3. í nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài
2.6.1.2. Bổ sung dinh dưỡng cho mựn cưa bồ đề trước khi đúng bịch
Nguyờn liệu mựn cưa sau khi xử lý đạt được pH và độ ẩm thớch hợp thỡ tiến hành bổ sung thờm cỏc chất phụ gia khỏc nhằm cung cấp thờm một phần dinh dưỡng cho cơ chất trồng nấm theo tỷ lệ được ghi ở bảng 2.5.
Bảng 2.5. Tỷ lệ cơ chất và phụ gia trong hai cụng thức
CT1 CT2
Nguyờn liệu Khối lượng
(kg)
Tớnh theo % Khối lượng (kg) Tớnh theo % Mựn cưa 280 92.4 280 85.9 Bột nhẹ CaCO3 4,5 1,5 4,9 1,5 Cỏm gạo 9 3 16.3 5 Cỏm ngụ 9 3 26 8 MgSO4 0,3 0,1 0,32 0,1 Đường kớnh trắng - - 3.3 1 2.6.1.3. Đúng tỳi Tiến hành đúng bịch:
+ Tỳi đúng bịch phải được điều chỉnh đỏy để khi cho nguyờn liệu vào bịch cơ chất khụng bị xiờn vẹo. Tiếp đú là cụng đoạn làm cổ cứng, đậy nỳt bụng khụng thấm nước và nỳt nhựa hoặc giấy
bờn ngoài trước khi khử trựng. + Yờu cầu của bịch nguyờn liệu: chiều cao đạt
khoảng 16 cm, trọng lượng trung bỡnh bịch cú cơ
chất mựn cưa bồ đề là 1,3 kg. Hỡnh 2.3. Bịch nấm sau khi đúng tỳi
2.6.1.4. Thanh trựng
+ Phương phỏp 1: hấp cỏch thủy ở nhiệt độ 1000C, thời gian kộo dài 10 – 12 giờ.
+ Phương phỏp 2: thanh trựng bằng nồi ỏp suất (Autoclave) ở nhiệt độ 119 – 1260 C (ỏp suất đạt 1,2 – 1,5 at) trong thời gian 90 – 120 phỳt.
Hỡnh 2.4. Nồi hấp thanh trựng Hỡnh 2.5. Nồi hấp thanh trựng hỡnh ống hỡnh trụ
2.6.1.5. Cấy giống
2.6.1.5.1. Chuẩn bị
- Phũng cấy: phũng cấy giống phải sạch (được thanh trựng định kỳ bằng bột lưu huỳnh).
- Dụng cụ cấy giống: que cấy, panh kẹp, đốn cồn, bàn cấy, cồn sỏt trựng…
- Nguyờn liệu: đó được thanh trựng, để nguội.
- Giống: sử dụng hai loại giống chủ yếu là trờn hạt và trờn que gỗ. 2.6.1.5.2. Cấy giống
Phương phỏp 1: cấy giống trờn que gỗ
+ Với phương phỏp này cần tạo lỗ ở tỳi nguyờn liệu cú đường kớnh 1,8 – 2cm và sõu 15 - 17cm. Khi cấy giống đặt tỳi nguyờn liệu gần đốn cồn và tỳi giống, sau đú gắp từng que ở tỳi giống cấy vào tỳi nguyờn liệu
Phương phỏp 2:
Sử dụng giống Linh Chi cấy trờn hạt. Ta dựng que cấy kều nhẹ giống cho đều trờn bề mặt tỳi nguyờn liệu trỏnh giập nỏt giống.
Lượng giống: 10 - 15gam giống cho 1 tỳi nguyờn liệu (một tỳi giống 300gam cấy đủ cho 25 – 30 tỳi nguyờn liệu).
- Chỳ ý :
+ Giống cấy đảm bảo đỳng độ tuổi.
+ Trước khi cấy giống dựng cồn lau miệng chai giống, búc tỏch lớp màng trờn bề mặt để hạt giống khụng bị nỏt.
- Trong quỏ trỡnh cấy, chai giống luụn để nằm ngang.
- Sau khi cấy giống đậy lại nỳt bụng, vận chuyển tỳi vào khu vực ươm. - Thường xuyờn vệ sinh sạch sẽ phũng cấy giống.
2.6.1.6.Ươm sợi
Chuyển nhẹ nhàng bịch nấm vào nhà ươm và đặt trờn cỏc giàn giỏ hoặc xếp thành luống. Khoảng cỏch giữa cỏc bịch là 2 – 3 cm. Giữa cỏc giàn luống cú lối đi để kiểm tra.
Trong thời gian ươm khụng được tưới nước, hạn chế tối đa việc vận chuyển.
Trong quỏ trỡnh sợi nấm phỏt triển nếu thấy cú tỳi bị nhiễm cần phải loại bỏ ngay khỏi khu vực ươm, đồng thời tỡm
nguyờn nhõn để cú cỏch khắc phục: Hỡnh 2.6. Phũng ươm sợi
+ Bịch nấm bị nhiễm bề mặt phần lớn do thao tỏc cấy và phũng giống ụ nhiễm.
+ Bịch nấm bị nhiễm từng phần hoặc toàn bộ cú thể do bị thủng hoặc hấp vụ trựng chưa đạt yờu cầu.
2.6.1.7. Chăm súc
Trong quỏ trỡnh chăm súc, thu hỏi Linh chi cú hai phương phỏp sau: 2.6.1.7.1. Phương phỏp khụng phủ đất
- Kể từ ngày cấy giống đến khi rạch bịch (khoảng 25 – 30 ngày) sợi
nấm đó ăn kớn 3
4 tỳi. Tiến hành rạch hai vết rạch sõu vào trong bịch 0,2 – 0,5 cm; đối xứng trờn bề mặt tỳi nấm. Đặt bịch nấm trờn giàn cỏch nhau 2 - 3 cm để nấm ra khụng chạm vào nhau.
- Từ 7 – 10 ngày đầu chủ yếu tưới nước trờn nền nhà, đảm bảo độ ẩm 80 – 90% , thụng thoỏng vừa phải.
- Khi quả thể nấm bắt đầu mọc từ cỏc vết rạch hoặc qua nỳt bụng thỡ ngoài việc tạo ẩm khụng khớ cú thể tưới phun sương nhẹ vào tỳi nấm mỗi ngày từ 1 – 3 lần (tựy thuộc vào điều kiện thời tiết). Chế độ chăm súc như trờn được duy trỡ liờn tục cho đến khi viền trắng trờn vành mũ quả thể khụng cũn nữa là hỏi được.
2.6.1.7.2. Phương phỏp phủ đất
a) Cỏch phủ đất
Khi sợi nấm đó ăn kớn khoảng 3
4 bịch, gỡ bỏ nỳt bụng, mở miệng bịch, phủ lờn trờn bề mặt một lớp đất cú chiều dày 2 – 3 cm.
b) Chăm súc sau khi phủ đất
Nếu đất khụ cần phải tưới rất cẩn thận (tưới phun sương) để đất ẩm trở lại. Tuyệt đối khụng tưới nhiều, nước thấm xuống nền cơ chất sẽ gõy nhiễm bệnh, ảnh hưởng đến quỏ trỡnh hỡnh thành quả thể nấm. Trong thời gian 7 – 10 ngày đầu (kể từ lỳc phủ đất) cần duy trỡ độ ẩm khụng khớ trong nhà đạt 80 – 90% bằng cỏch tưới nước thường xuyờn trờn nền nhà. Khi quả thể bắt đầu
hỡnh thành và nhụ lờn trờn mặt lớp đất phủ cấn duy trỡ độ ẩm liờn tục như trờn cho đến thời điểm thu hỏi được. Thời gian từ khi nấm lờn đến lỳc thu hoạch kộo dài khoảng 65 – 70 ngày.
Khi đú ngoài việc duy trỡ độ ẩm trong phũng thỡ ta cũn phải tưới phun sương nhẹ trực tiếp trờn bề mặt đất phủ 1 – 3 lần trong ngày (tựy theo điều kiện thời tiết) mục đớch để giỳp đất phủ luụn duy trỡ độ ẩm (tương tự độ ẩm của đất trồng rau). Việc chăm súc như trờn kộo dài liờn tục cho tới khi viền màu trắng trờn mũ nấm khụng cũn nữa, lỳc đú nấm đến tuổi thu hỏi.
2.6.1.8. Chăm súc thu hỏi
2.6.1.8.1. Chăm súc
- Xếp cỏc bịch nấm lờn cỏc giàn giỏ trong nhà chăm súc.
- Trong vũng 7 – 10 ngày đầu chủ yếu tưới nước xuống nền nhà để tạo ẩm. Sau đú tưới phun sương nhẹ vào bịch nấm khoảng 3 – 5 lần mỗi ngày (tựy theo điều kiện thời tiết), sao cho mũ nấm luụn ẩm. Chế độ chăm súc thu hỏi như trờn được duy trỡ liờn tục cho đến khi viền trắng trờn vành mũ quả thể khụng cũn nữa và cú màu đồng nhất với màu của cuống nấm là thu hỏi được. 2.6.1.8.2. Thu hỏi
- Trước khi thu hỏi phải ngừng tưới nước từ 36 – 48 giờ. Dựng dao hoặc kộo sắc cắt chõn nấm sỏt bề mặt bịch. Dựng vụi với nồng độ 5% quột lờn bề mặt vết cắt để khử trựng.
- Quả thể nấm sau khi thu hỏi được vệ sinh sạch sẽ, phơi khụ hoặc sấy ở nhiệt độ 40 – 500C.
- Độ ẩm của nấm khụ dưới 13%, tỷ lệ khoảng 3 kg tươi được 1 kg khụ. - Khi thu hỏi hết đợt 1, tiến hành chăm súc như lỳc ban đầu để tận thu đợt 2.
- Năng suất thu hoạch đạt 6 – 9% tươi, tương đương 1,8 – 3% khụ (1 tấn nguyờn liệu thu được 18 – 30 kg nấm Linh chi). Khi kết thỳc đợt nuụi
trồng cần phải vệ sinh và thanh trựng nhà xưởng bằng foocmon với nồng độ 0,5%. 2.6.1.9. Sơ đồ quy trỡnh cụng nghệ Phõn lập Cấy giống Cấy giống
Hỡnh 2.7. Sơ đồ nuụi trồng nấm Linh chi
Nguyờn liệu khụ
Xử lý nguyờn liệu
Nguyờn liệu sau khi xử lý và cỏc chất phụ gia Đúng bịch 25 x 30 cm Hấp khử trựng ở nhiệt độ 95 – 1000C trong 10 - 12 h Bịch nuụi trồng để nguội Ươm sợi Giống sản xuất Giống gốc (bảo quản lạnh) Mẫu nấm tươi Thu thập mẫu
2.6.2. Nghiờn cứu ảnh hưởng của nhiệt độ đến sinh trưởng và phỏt triển hệ sợi của 4 chủng Linh chi hệ sợi của 4 chủng Linh chi
2.6.2.1. Nghiờn cứu ảnh hưởng của nhiệt độ đến thời gian bung sợi
Quan sỏt và theo dừi sự phỏt triển hệ sợi theo chỉ tiờu sau: + Thời gian bung sợi ở 2 đợt.
2.6.2.2. Nghiờn cứu ảnh hưởng của nhiệt độ đến thời gian hệ sợi lan phủ
Quan sỏt và theo dừi sự phỏt triển hệ sợi theo chỉ tiờu sau:
+ Tốc độ mọc hệ sợi khi hệ sợi lan phủ 50% bịch, và 100% bịch ở 2 đợt của từng chủng Linh chi trờn 2 cụng thức dinh duỡng
2.6.3. Nghiờn cứu sự sinh trưởng và phỏt triển của hệ sợi ở 4 chủng Linh chi trờn 2 cụng thức dinh dưỡng chi trờn 2 cụng thức dinh dưỡng
Dựa vào kết quả thu được ở thớ nghiệm 2.6.2.2, so sỏnh cỏc chỉ tiờu: + Tốc độ mọc của hệ sợi khi hệ sợi lan phủ 50% bịch và 100% bịch ở từng chủng Linh chi.
+ Tốc độ mọc của hệ sợi khi hệ sợi lan phủ 50% bịch và 100% bịch trờn 2 cụng thức dinh dưỡng.
+ Đặc điểm hệ sợi.
2.6.4. Nghiờn cứu ảnh hưởng của độ ẩm nguyờn liệu tới sự sinh trưởng và phỏt triển hệ sợi của 4 chủng Linh chi phỏt triển hệ sợi của 4 chủng Linh chi
Chỉ tiờu theo dừi:
+ Tốc độ sinh trưởng trung bỡnh của hệ sợi một ngày.
+ Để xỏc định nhiệt độ đống ủ, dựng phương phỏp sấy: lần lượt cõn ba mẫu mựn cưa đem đặt vào tủ sấy ở nhiệt độ 105oC tới khi khối lượng mỗi mẫu mựn cưa khụng thay đổi đem đi cõn. Độ ẩm đống ủ được xỏc định bằng cụng thức:
W (%) = a b 100%
a
Trong đú:
W (%): Độ ẩm đống ủ
a (g) : Khối lượng của mựn cưa trước khi sấy khụ b (g) : Khối lượng của mựn cưa sau khi sấy khụ
+ Để đo tốc độ mọc của hệ sợi, dựng phương phỏp đo độ dài hệ sợi nấm. Sử dụng thước đo độ dài cú đơn vị cm. Khi hệ sợi bắt đầu lan phủ, chọn một vựng nhất định trờn bịch để theo dừi, dựng bỳt đỏnh dấu phớa ngoài bịch ở vị trớ tương ứng của hệ sợi. Hàng ngày đo một lần. Sau mỗi lần đo độ lan của hệ sợi, dựng bỳt đỏnh dấu để làm mốc cho lần kiểm tra tiếp theo. Lấy kết quả trung bỡnh của cỏc lần đo đú để xỏc định tốc độ mọc sợi trung bỡnh một ngày của 4 chủng Linh chi trờn 2 cụng thức dinh dưỡng.
2.6.5. Theo dừi khả năng nhiễm mốc trong quỏ trỡnh nuụi sợi
Trong quỏ trỡnh chăm súc, tiến hành theo dừi ảnh hưởng của nhiệt độ, độ ẩm nguyờn liệu đến khả năng nhiễm mốc của bịch Linh chi theo chỉ tiờu:
+ Tỷ lệ nhiễm mốc.
Số bịch nấm bị nhiễm mốc
Tỷ lệ bịch nấm nhiễm mốc = ì 100%
Tổng số bịch nấm
2.6.6. Nghiờn cứu ảnh hưởng của nhiệt độ, độ ẩm mụi trường tới sự sinh
trưởng và phỏt triển quả thể nấm Linh chi trờn hai cụng thức dinh dưỡng khỏc nhau
Quan sỏt và theo dừi sự phỏt triển của quả thể nấm Linh chi theo chỉ tiờu sau:
+ Tốc độ phỏt triển quả thể ở 2 đợt của từng chủng Linh chi trờn 2 cụng thức nuụi trồng.
2.6.7. Nghiờn cứu sự sinh trưởng và phỏt triển của quả thể ở 4 chủng Linh chi trờn 2 cụng thức dinh dưỡng
Dựa vào kết quả ở thớ nghiệm 2.6.6, so sỏnh cỏc chỉ tiờu sau: + Tốc độ phỏt triển quả thể của cỏc chủng nấm khỏc nhau. + Tốc độ phỏt triển quả thể ở 2 CT dinh dưỡng khỏc nhau. + Đặc điểm quả thể.
2.6.8. Nghiờn cứu ảnh hưởng của nhiệt độ, độ ẩm mụi trường tới năng suất nấm Linh chi
Khi toàn bộ mũ nấm cú màu vàng sẫm lỳc đú nấm đó già cú thể thu hỏi được. Theo dừi cỏc chỉ tiờu sau:
+ Trọng lượng tươi, trọng lượng khụ ở 2 đợt + Năng suất của quả thể ở 2 đợt
Để xỏc định năng suất của nấm, sau khi thu hỏi quả thể từng đợt, cõn rồi tớnh năng suất. Năng suất quả thể sau mỗi đợt trờn mỗi nguyờn liệu là: Khối lượng quả thể tươi
Năng suất (%) = ì 100%
Số kg nguyờn liệu ban đầu
2.6.9. Nghiờn cứu ảnh hưởng của 2 cụng thức dinh dưỡng đến năng suất và chất lượng Linh chi
Dựa vào kết quả thớ nghiệm 2.6.8 so sỏnh cỏc chỉ tiờu:
+ So sỏnh trọng lượng tươi, trọng lượng khụ và năng suất nấm của từng chủng Linh chi trờn 2 cụng thức nuụi trồng.
2.6.10. Phương phỏp xử lý số liệu
Số liệu theo dừi thu được theo phương phỏp thống kờ sinh học. Số liệu xử lý dựng phần mềm Excell.
2.7. Thời gian nghiờn cứu
CHƯƠNG 3
KẾT QUẢ NGHIấN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1. Giai đoạn nuụi sợi
3.1.1. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự sinh trưởng và phỏt triển hệ sợi của 4 chủng Linh chi
Ở đợt 1, do thời tiết vào vụ đụng lạnh và hanh khụ, nờn cú nhiệt độ dao động từ 10 – 180C. Ở đợt 2, do thời tiết vào mựa thu, mỏt mẻ nờn cú nhiệt độ dao động từ 20 – 280C.
Để nghiờn cứu ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự sinh trưởng và phỏt triển hệ sợi, hai đợt đều cú cỏch bố trớ thớ nghiệm như sau:
Chỳng tụi chia thớ nghiệm chia làm 2 lụ, mỗi cụng thức thớ nghiệm ứng với một lụ, mỗi lụ thớ nghiệm là 40 bịch. Mỗi cụng thức thớ nghiệm lặp lại 3 lần. Trọng lượng trung bỡnh của bịch cú chất mựn cưa của bồ đề là 1,3kg. Bịch cơ chất sau khi khử trựng thỡ được cấy giống vào. Giống sử dụng là giống cấp II trờn mụi trường MIII (mụi trường hạt thúc cú phối trộn 20% mựn cưa cao su).
3.1.1.1. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến thời gian bung sợi
Bảng 3.6. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến thời gian bung sợi
Thời gian bung sợi (ngày) Nhiệt độ Cụng thức mụi trường DT3 DT4 DT5 DT6 CT1 8 7 8 6 Đợt 1 10 – 180C CT2 7 7 9 6 CT1 5 4 5 3 Đợt 2 20 – 280C CT2 4 4 5 3
Qua bảng 3.6, chỳng tụi thấy ở nhiệt độ thấp (10 – 180C) thời gian bung sợi ở bốn chủng Linh chi là rất chậm từ 5 – 9 ngày, đặc biệt là chủng DT5 cú thời gian bung sợi chậm nhất 8 - 9 ngày. Tuy nhiờn đợt 2, nhiệt độ từ 20 – 280C thỡ thời gian bung sợi rất nhanh, chỉ mất từ 3 – 5 ngày, nhanh nhất là chủng DT6 (3 ngày). 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 CT1 CT2 CT1 CT2 t = 10 – 18 t = 20 – 28 DT3 DT4 DT5 DT6 (t: nhiệt độ (0C))
Hỡnh 3.8: Thời gian bung sợi của 2 đợt thớ nghiệm trờn 4 chủng Linh chi ở 2 cụng thức dinh dưỡng
Như vậy nhiệt độ cú ảnh hưởng lớn đến thời gian bung sợi, nhiệt độ quỏ thấp thỡ thời gian bung sợi chậm. Nhiệt độ từ 20 – 280C thỡ thời gian bung sợi nhanh.
3.1.1.2. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến thời gian hệ sợi lan phủ
Để nghiờn cứu ảnh hưởng của nhiệt độ đến thời gian hệ sợi lan phủ, chỳng tụi ghi ngày hệ sợi bắt đầu xuất hiện, ngày hệ sợi lan phủ được 50% bịch và ngày hệ sợi lan phủ kớn bịch của bốn chủng Linh chi trờn hai cụng thức ở từng đợt. Sau đú xỏc định số ngày hệ sợi lan phủ được 50% bịch và số ngày hệ sợi lan phủ kin bịch của bốn chủng Linh chi trờn hai cụng thức dinh dưỡng ở từng đợt. Kết quả thu được trỡnh bày ở bảng 3.7
Bảng 3.7. Thời gian phỏt triển pha hệ sợi của 4 chủng Linh chi trờn 2 cụng thức dinh dưỡng khỏc nhau ở 2 đợt thớ nghiệm
Thời gian trung bỡnh hệ sợi lan phủ (ngày) Đợt 1 (10 – 180C) Đợt 2 (20 – 280C) Chủng nấm Cụng thức mụi trường 50% bịch 100% bịch 50% bịch 100% bịch CT1 22 33 19 29 DT3 CT2 20 32 17 26 CT1 19 29 16 25 DT4 CT2 18 28 15 23 CT1 26 35 22 33 DT5 CT2 24 31 20 30 CT1 17 25 14 23 DT6 CT2 16 24 12 21 0 5 10 15 20 25 30 CT1 CT2 CT1 CT2 CT1 CT2 CT1 CT2 DT3 DT4 DT5 DT6 t = 10 - 18 t = 20 - 28 (t: nhiệt độ (0C))
Hỡnh 3.9: Thời gian hệ sợi lan phủ 50% bịch của 2 đợt thớ nghiệm trờn 4 chủng Linh chi ở 2 cụng thức dinh dưỡng
0 5 10 15 20 25 30 35 CT1 CT2 CT1 CT2 CT1 CT2 CT1 CT2 DT3 DT4 DT5 DT6 t = 10 - 18 t = 20 - 28 (t: nhiệt độ (0C))
Hỡnh 3.10: Thời gian hệ sợi lan phủ 100% bịch của 2 đợt thớ nghiệm trờn 4 chủng Linh chi ở 2 cụng thức nuụi trồng