c. Giai đoạn làm khô thứ cấp
2.2.4. Iỉ ương pháp đánh giá tỉ lệ sống sót của vi khuẩn trong một số chế
phẩm probiotic
Để đánh giá tỉ lệ sống sót của vi khuẩn trong chế phẩm probiotic ta sử dụng phương pháp đếm số lượng tế bào trong một đơn vị liều của chế phẩm.
Cách làm: Phá loãng một đơn vị liều của chế phẩm vào 100ml nước cất đã hấp tiệt trùng ở 0,6atm/30 phút, để nguội, lắc đều. Sau đó dùng phương pháp pha loãng liên tục để tính số lượng tế bào theo công thức 1:
A=A*k*100
Với A: là số tế bào trong một đơn vị chế phẩm Ak: là số lượng tế bào tại nồng độ pha loãng k
k : là hệ số pha loãng
2.2.5. Phương pháp đánh giá tỉ lệ sống sót của L. acidophilus; s. cerevisiae
Tiến hành đếm số lượng tế bào Lactobacillus acidophilus, Saccharomyces cerevisiae trước và ngay sau đông khô.
Số lượng tế bào trước khi đông khô chính là số lượng tế bào trong 100ml dịch tế bào. Sử dụng phương pháp pha loãng liên tục, tính số lượng tế bào theo công thức 1.
Số lượng tế bào ngay sau đông khô được xác định như sau: Cân chính xác 0,20g chế phẩm ngay sau đông khô pha loãng vào 100ml nước cất đã hấp tiệt trùng ở 0.6atm/30phút; để nguội, lắc đều. Sau đó dùng phương pháp pha loãng liên tục để đếm số lượng tế bào trong 0,20g sản phẩm.
Số lượng tế bào ngay sau đông khô được tính bằng công thức 2: At= A*m/0.2
Với At : là Số lượng tế bào trong sản phẩm ngay sau đông khô
A: là số lượng tế bào trong 0,20g sản phẩm ngay sau đông khô m: là khối lượng sản phẩm
2.2.6. Phương pháp đánh giá độ ổn định của chế phẩm với các môi trường độn khác nhau và điều kiện bảo quản khác nhau
Sản phẩm sau khi đông khô với các môi trường độn là sữa gầy 5%, 10%, 30%; lactose 10%, 30%; nước cất được đựng trong các ống nghiệm nút kín. Các ống nghiệm này được bảo quản trong các điều kiện: tủ lạnh (5°C); nhiệt độ phòng (25°-30°C); tủ ấm (40°C).
Sau các khoảng thời gian 2, 4, 6, 8 và 12 tuần tiến hành đếm số lượng tế bào trong 0,20g chế phẩm với các môi trường độn khác nhau ở điều kiện bảo quản khác nhau.