thực phẩm cần phải dùng ít nhất 2 loại môi trường tăng sinh chọn lọc khác nhau cho cùng một mẫu. Ngoài ra, mỗi môi trường chọn lọc được ủ ở một nhiệt độ nuôi cấy khác nhua như môi trường RV được ủ ở 42°C, môi trường TT và SC được ủ ở 37C trong 22 - 24 giờ.
€) Bước phân lập và nhận diện
Dùng que cấy vòng thực hiện kỹ thuật cấy phân lập khuẩn lạc đơn với giống từ dịch tăng sinh chọn lọc lên đĩa môi trường chọn lọc phân biệt đặc trưng cho Saửmonela như XLD, HE, BS...Cường độ chọn lọc và mức độ
Khoá -Cuận Cốt (giiệp Š(0Ø7%6: 2uần -.Đê Đỗ (uyên
phân biệt thể hiện ở hình thái khuẩn lạc của ,Saimonelia trên từng môi trường cũng khác nhau. Để chọn lọc và nhận dạng được tất cả các dòng Saửnonella phải dùng tôi thiểu 2 môi trường chọn lọc phân biệt khác nhau cho cùng một mẫu. Các biểu hiện của S$zmonella trên từng môi trường khác nhau như sau: - Môi trường XLD: Khuẩn lạc có màu hồng trong suốt, có hay không
có tâm đen. Một số dòng Sanonella có thê có tâm đen bóng rất lớn có thê
chiếm gần hết khuẩn lạc.
- Môi trường HE: khuẩn lạc có màu thay đổi từ xanh đương đến xanh
lục, có hay không có tâm đen. Một số dòng ,Sø2monella có tâm đen bóng rất
lớn có thể chiếm gần hết khuẩn lạc.