Biopharma Co.Gtd — Hàn Quốc.
Khoá -Cuận Cốt (giiệp Š(0Ø7%6: 2uần -.Đê Đỗ (uyên
1.3. Phương pháp phát hiện Sœimonella 1.3.1. Phương pháp truyền thống
1.3.1.1. Nguyên tắc
Salmonella có thể được phát hiện (phân tích định tính) bằng một qui trình bao gồm 4 bước: bước tăng sinh, tăng sinh chọn lọc, phân lập và khẳng định. $anonella thường có mặt trong mẫu với số lượng nhỏ, bị tổn thương và cùng hiện diện chung với một số lượng lớn vi sinh vật thuộc họ
Enterobactcriaceae có tính cạnh tranh mạnh, ức chế sự tăng trưởng của Salmonella.
* Bước tăng sinh:
Tùy theo đặc tính thành phần hóa học của mẫu mà cần chọn qui trình
tăng sinh phù hợp. Thông thường tỉ lệ giữa mẫu và môi trường là 1:9 nhưng
có thê thay đối.
* Bước tăng sinh chọn lọc:
Các môi trường tăng sinh chọn lọc dùng dễ phát hiện ,Saonella trong
mẫu thực phẩm là Rappaport Vassiliadis (RV), Selenite Cystein
Broth,Tetrathionate Mueler Kauffmanm Broth (TT)...những nghiên cứu gần
đây cho thấy môi trường RV có thê thay thế cho các môi trường khác. Hiện
nay, người ta khuyến khích là nên dùng ít nhất 2 loại môi trường tăng sinh chọn lọc để phát hiện tất cả Serotype Salmonella nếu có hiện diện trong mẫu.
* Bước phân lập:
Nhằm tách và nhận dạng Sa”monella khỏi các quần thể vi sinh vật
khác trong mẫu. Nhiều loại môi trường rắn khác nhau được sử dụng để phân lập Saimonella. Hiện nay, vcác tiêu chuẩn vệ sinh an toàn thực phẩm khuyến khích sử dụng ít nhất 2 loại môi trường phân lập khác nhau để tăng cường
Khoá -Cuận Cốt (giiệp Š(0Ø7%6: 2uần -.Đê Đỗ (uyên
khả năng phát hiện tất cá các đòng Sanonelia, đặc biệt là môi trường XLD được sử dụng nhiều nhất.
* Bước khẳng định
Nhằm xác định lại các khuẩn lạc đặc trưng của $zimonella xuất hiện trên môi trường phân lập. Bước này được thực hiện trên các thử nghiệm sinh hóa và các thử nghiệm huyết thanh đặc trưng cho ,Saiomonella. Các thử
nghiệm sinh hóa được khuyến khích sử dụng là KIA/TSL, Indol, LDC (Iysine decarboxylase), ODC (ornithine decarboxylase), urea, Mamtol, sorbitol, các thử nghiệm huyết thanh O hay H.
1.3.1.2. Phương pháp thực hiện a) Bước tăng sinh a) Bước tăng sinh
Đối với mẫu thông thường tiến hành cân 25g mẫu trong túi PE vô
trùng, bố sung 225ml dung dịch BPW và đồng nhất mẫu trong 15 hoặc 30
giây. Ủ ở 37°C trong 18 - 24 giờ. Dối với một số loại thực phẩm có chứa các
chất có thể gây độc hoặc ức chế sự tăng trưởng của Sazonella cần thực hiện
qui trình tăng sinh đặc biệt như sau:
(adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});